王国坤
- 作品数：63 被引量：133H指数：6
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 加热式载玻片干燥装置
- 本实用新型提供了一种加热式载玻片干燥装置，用于对多个装载了切片和树胶的载玻片进行加热干燥，其特征在于，包括：柜体；柜门，设置在柜体上；纵向隔板，纵向设置在柜体内从而将柜体等分为两个子柜体，该纵向隔板内设置有多个加热管放置...
- 陶婧陈思王国坤
- 文献传递
- 大鼠心肌梗塞后心室重构中miRNA的差异表达被引量：5
- 2014年
- 目的:筛选大鼠急性心梗后的心室重构过程中差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA),为miRNA调控心室重构的机制研究提供靶标。方法:20只成年雄性Wistar大鼠,分组如下:心肌梗死组(MI组,n=10)和假手术组(Sham组,n=10)。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支构建急性心梗模型建模。4周后对大鼠进行超声心动图检查和梗死边缘区心肌HE染色观察心室重构程度。利用miRNA芯片对心梗边缘区的miRNA进行差异表达检测,采用实时定量PCR验证芯片结果的可靠性。结果:心脏超声显示MI组大鼠左室重构明显,心梗边缘区心肌HE染色可见细胞间质大量胶原纤维沉积。miRNA芯片结果显示15个miRNA在心梗4周后呈差异表达,其中11个miRNA(miR-21、miR-23a、miR-125b、miR-132、miR-146b、miR-181b、miR-199a、miR-320、miR-324、miR-328和miR-499)表达上调,4个miRNA(miR-29、miR-30c、miR-133a和miR-208)表达下调。实时定量PCR验证结果与芯片结果一致。结论:这些差异表达的miRNA可能与心梗后心室重构相关,进一步深入研究特定miRNA的调控机制有望为基因治疗提供新靶点。
- 刘夙璇王国坤董斐斐丁雪燕赵仙先秦永文
- 关键词：心肌梗死心室重构微小RNA
- 肥厚预刺激对苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的保护作用被引量：1
- 2016年
- 目的:研究不同肥厚预刺激对苯肾上腺素(Phenylephrine,PE)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:胶原酶联合差速贴壁法分离培养原代SD乳鼠心肌细胞后分组:(1)对照组(常规培养48 h);(2)PE组(50μM PE刺激48 h);(3)不同预刺激+PE组:A,不同浓度的PE(10、20、50μM)预刺激(12 h干预,12 h常规培养);B,PE(50μM)预刺激不同时间(period-1,6 h干预,6 h常规培养;period-2,6 h干预,6 h常规培养,再次6 h干预,6 h常规培养;period-3,8 h干预,8 h常规培养;period-4,12 h干预,12 h常规培养)。预刺激后再用PE(50μM)刺激48 h。经细胞骨架蛋白(α-actining)免疫荧光染色,利用激光共聚焦显微镜观察细胞表型,Image J软件计算心肌细胞表面积,利用实时定量PCR检测肥厚相关标志物表达水平。结果:分离的心肌细胞纯度在90%以上。PE组较对照组心肌细胞明显肥大,细胞表面积增加2.3倍,心肌肥厚标记基因心钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)和β肌球蛋白重链(βmyosin heavy chain,βMHC)表达明显升高(P<0.05);而不同预刺激+PE组心肌细胞肥大表型明显缓解,其中PE(50μM)两次6 h预刺激最为显著(P<0.05)。结论:肥厚预刺激可以减轻PE诱导的心肌细胞肥大的程度,从而对心肌肥厚有保护作用。
- 杨帆邹良建赵志敏王杨张冠鑫刘夙璇王国坤
- 关键词：苯肾上腺素心肌细胞心肌肥厚
- 胶原酶消化法、组织块贴壁法培养的大鼠RASMCs生长、增殖及分化对比观察被引量：6
- 2017年
