王娅杰 作品数:89 被引量:483 H指数:13 供职机构: 中国中医科学院中医药信息研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
戊己丸提取物不同配伍方对豚鼠离体结肠运动影响的实验研究 被引量:16 2007年 目的:观察戊己丸提取物优选方对不同状态豚鼠离体结肠的影响,同时比较2种配伍比例作用的异同点。方法:通过乙酰胆碱和肾上腺素分别诱导豚鼠离体结肠运动亢进和抑制状态,在反应体系中分别滴加戊己丸1号方、2号方,观察其对豚鼠不同状态离体肠管的影响,同时用B liss法计算其半数有效浓度(EC50)。结果:对于离体结肠运动亢进模型,戊己丸1号方、2号方均可抑制结肠运动亢进,在本试验观察的时间内有明显的时间依赖性和浓度依赖性,且1号方EC50在设计观察的各时间段内均低于2号方;对于抑制模型,1号方300 mg.L-1,在15 m in时有拮抗作用(P<0.05),2号方30 mg.L-1,在9,15 m in时与模型组相比有差别(P<0.05)。结论:戊己丸1号方、2号方可显著抑制乙酰胆碱所致的结肠运动亢进;1号方、2号方对肾上腺素所致结肠运动抑制还有一定的作用;随配伍比例的不同,二者在共同药效作用的基础上,呈现出不同的作用特点和优势。 王娅杰 董宇 朱晓新关键词:戊己丸 提取物 配伍 参莲提取物对ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化和凋亡的药效学研究及提取部位活性比较 被引量:5 2019年 目的:研究参莲(SL)提取物对氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,ox-LDL)诱导的腹腔巨噬细胞泡沫化和凋亡的药效及SL不同提取部位的活性比较。方法:从C57BL/6J雌性小鼠腹腔中收集腹腔巨噬细胞,体外培养72h后,分为7组,阴性对照组(NC),模型组(Model,ox-LDL,20mg·L^-1),丹参水溶性提取物组(DS,4.32mg·L^-1+20mg·L^-1ox-LDL),丹参脂溶性提取物组(DZ,2.5mg·L^-1+20mg·L^-1ox-LDL),穿心莲脂溶性提取物组(C,3.18mg·L^-1+20mg·L^-1ox-LDL),SL提取物组(10mg·L^-1+20mg·L^-1ox-LDL),内质网应激诱导剂衣霉素组(TM,1mg·L^-1),药物处理24h。油红O染色观察脂质积累的情况;钙离子荧光染色联合流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化;AnnexinV-FITC/PI染色观察细胞的凋亡情况;比色法检测Caspase-3的酶活性;Westernblot检测Caspase-12的表达。结果:与NC组相比,Model组和TM组腹腔巨噬细胞内脂质蓄积,凋亡率增加,Caspase-3的酶活性增加,钙离子浓度增加,Caspase-12的活化水平上调。与Model组相比,SL组和C组显著改善细胞内脂质积累的情况;SL组和DZ组显著降低细胞的凋亡率,降低Caspase-3的酶活性,有效降低细胞内钙离子的浓度,显著降低Caspase-12的活化水平。结论:综上所述,以巨噬细胞为靶点,SL提取物可能通过缓解ox-LDL诱导的内质网应激,抑制巨噬细胞源泡沫细胞的凋亡。 赵正 李琦 尹婕 孙立东 冉庆森 李玉洁 王娅杰 陈颖 杨庆 翁小刚 蔡维艳 朱晓新关键词:泡沫化 凋亡 参莲提取物通过调控Nrf2/Keap1信号通路减轻TNF-α诱导的ECV304损伤 被引量:6 2021年 探讨参莲提取物对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞(ECV304)损伤的干预作用及可能的作用机制。