沈宇清 作品数:31 被引量:51 H指数:4 供职机构: 东南大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
肝癌细胞中HLA I类重链基因表达与启动子区域甲基化的相关性 被引量:2 2007年 目的:研究肝癌细胞株中DNA甲基化与HLAI类分子异常表达的相关性。方法:应用MSP技术对相关细胞系的HLA I类分子重链A、B、C位点启动子区域CpG岛的甲基化状态进行分析,Real-time PCR检测HLAI类分子重链mRNA水平的表达情况,Western blot检测RNA干扰后HLAI类分子重链表达情况。结果:在8株肝癌细胞系中HLA I类分子重链A、C位点启动子区域CpG岛存在甲基化;将启动子区域的DNA甲基化与相关基因表达数据相比较显示二者没有关联性;在RNA干扰DNA甲基化转移酶3a或3b的肝癌细胞系SMMC7721中,比较基因干扰前后HLA I类分子重链蛋白表达无显著变化。结论:在研究的肝癌细胞系中DNA甲基化没有参与调控肝癌中HLA I类分子的异常表达。 杨晋 张建琼 沈宇清 缪凤琴 夏梅 叶覃 许联红 谢维关键词:HLA DNA甲基化 甲基化特异性 朊病毒播散机制的研究进展 2011年 传染性海绵状脑病(Transmissible spongiform encephalopathies,TSE)是一类致死性中枢神经系统的慢性退化性疾病,它包括了疯牛病(Mad cowdisease,MCD)即牛海绵状脑病(Bovine spongiform encephalopathy,BSE)、羊瘙痒病(Scrapie)、 孙可 沈宇清关键词:朊病毒 传染性海绵状脑病 牛海绵状脑病 羊瘙痒病 小鼠中枢神经系统不同发育阶段MHC I类分子表达模式的初步研究 组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC),是脊椎动物某一染色体上(人为6 号,小鼠为17 号)编码主要组织相容性抗原,控制细胞间相互识别,调节免疫应答的一组紧密连锁的基... 刘建娥 史茜 吕丹 缪凤琴 沈宇清 刘俊华 赵春杰 张建琼关键词:MHC 突触可塑性 PML分子不同剪接体的分型及其应用 2009年 早幼粒细胞白血病(Promyelocytic Leukemia,PML)基因位于15号染色体,含有9个外显子,通过对内含子不同的剪接方式产生7大类20余种不同的PML剪接体.为对PML不同剪接体进行分型,针对PML各剪接体C末端设计5对型特异性引物,通过PCR扩增产物的有无及大小来判断PML分子的型别.利用设计的引物,通过对已知类型的PML质粒进行分型,确定了分型引物的可行性.对一株肝癌细胞系QGY7701中表达的PML分子进行分型,发现其为PML剪接体IV型与II型的混合型.研究表明,利用所设计5对引物的扩增,可以判断出某种组织或细胞中表达的PML分子剪接体型别. 沈宇清 夏梅 缪凤琴 谢维 张建琼关键词:PML基因 剪接体 PCR 人源抗CEA噬菌体抗体库的构建及筛选 2006年 目的构建人癌胚抗原(CEA)特异性噬菌体抗体库,制备人源抗CEA单克隆抗体(mAb)。方法用常规RT-PCR法,直接从10例结肠癌患者肠系膜淋巴结中的淋巴细胞克隆出免疫球蛋白Fd段和κ链基因,建成噬菌体抗体库。对抗体库进行5轮吸附-洗脱-扩增的亲和选择后,以ELISA法鉴定抗CEA噬菌体。结果RT-PCR可有效地扩增出Fd和κ基因并以此构建成容量为5.2×106的噬菌体抗体库。经5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集,并成功获得抗CEA噬菌体抗体阳性克隆。结论抗CEA噬菌体抗体库的构建和人源抗CEA mAb的制备,为CEA阳性表达肿瘤的靶向治疗奠定基础。 范健 赵刚 俞扬 沈宇清关键词:噬菌体抗体库 癌胚抗原 人源性单克隆抗体 HLA分子表达的转录调控及其意义 2003年 HLA分子是免疫应答过程中的重要分子 ,其表达受到多种因素的影响。调控HLA基因表达的主要环节在转录水平 ,转录起始点上游 2 5 0bp中顺式作用元件和反式作用因子的相互作用是影响HLA基因转录的重要因素。 沈宇清 张建琼 谢维关键词:HLA分子 基因表达 基因转录 基因调控 小鼠中枢神经系统不同发育阶段MHCⅠ类分子表达模式的初步研究 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC),是脊椎动物某一染色体上(人为6号,小鼠为17号)编码主要组织相容性抗原,控制细胞间相互识别,调节免疫应答的一组紧密连锁的基... 刘建娥 史茜 吕丹 缪凤琴 沈宇清 刘俊华 赵春杰 张建琼关键词:MHC 突触可塑性 文献传递 Notch通路下调表达参与调控子宫内膜异位症EMT的形成 目的 探讨以促进细胞迁徙转移为特点的上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)与子宫内膜异位症的相关性,以及参与调控EMT的相关信号通路Notch、TGF-β的表达变... 陈丽琴 丁波 沈宇清 任慕兰 于红人源性噬菌体抗体库的构建和抗CEA抗体的筛选及表达 被引量:1 2006年 目的构建人源性噬菌体抗体库,筛选和表达人源性抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体。方法从结肠癌患者肠系膜淋巴结中的淋巴细胞克隆出免疫球蛋白Fd段和κ链基因,建成噬菌体抗体库。用人CEA对抗体库进行筛选,将得到的阳性克隆进行表达及检测。结果抗体库库容为5.2×106,Fab基因重组率为30%。ELISA及Western blot分析检测,证实表达出人源抗CEA单克隆抗体。DNA序列测定,证实所获基因为人免疫球蛋白可变区基因。结论成功构建噬菌体抗体库,从中获得人源性抗CEA的单克隆抗体。 范健 赵刚 张建琼 俞扬 沈宇清 缪凤琴关键词:噬菌体抗体库 癌胚抗原 人源性单克隆抗体 乳腺癌脑转移细胞系靶向肽体的表达与特异性鉴定 被引量:2 2016年 目的:构建pFUSE-hIgG2-Fc2-BRBP1真核表达质粒表达BRBP1-Fc肽体,并验证其与乳腺癌脑转移细胞系(231-BR)的结合特异性。方法:合成带有EcoRⅠ、NcoⅠ酶切位点的脑转移性乳腺癌特异性肽BRBP1片段,利用该双酶切位点将其定向插入pFUSE-hIgG2-Fc2质粒,构建真核表达质粒pFUSE-hIgG2-Fc2-BRBP1。将测序正确的重组质粒转染至293T细胞真核表达BRBP1-Fc肽体,用蛋白质印迹实验验证蛋白表达,酶联免疫吸附试验、细胞免疫荧光等方法证实BRBP1-Fc肽体与231-BR细胞结合特异性。结果:成功构建重组质粒pFUSE-hIgG2-Fc2-BRBP1,蛋白质印迹法检测到BRBP1-Fc肽体的表达,分子质量约为37 k Da,并且证实BRBP1-Fc肽体与231-BR细胞特异性结合。结论:成功构建了真核表达重组质粒pFUSEhIgG2-Fc2-BRBP1,表达了BRBP1-Fc肽体,并鉴定了其与231-BR细胞的结合特异性。 杨姣姣 张莹 沈宇清 王洁 付波 张建琼关键词:真核表达 乳腺癌 脑转移