洪广峰
- 作品数:7 被引量:19H指数:3
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:理学更多>>
- 蛋白质高效分离两维色谱柱的选择优化被引量:3
- 2010年
- 为了构建高效的离子交换/反相二维液相色谱(IEC/RPLC)分离平台系统,提高复杂蛋白质样品的分离效率,对色谱柱进行了评价与筛选。通过对实际人肝蛋白质样品的分离效果的比较,选择确定了TSKgelDEAE-5PW弱阴离子交换色谱柱(WAX)作为第一维色谱分离柱;考察了同一规格的10支代表性反相色谱柱(250mm×4.6mm,5μm,30nm,C4、C8或C18),通过评价其对尿嘧啶、硝基苯、萘和芴的分离性能以及对3种标准蛋白质样品的非特异性吸附、对人肝蛋白质样品的WAX馏分的分离效果,最终确定以Jupiter300 C4反相色谱柱作为第二维色谱分离柱。对两维色谱柱的选择优化为蛋白质高效分离二维液相色谱平台的搭建提供了可靠基础。
- 洪广峰高明霞晏国全关霞陶芊张祥民
- 关键词:蛋白质组学蛋白质
- 高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统及分离方法
- 本发明属于蛋白质组学技术领域,具体为高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统,及运用该系统的分离方法。本发明仅需要一台多元液相泵、一个十通阀和两个六通阀用于进行连接和在线两维切换,提高了自动化程度和仪器的集成度。蛋...
- 张祥民高明霞洪广峰黄志
- 文献传递
- 一种原位聚合蛋白质快速酶解整体柱的制备方法及其应用
- 本发明属于分析化学和蛋白质组学领域,具体涉及一种原位聚合蛋白质毛细管快速酶解整体柱的制备方法,并将此整体柱用于酶解完整蛋白质样品,实现对蛋白质的快速酶解,并对酶解后的肽段直接进行基质辅助激光解析离子化质谱的分析和鉴定。此...
- 高明霞张祥民张鹏洪广峰
- 文献传递
- 用于人血浆中蛋白质分离的在线阵列式二维常规柱液相色谱系统的建立被引量:5
- 2014年
- 构建了一种在线阵列式二维常规柱液相色谱系统,并将其应用于分离血浆中的完整蛋白质。该系统以1根强阴离子交换柱作为第一维分离柱,8根阵列式反相色谱柱作为第二维分离柱。强阴离子交换柱分离的馏分通过十通阀被依次转移到第二维预柱上并得到保留富集,随后第二维流动相通过分流器同时将预柱上的蛋白质反冲至分析柱上进行分离。二维之间以及第二维阵列色谱柱之间均相互独立,从而可以提高系统分离的通量和总峰容量。采用该系统对血浆中的蛋白质进行了完整蛋白质水平上的分离。该系统具有高通量和高分辨率的特点,为血浆样品中高丰度蛋白质的去除以及血浆样品的深入研究提供了一种有效的手段。
- 黄志洪广峰高明霞张祥民
- 关键词:蛋白质血浆蛋白质组学
- 多维液相色谱 bottom-up top-down 阵列式 完整蛋白质 蛋白质分离被引量:12
- 2009年
- 蛋白质组学出现之后,多维高效液相色谱(multidimensional HPLC,MD-HPLC)系统以其快速、高效、自动化程度高以及容易与质谱等其他技术联用等优势而成为蛋白质组学相关分析技术中研究应用的热点。本文主要以本实验室在蛋白质组学研究中的技术进展为主线,介绍了多维高效液相色谱技术的发展,包括经典的“bottom-up”技术和“top-down”式的多维高效液相色谱技术路线,以及为了提高系统的分离通量而自行设计搭建的阵列式多维高效液相色谱平台,这些技术路线在蛋白质组学研究中有着极大的潜在应用价值。
- 高明霞关霞洪广峰张祥民
- 关键词:BOTTOM-UPTOP-DOWN阵列式蛋白质分离
- 一种原位聚合蛋白质快速酶解整体柱的制备方法及其应用
- 本发明属于分析化学和蛋白质组学领域,具体涉及一种原位聚合蛋白质毛细管快速酶解整体柱的制备方法,并将此整体柱用于酶解完整蛋白质样品,实现对蛋白质的快速酶解,并对酶解后的肽段直接进行基质辅助激光解析离子化质谱的分析和鉴定。此...
- 高明霞张祥民张鹏洪广峰
- 高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统及分离方法
- 本发明属于蛋白质组学技术领域,具体为高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统,及运用该系统的分离方法。本发明仅需要一台多元液相泵、一个十通阀和两个六通阀用于进行连接和在线两维切换,提高了自动化程度和仪器的集成度。蛋...
- 张祥民高明霞洪广峰黄志
- 文献传递