以TNF-α诱导ECV304细胞损伤模型,噻唑蓝(MTT)法检测细胞生存活力;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;生化法和酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量;通过Western blot法检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶1(HO-1)、半胱天冬酶3(caspase-3)、半胱天冬酶9(caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果显示,与对照组相比,50μg·L^(-1)的TNF-α能够导致ECV304细胞活力显著下降(P<0.01),引起ECV304细胞ROS产生增加,SOD活性降低,MDA、NO、ET-1、IL-1β含量显著增加(P<0.01),Keap1、caspase-9、Bax蛋白表达显著上调,NQO1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,参莲提取物可以提高ECV304细胞存活率,抑制细胞ROS产生,提高SOD活性,降低MDA、NO、ET-1、IL-1β含量(P<0.01或P<0.05),下调Keap1、caspase-3、caspase-9、Bax蛋白表达水平,提高Nrf2、NQO1、HO-1、Bcl-2蛋白表达(P<0.01或P<0.05)。提示参莲提取物可能通过调控Nrf2/Keap1信号通路降低TNF-α诱导的ECV304细胞氧化应激损伤,减少炎症反应和细胞凋亡。 王春淼 李玉洁 李晶晶 臧远龙 崔羲和 宋敏 杨庆 陈颖 李琦 蔡维艳 翁小刚 王娅杰 朱晓新关键词:血管内皮细胞 氧化应激 炎症反应 戊己丸不同配伍方治疗肠易激综合征的比较 被引量:4 2021年 目的:从神经-免疫-内分泌网络对优选的2种戊己丸配伍方干预肠易激综合征(IBS)的作用特点进行比较研究,为中医辨证论治提供一定的理论依据。方法:采用乳鼠结肠经皮冠状动脉腔内血管成形(PTCA)球囊刺激法建立IBS慢性高敏感动物模型,分为正常组、模型组、得舒特组、戊己丸1#和2#方高、中、低剂量组,其中1#方以0.67 g·kg^(-1)为中剂量,2#方以0.77 g·kg^(-1)为中剂量,加倍、减半分别为高、低剂量,得舒特给药剂量为0.01 g·kg^(-1)。采用腹部抬起及弓背抬高阈值评价戊己丸不同配伍方对IBS肠道敏感性的影响;采用改良后的甲苯胺蓝染色法检测对大鼠结肠组织肥大细胞(MC)密度的影响;分别采用酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫组化法检测大鼠血液/结肠组织中5-羟色胺(5-HT),P物质(SP),生长抑素(SS)及血管活性肠肽(VIP)的浓度/阳性表达。结果:各组大鼠体质量随时间差异无统计学意义;与正常组比较,模型组腹部抬起和弓背抬高阈值均显著降低(P<0.01),结肠组织中MC密度明显升高(P<0.05),血液以及结肠组织中的5-HT,SP,SS水平均明显增加(P<0.05,P<0.01),结肠组织中VIP表达明显提高(P<0.05)。与模型组比较,戊己丸不同配伍方均可显著提高腹部抬起和弓背抬高阈值(P<0.01),明显减少结肠组织MC数量(P<0.05)及5-HT,SP,SS和VIP的表达(P<0.05)。分析戊己丸不同配伍方作用得出,戊己丸1#方在降低血液中5-HT,SP及SS方面不同程度地强于2#方,其中尤以对5-HT的影响的差别最为显著(P<0.01);而2#方在降低结肠5-HT阳性表达上与1#方差别无明显统计学意义,在下调SP阳性表达上显著优于1#方;对于结肠SS阳性表达,其阳性表达的强度及范围显著小于1#方(P<0.05)。