梁颖红
- 作品数：39 被引量：107H指数：6
- 供职机构：郑州大学第五附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 创伤后多器官功能障碍综合征患者外周血髓源抑制细胞细胞的表达
- 2015年
- 目的探讨创伤后多器官功能障碍综合征(MODS)患者外周血髓源抑制细胞(MDSCs)的表达在诊断MODS疾病严重程度和预后判断中的临床意义。方法分别采集66例MODS患者、78例非MODS患者和37例健康志愿者外周血,以CD14-CD11b+CD33+作为MDSCs的标志,采用流式细胞术检测MDSCs细胞的表达;以MODS评分评估疾病严重程度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并分析患者MDSCs的表达与疾病严重程度评分和IL-10和TNF-α水平的相关性。结果 MODS患者外周血CD14-CD11b+CD33+细胞表达为(11.84±2.18)%明显高于非MODS组的(6.52±0.37)%和健康对照组的(1.18±0.22)%(P<0.05);MODS患者死亡组(15.66±1.68)%较存活组(9.48±1.56)%明显升高(P<0.05)。MODS患者血清IL-10、TNF-α水平较非MODS组和健康对照组明显增高(P<0.05)。MODS患者中死亡组血清IL-10、TNF-α水平较存活组明显升高(P<0.05);相关分析显示,MODS患者外周血CD14-CD11b+CD33+细胞表达率与TNF-α水平和MODS评分成正相关(r分别为0.342 6、0.387 9,P<0.05)。结论外周血MDSCs水平变化可能与疾病的严重程度和预后相关。
- 刘佳魏明涂玲梁颖红龚艳杰张宜花
- 关键词：创伤后多器官功能障碍综合征全身炎症反应综合征
- 输血相关急性肺损伤对SD大鼠巨噬细胞活化和共刺激分子CD40表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察输血相关急性肺损伤（transfusion—related acute lung injury，TRALI）SD大鼠肺泡巨噬细胞活化及共刺激分子CD40表达，探讨其在TRALI发病机制中的作用。方法SD大鼠60只，随机（随机数字法）分为正常对照组、脂多糖对照组、TRALI组和阳性对照组各15只。正常对照组采用假手术处理；脂多糖对照组大鼠经腹腔注射脂多糖（2ms／kg，≤1min完毕），2h后静脉输注生理盐水（约1mL／只）；TRALI组腹腔注射脂多糖（2mg／kg）2h后静脉输注血浆（约1mL／只）；阳性对照组静脉输注脂多糖（5ms／kg）诱导急性肺损伤。光镜观察肺组织病理变化；应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定活化巨噬细胞（activatedmacrophage，AMφ）中TLR4表达；电泳迁移率变动分析（EMSA）检测AMφ核提取物中NF—KB的活性；Northernblot检测CIM0mRNA表达，流式细胞术检测CD40蛋白表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF一α、MIP-2及IL-1β的含量。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺泡隔断裂、肺间质充血及肺泡腔中性粒细胞浸润；活化AM表面TLR4的表达升高、NF．KB活性增强、共刺激分子CD40mRNA和蛋白显著表达，与正常对照组和脂多糖对照组比较差异具有统计学意义（均P〈0．01）。TRALI组BALF中TNF-α、MIP-2、IL-1β的表达水平均显著高于正常对照组和脂多糖对照组（P均〈0．05）。结论AMφ能上调其表面共刺激分子的表达，促进炎细胞因子的释放，增强获得性免疫反应介导的急性肺损伤，提示AM活化可能在TRALI的发生过程中发挥一定作用。
- 魏明涂玲刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐
- 关键词：急性肺损伤巨噬细胞TOLL样受体-4
- 乳腺癌CD4^+ CD25^(high) Foxp^(3+)调节性T细胞数量和分布及Foxp3mRNA表达与肿瘤分期的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 目的研究乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3mRNA的表达变化与国际抗癌联盟(UICC)乳腺癌的TNM分期的关系。方法用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析40名健康对照者及40例乳腺癌患者(临床TNM分期T1期9例、T2期10例、T3期12例、T4期9例)外周血、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量及分布情况。实时荧光定量PCR技术检测TregFoxp3mRNA表达水平。结果乳腺癌患者外周血CD4+CD25high Foxp3+Treg占CD4T细胞的百分比为(8.91±3.06)%,高于正常健康对照组(5.84±2.63)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者TIL、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(P均<0.01)。乳腺癌组织TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度(MFI)显著高于外周血(P<0.05)。T1、T2、T3、T4期乳腺癌患者Treg比例分别为(5.81±1.89)%、(6.52±2.15)%、(9.65±3.14)%、(11.86±2.43)%。乳腺癌患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.01)。相关分析显示,Treg数量与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.7 576,P<0.01);Foxp3基因mRNA表达水平与乳腺癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.6 129,P<0.05)。结论乳腺癌患者CD4+CD25high Foxp3+Treg的数量升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关。乳腺癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3mRNA的表达强度均有所不同,提示这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25high Foxp3+Treg将来可作为乳腺癌患者病情进展的重要判断指标之一。
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：肿瘤分期特异性转录因子
- 盐酸戊乙奎醚对大鼠肺缺血再灌注损伤核因子-κB和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化物表达的影响被引量：2
- 2015年
- 核因子（NF）-κB是一种转录调节因子,在细胞因子介导的炎性反应等中起重要作用[1].而抑制NF-κB活性,可降低炎性介质转录,减轻中性粒细胞聚集,对再灌注损伤组织产生保护作用[2].本实验旨在观察盐酸戊乙奎醚（PHC）对大鼠肺缺血再灌注损伤下NF-κB结合活性及细胞因子诱导的中性粒细胞趋化物（CINC）基因表达的影响.
