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柳正春
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
武汉大学中南医院
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发文基金:
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
吴琴琴
武汉大学中南医院
谢丛华
武汉大学中南医院
江换钢
武汉大学中南医院
杨垒
武汉大学中南医院
周福祥
武汉大学中南医院
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siRNA抑制TPP1对人骨肉瘤端粒酶阴性细胞U2OS放射敏感性的影响
被引量:1
2013年
目的 观察人骨肉瘤细胞U2OS中TPP1表达受抑制后其端粒长度和放射敏感性变化,探讨在端粒酶阴性肿瘤细胞中TPP1与端粒长度及放射敏感性之间的关系。方法 根据TPP1 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染U2OS细胞;使用RT-PCR和Western blot分别在基因和蛋白水平检测干扰前后TPP1表达量的变化;利用Real-time PCR检测细胞端粒长度的变化;运用流式细胞术(Annexin V-FITC法)检测细胞凋亡情况;采用克隆形成实验分析放射敏感性的变化。结果 siRNA转染U2OS细胞后,siRNA干扰组的mRNA基因表达抑制率为(65.70±2.10)%,蛋白表达抑制率为(74.80±3.20)%;siRNA干扰组相对端粒长度(0.99±0.07)明显短于阴性对照组(1.64±0.05)及空白组(1.55±0.05)(F=113.68,P〈0.01),而阴性对照组与空白组间端粒长度差异无统计学意义;siRNA干扰组细胞凋亡率为(13.67±0.85)%,高于阴性对照组(8.59±0.38)%及空白组(8.18±0.21)%(F=92.32,P〈0.01);siRNA干扰组细胞株SF2 值(0.6074±0.0115)较空白组(0.8062±0.0056)降低显著(F=246.45,P〈0.01),放射增敏比为1.33。结论 在端粒酶阴性细胞U2OS中,特异性地沉默TPP1能够引起端粒长度的缩短,并且增加了细胞的放射敏感性,推测干扰TPP1引起端粒缩短很可能是其放射增敏的机制之一。
羌伟光
吴琴琴
杨垒
柳正春
江换钢
周福祥
谢丛华
周云峰
关键词:
RNA干扰
端粒
端粒长度
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