结论:戊己丸不同配伍方均能调整IBS的胃肠激素紊乱,降低肠道敏感性;在整体作用上,1#方不同程度地强于2#方,而在肠道局部作用上,2#方显示出一定优势,而且1#方更长� 王娅杰 崔羲和 陈颖 李玉洁 杨庆 翁小刚 董宇 蔡维艳 李琦 朱晓新关键词:戊己丸 配伍 脑肠肽 拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331对HepG2细胞体外生长的抑制作用 2012年 目的:研究拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331体外对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法:采用MTT法测定GL331对人肝癌HepG2细胞存活率的影响;克隆原形成法检测对细胞集落形成的影响;DAPI染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡百分率的变化;蛋白免疫印迹技术观察Bax,Bcl-2,Fas,FasL,Akt/p-Akt,caspase-3,clea-caspase等相关蛋白水平变化;caspase-3酶活性检测试剂盒检测对蛋白酶caspase-3活性的影响。结果:GL331可以浓度和时间依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,同时促进HepG2细胞凋亡,提高Bax/Bcl-2比率,增加FasL的表达,降低p-Akt的表达。结论:GL331对HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用,其作用机制与诱导HepG2细胞发生凋亡,调节凋亡相关蛋白的表达,并抑制存活通路相关蛋白的活化有关。 王娅杰 陈晓光 肖志艳 刘耕陶 孙华关键词:HEPG2细胞 凋亡 BCL-2 新型口服鬼臼毒素衍生物XWL-1-48抗肿瘤研究及GL331抑制HepG2细胞生长机制研究 恶性肿瘤是当前危害人类健康的重要疾病之一,药物化疗在肿瘤治疗中一直占有重要的地位,其中口服化疗给药方式灵活,同时可以提高病人的生活质量,是一种经济有效的给药方式,越来越受到临床医生的青睐。DNA拓扑异构酶/(Topois... 王娅杰关键词:鬼臼毒素 拓扑异构酶抑制剂 ATM P53 鬼臼毒素 ATM P53 CHK2 文献传递 六味地黄丸治疗糖尿病主效应药动学的体外研究方法 翁小刚 李玉洁 杨庆 陈颖 王娅杰 蔡维艳 李琦 朱晓新血管外膜肥大细胞激活介导的不稳定斑块模型建立及参莲片的干预 被引量:4 2016年 观察参莲片对apoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(As)不稳定斑块模型的干预作用及其机制。大鼠腹腔肥大细胞体外培养,以参莲片各剂量组(100、50、25和12.5 mg·L^(-1))和色甘酸钠(200μg·L^(-1))预处置2 h后加入P物质刺激诱导肥大细胞脱颗粒,检测上清中组胺、类胰蛋白酶、IL-1β和NF-κB含量。采用apoE^(-/-)小鼠颈总动脉套管法合并高脂饮食诱导As斑块形成,在套管部位血管外膜处滴加P物质建立外膜肥大细胞活化介导的不稳定斑块模型,分设颈动脉套管假手术组(M1)、颈动脉套管+高脂饮食组(M2)、M2+套管部位滴加P物质(0.5μg/只)组(M3)、参莲片组(95、190和380 mg·kg^(-1)·d^(-1))、阿托伐他汀组(2.6 mg·kg^(-1)·d^(-1))和正常对照组(C)。实验结束后,取血检测总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL-C)、高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(matrix metallo proteinases 9,MMP-9)和组胺(histamin)含量。取动脉组织通过苏木素-伊红(hematoxylin and eosin staining,HE)染色观察病理变化,甲苯胺蓝染色观察肥大细胞脱颗粒情况,免疫荧光法染色肥大细胞CD117抗原表达。采用Bio-Rad磷酸化检测试剂盒检测病变血管组织中8个炎症相关信号分子磷酸化。综合评价参莲片对不稳定斑块的保护作用。结果表明,参莲片可以稳定大鼠腹腔肥大细胞细胞膜,减少其活化释放组胺、类胰蛋白酶(均P<0.05)及IL-1β和NF-κB(P<0.05或P<0.01)。