- 涂玲刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐魏明
- 关键词：肺缺血再灌注损伤中性粒细胞聚集核因子-ΚB细胞因子诱导盐酸戊乙奎醚细胞趋化
- 输血相关急性肺损伤大鼠肺组织细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子的表达被引量：7
- 2016年
- 目的研究输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠肺组织细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1(CINC-1)mRNA表达水平的变化,探讨CINC-1在大鼠TRALI发病机制中的作用。方法将60只SD大鼠随机分为TRALI组、正常对照组、脂多糖(LPS)对照组和阳性对照组,每组15只大鼠。LPS对照组大鼠经腹腔注射LPS(2 mg/kg,1 min内完毕),2 h后静脉输注1 m L生理盐水;TRALI组大鼠经腹腔注射LPS(2 mg/kg)2 h后静脉输注1 m L储存28 d的同种异体血浆;正常对照组大鼠采用假手术处理;阳性对照组大鼠移除约等于大鼠10%血容量的血液(1 m L)后,经静脉输注LPS(5 mg/kg)诱导急性肺损伤。采用逆转录聚合酶链反应检测大鼠肺组织中CINC-1 mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附试验测定肺组织匀浆CINC-1蛋白含量;检测肺湿/干重比、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,观察肺组织病理学改变,比较支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和中性粒细胞百分比。结果与正常对照组和LPS对照组比较,TRALI组肺组织中CINC-1蛋白和CINC-1 mRNA表达明显增高[(18.98±2.21)ng/g和[(26.42±3.37)ng/g比(38.95±4.32)ng/g,F=11.28,P<0.05;(0.24±0.09)和(0.15±0.08)比(0.38±0.09),F=15.31,P<0.05]。TRALI组BALF中细胞总数和中性粒细胞百分比[(310.63±76.67)×106/L和(33.57±11.51)%]明显高于正常对照组[(101.36±63.83)×106/L和(9.87±3.56)%](F=13.82、5.41,P<0.05)。TRALI组肺组织含水量和MPO活性明显高于正常对照组(F=5.78、13.46,P<0.05)。阳性对照组各指标均显著高于TRALI组(P<0.05)。结论 TRALI大鼠肺组织中CINC-1的表达升高,肺组织中性粒细胞浸润增多,提示CINC-1参与了中性粒细胞与内皮细胞的粘附和聚集,推测CINC-1可能在TRALI的发病过程中起着重要作用。
- 梁颖红龚艳杰刘佳魏明涂玲张宜花杨璐
- 关键词：输血相关急性肺损伤SD大鼠
- 输血相关性急性肺损伤大鼠模型髓系细胞触发受体-1的表达
- 2014年
- 输血相关性急性肺损伤（TRALI）是输血过程中的常见严重并发症[1],其确切的发病机制尚不清楚.髓系细胞触发受体（TREM-1）是表达于中性粒细胞等髓系细胞表面的胞膜受体,可以触发并放大炎性反应,是炎性反应信号传导通路的重要介质,但其与TRALI的关系尚不明确.我们通过＂二次打击＂法建立TRALI大鼠模型,观察TREM-1在TRALI肺组织中的表达变化.