- 目的比较胶原酶消化法、组织块贴壁法培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(RASMCs)生长、增殖及分化的影响。方法选择6~8周龄雄性SD大鼠6只,取胸主动脉及主动脉弓部,保留中膜备用。分别采用胶原酶消化法、组织块贴壁法培养RASMCs。采用α-肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定RASMCs,并比较两种方法培养第0、24、36、48、60、72、84、96 h RASMCs生长情况。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期。采用实时定量PCR法检测细胞表型标志基因表达,包括收缩型标志基因α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转胶蛋白(TAGLN)、肌球蛋白重链11(MYH-11)、转录因子1(SP-1)及合成型标志基因骨桥蛋白(OPN)。结果胶原酶消化法、组织块贴壁法均成功分离出RASMCs,细胞纯度均在95%以上。培养36、48、60、72 h时,组织块贴壁法分离、培养的RASMCs计数多于胶原酶消化法(P均<0.05)。培养36、48、60、72 h时,胶原酶消化法分离、培养的RASMCs活力优于组织块贴壁法(P均<0.05)。两种方法分离、培养的RASMCs G_1、G_2、S期细胞所占比例比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。胶原酶消化法分离、培养的RASMCs中α-SMA、TAGLN、MYH-11 mRNA相对表达量均高于组织块贴壁法,OPN mRNA相对表达量低于组织块贴壁法(P均<0.05)。结论胶原酶消化法、组织块贴壁法均成功分离、培养出RASMCs。胶原酶消化法分离、培养的RASMCs生长、增殖较慢,但保持收缩表型;组织块贴壁法分离、培养的RASMCs生长、增殖较快,但有向合成表型转化的趋势。
- 赵志敏王国坤王杨杨帆龚德军徐志云
- 关键词：血管平滑肌细胞胸主动脉胶原酶消化法细胞生长细胞增殖细胞分化
- 热休克蛋白90对PDGF诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响
- 目的:确定热休克蛋白90(HSP90)对PDGF诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响,并探索其可能作用机制。方法:采用胶原酶消化法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,免疫荧光检测确定细胞纯度;根据HSP90序列分析,设计si...
- 王国坤李松华徐志云
- 留学生呼吸系统影像诊断学全英语教学体会与实践被引量：1
- 2016年
- 随着我国综合国力和医疗水平的不断提高,来华学习的医学留学生数量日渐增多,留学生教学日益成为各医学院校的一个重要教学任务。其中,医学影像学教学是我国留学生教学的重要组成部分,结合我院留学生呼吸系统影像诊断学全英语教学中的体会,从留学生教学特点、教材选择和内容制定、师资水平以及教学方法改革等方面探讨医学影像学留学生全英语教学的经验。
- 张金玲赵德利王国坤梁宏伟周海婷刘丽丽
- 关键词：留学生全英语教学
- 一种HSP90抑制剂在制备防治主动脉疾病药物中的用途
- 本发明涉及生物技术领域，具体是一种HSP90抑制剂的用途，用于制备预防或治疗主动脉夹层的药物或试剂。本发明还提供筛选预防或治疗主动脉疾病的潜在物质的方法，以及预防或治疗哺乳动物主动脉疾病的方法。本发明首次揭示了HSP90...
- 王国坤赵志敏李松华方敏徐志云
- 血浆miR-208a在急性心梗诊断早期标志物中的应用
- 本发明公开了血浆miR-208a在急性心梗诊断早期标志物中的新用途，miRNA本身仅有18～25个核苷酸，其成熟体稳定存在于细胞浆中，因此在急性心梗后miRNA早于结构蛋白类物质(如肌钙蛋白troponin)释放进入循环...
- 荆清秦永文王国坤朱嘉琦
- 文献传递
- 转录因子OCT4促进瓣膜间质细胞成骨分化及在钙化性主动脉瓣疾病中的作用
- 王国坤杨帆马也邹良建
- miR-494调节主动脉平滑肌细胞表型转化参与胸主动脉瘤发生发展的作用机制
- 王杨杨帆徐志云王国坤