apoE^(-/-)小鼠M3模型组血管外膜处肥大细胞增殖和脱颗粒显著增多,释放出的活性物质显著升高,诱发病灶处外膜大量炎性细胞的浸润,内膜下及斑块内出血(红细胞沉积),中膜平滑肌变薄,同时血清斑块炎性活化相关指标hs-CRP、MMP-9等显著增高,提示As斑块呈不稳定状态;参莲片可减少肥大细胞增殖和脱颗粒,降低hs-CRP、MMP-9和组胺含量(P<0.05或P<0.01),减少病灶处 李玉洁 阮从潇 杨庆 翁小刚 陈颖 王娅杰 郭琰 周冰冰 刘思思 姜晓慧 朱晓新关键词:斑块 血管外膜 肥大细胞 P物质 免疫共刺激分子与自身免疫性疾病的研究进展 被引量:2 2020年 正常机体的免疫系统具有区别"自己"和"非己"的能力,对非己抗原能够发生免疫应答,对自身抗原则是处于无应答或微弱应答状态,时刻处于"免疫激活-免疫耐受"的动态平衡状态。然而,如果正常的免疫耐受被打破,将"自己"识别成"非己",处于非正常免疫激活状态的T细胞就会持续迁延的对自身抗原产生异常的免疫应答,结果会导致自身免疫性疾病(ADS)的发生。因此,"无效"的免疫识别和免疫应答成为自身免疫性疾病的发病的主要致病机制。免疫共刺激分子(co-stimulatory molecule)作为连接抗原递呈细胞(APC)和免疫细胞(T细胞,B细胞)的重要纽带,有研究已经证实,正性免疫共刺激分子的高表达和负性免疫共刺激分子的低表达都会导致自身免疫耐受的缺陷,进而引发自身免疫性疾病。依据中医药"纠偏","扶正"的治疗特色。本文通过对4种典型性的自身免疫性疾病:系统性则是以红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA)为代表;器官特异性则是以多发性硬化症(MS)和Ⅰ型糖尿病(T1DM)发病机制进行探讨,依赖于这4种疾病发病过程中免疫共刺激分子对免疫识别与免疫应答的重要影响,并且依托于中医药对自身免疫平衡调节的作用,结合近十年来的相关文献,对免疫共刺激分子与自身免疫性疾病之间的关系进行论述,探寻不同的免疫共刺激分子在不同的自身免疫病中的共性,并初探中药以PD1-PDL1为药物靶点治疗自身免疫病的可行性。 冉庆森 李琦 刘丽 孙立东 杨庆 李玉洁 陈颖 王娅杰 翁小刚 蔡维艳 朱晓新关键词:免疫平衡 自身免疫病 脉络宁注射液与激素对脊神经根炎所致脊髓损伤保护作用的比较 被引量:8 2014年 目的:比较脉络宁注射液和激素治疗对脊神经根炎大鼠所致脊髓损伤的保护作用,为脉络宁注射液在临床上代替激素治疗腰腿疼痛提供相关依据。方法:雄性Wistar大鼠30只,随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、脉络宁组、康宁克通(激素)组。造模成功后脉络宁组按120 g·kg-1剂量硬膜外腔注射给予脉络宁注射液,康宁克通组按240 mg·kg-1剂量硬膜外腔注射给予康宁克通注射液,其他组分别予等量生理盐水,6 mL·kg-1,4 d/次,共4次。采用滤纸片法制备大鼠脊神经根炎模型,放射免疫法检测血液中血栓素B2(TXB2)、白细胞介素8(IL-8)的含量,Nissl氏染色观察各组脊髓中神经细胞变化,免疫组化法观察各组神经元Bcl-2与Bax的表达。结果:模型组脊髓中神经细胞变性坏死增多,血液中TXB2,IL-8含量显著增高(P<0.01),Bax阳性细胞的平均吸光度(A)明显上调,与正常组比较具有显著差异性(P<0.05);与模型组比较,脉络宁组和康宁克通(激素)组神经细胞变性坏死减少,血液中TXB2,IL-8含量降低(P<0.01),Bax表达显著下调(P<0.01),Bcl-2表达明显上调(P<0.01),Bax/Bcl-2降低(P<0.01)。结论:硬膜外腔注射脉络宁注射液可以改善脊神经根炎大鼠炎性反应,通过调节炎症反应而抑制大鼠脊髓神经炎所致的脊髓神经细胞的凋亡,与康宁克通组无显著差别,这可能是其临床治疗腰腿痛并可以替代激素治疗的依据之一。 高元朝 赵志斌 支满霞 李莉 王娅杰关键词:脉络宁 神经根炎 脊髓