- 魏明刘佳涂玲梁颖红龚艳杰张宜花
- 关键词：髓系细胞触发受体-1输血相关性急性肺损伤大鼠模型TRALI信号传导通路TREM-1
- 特应性皮炎患者外周血T细胞磷酸肌醇3激酶信号转导通路的表达被引量：6
- 2015年
- 目的 探讨特应性皮炎（AD）患者外周血T细胞磷酸肌醇3激酶（PI3K）信号转导通路活化情况及其临床意义.方法 检测38例AD患者的T细胞PI3K通路活性,健康对照组38例.外周血T淋巴细胞分离采用Rosettsep T细胞提取试剂盒提取,PI3K活性采用免疫沉淀和酶联免疫吸附试验（ELISA）,Akt及其磷酸化蛋白采用免疫印迹法,T细胞增殖采用噻唑蓝（MTT）,白细胞介素（IL）6和IL-10水平采用ELISA检测.结果 新鲜分离的AD患者外周血T细胞PI3K和Akt活性均显著高于健康对照组（P＜0.05）.AD患者T细胞在体外培养24 h后PI3K和Akt活性与健康对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,健康对照组T细胞用AD患者血清孵育24 h后PI3K和Akt活性显著增高（P＜0.05）.PI3K特异性抑制剂LY294002显著抑制AD患者T细胞增殖[（123±25）％和（195±28）％,P＜0.05]及分泌IL-6和IL-10分别为[（431±64） ng/L和（823±128） ng/L,P＜ 0.05],[（120±21） ng/L和（213±35） ng/L,P＜0.05].新鲜分离的AD患者外周血T细胞PI3K和Akt活性与疾病严重程度指数（EASI）无相关.结论 AD患者外周血T细胞存在磷酸肌醇3激酶信号转导通路活化异常,并与T细胞增殖和细胞因子分泌有关,提示AD患者外周血中可能存在激活该通路的血清因子.
- 魏明涂玲梁颖红刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：信号传导
- 输血相关急性肺损伤对大鼠血浆和肺组织血管生成素-2表达的影响被引量：12
- 2016年
- 目的探讨输血相关急性肺损伤(TRALI)时血浆和肺组织中血管生成素-2(Ang-2)的表达及其意义。方法选择60只SD大鼠,按随机数字表法分为生理盐水(NS)对照组、脂多糖(LPS)对照组、TRALI模型组、急性肺损伤(ALI)对照组,每组15只。采用"LPS-血浆二次打击"法复制TRALI大鼠模型。NS对照组腹腔注射NS 2 mL,移除大鼠血液1 mL后输注等体积NS。LPS对照组大鼠腹腔注射2 mg/kg LPS(1 min内注完)1 mL 2 h后静脉输注等体积NS。TRALI模型组腹腔注射2 mg/kg LPS 1 mL,2 h后静脉输注血浆1 mL。ALI对照组静脉输注5 mg/kg LPS 1 mL诱导ALI。制模完成后处死大鼠取肺组织观察病理学改变并进行肺损伤评分;取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测细胞总数、中性粒细胞比例(NEUT);用蛋白质免疫印迹试验(Western Bolt)检测血浆中Ang-2蛋白表达;免疫组化法观察肺组织中Ang-2阳性表达;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肺组织中Ang-2 mRNA表达水平。结果光镜下可见,NS对照组大鼠肺组织结构清楚,肺泡壁结构完整,肺泡内未见炎性细胞渗出及肺泡萎陷,肺泡间隔均一无增宽;LPS对照组肺泡间隔轻度增宽、有少量炎性细胞浸润;TRALI模型组肺泡间隔增宽、中等量出血并有较多炎性细胞浸润;ALI对照组肺内大量炎性细胞浸润,间质水肿加重,伴出血、微血栓及灶性肺不张。ALI对照组、TRALI模型组血浆Ang-2蛋白和肺组织Ang-2 mRNA表达均显著高于NS对照组、LPS对照组[Ang-2蛋白(灰度值):0.58±0.09、0.43±0.07比0.12±0.03、0.20±0.05,Ang-2 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.39±0.10、0.29±0.09比0.10±0.05、0.16±0.04,P均<0.01];ALI对照组、TRALI模型组BALF细胞总数(×10~6/L:361±78、310±76比101±63、165±65)、NEUT(0.396±0.125、0.335±0.115比0.098±0.035、0.114±0.041)均明显高于NS对照组和LPS对照组(P均<0.05);ALI对照组、TRALI模型组病理学评分、肺湿重/体重比值和动脉血氧分压(PaO_2)均显著高�
- 龚艳杰魏明涂玲刘佳梁颖红张宜花杨璐
- 关键词：肺损伤输血相关血管生成素-2
- 输血相关急性肺损伤患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞变化的临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的检测输血相关急性肺损伤（TRALI）患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）的计数及其功能基因又头框蛋白3（Foxp3）mRNA的表达水平，以及探讨其与疾病预后的关系。方法收集2008年6月至2011年11月期间健康体检者（对照组，n=30）和重症监护病房收治的TRALI患者[TRALI组，n=26，TRALI组按预后又分为死亡组（n=5）和存活组（n=21）]外周抗凝血，采用流式细胞术分析各组T细胞亚群。采用四色流式细胞术以Foxp3-FITC／CD25-PE／CD4-PerCP／CD3-PC7抗体组合检测各组受试者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的计数，比较死亡组和存活组患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的水平。实时荧光定量PCR技术检测特异性转录因子Foxp3mRNA的表达水平，并分析患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的比例与Foxp3mRNA的表达水平的关系。结果TRALI患者与对照组健康人间CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞计数的差异无统计学意义，而CD3＋CD8＋T细胞则较对照组增加（P〈0．05），CD4＋／CD8＋比值降低（P〈0．05）。死亡组CD3＋CD8＋T细胞比例高于存活组（P〈0．05），C133＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞比例和CD4＋／CD8＋比值则低于存活组（均P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD2.5high Foxp3＋Treg计数为（8．86±3．14）％，明显高于健康对照组（5．67±2．43）％（P〈0．05）。TRALI死亡组患者外周血CD4＋CD2shighFoxp3＋Treg计数为（11．23±3．79）％，显著高于存活组患者（7．69±3．21）％（P〈0．05）。TRALI患者外周血Foxp3mRNA的表达水平为（3．77±2．73）×10^5拷贝/ug，显著高于对照组（0．43±0．21）×10^5拷贝／μg（P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg计数与Foxp3mRNA的表达水平呈正相关（r=0．5131，P〈0．05）。结论TRAM患者外周血CD4＋CD.5highFoxp3＋Treg和Foxp3mRNA的变化可能是导致TRALI疾病发展的关键因素之一，与�
- 魏明刘佳涂玲梁颖红龚艳杰张宜花
- 关键词：输血外周血
- 髓系细胞触发受体-1在输血相关性急性肺损伤大鼠肺组织的表达被引量：3
- 2015年
- 目的观察髓系细胞触发受体（TREM-1）在输血相关性急性肺损伤（TRALI）SpragueDawley（SD）大鼠肺组织中的表达及其在TRALI发病机理中的作用。方法sD大鼠55只，随机分为TRALI组（n=25）、正常对照组（n=10）和阳性对照组（n=20）。TRALI组腹腔注射脂多糖（LPS）2mg／kg2h后静脉输注人血浆（1ml／只）；正常对照组腹腔注射生理盐水2mg／kg，移除1mJ大鼠血液后及时输注等体积生理盐水；阳性对照组静脉输注LPS5mg／kg诱导急性肺损伤。3组分别于造模后6h留取外周血及肺组织，采用荧光实时定量反转录多聚酶链反应法（RT-PCR）检测大鼠外周血及肺组织TREM-1mRNA；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠外周血及肺组织TREM-1和肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度；HE染色进行大鼠肺组织Smith病理损伤评分。Spearman相关性分析TRALI组TREM-1mRNA、TNF-α和Smith病理损伤评分3者之间的相关性。结果TRALI组和阳性对照组大鼠肺组织TREM-1mRNA的表达（4．96±0．08、6．35±0．09）高于正常对照组（1．01±0．00）（均P〈0．05），血TREM-1mRNA的表达（9．85±3．23、12．33±3．56）也高于正常对照组（2．15±0．35）（均P〈0．05）。TRALI组大鼠肺组织和血TREM-1浓度[（695．25±116．87）、（703．80±100．67）ng／L]高于正常对照组[（234．51±44．38）、（240．22±46．63）ng／L]（均P〈0．05），但与阳性对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。TRALI组大鼠肺组织和血TNF-α浓度[（288．26±35．53）、（276．26±39．53）ng／L]显著高于正常对照组[（216．34±33．45）、（220．60±38．30）ng／L]（均P〈0．05），但与阳性对照组差异无统计学意义（均P〉0．05）。TRALI组Smith病理损伤评分（7．46±0．95）显著高于正常对照组（0．32±0．28）（P〈0．05），与阳性对照组（8．65±0．72）差异无统计学意义（P〉0．05）。TRALI组大鼠肺组织Smith
- 涂玲梁颖红魏明刘佳龚艳杰张宜花
- 关键词：急性肺损伤髓系细胞触发受体-1肿瘤坏死因子Α病理评分
