王玉风
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- VN对高糖培养下HUVEC作用的初步探讨
- 目的:
1.观察高糖培养的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)中玻连蛋白(vitronectin,VN)表达水平的改变,细胞微丝骨架结构的变化,以及细...
- 王玉风
- 关键词：高糖培养细胞骨架
- 高糖诱导人脐静脉内皮细胞中玻连蛋白的表达和细胞骨架重塑
- 2012年
- 目的观察高糖培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中玻连蛋白(vitronectin,VN)表达的变化、细胞微丝骨架的改变以及细胞迁移能力、成管能力的变化。方法建立高糖培养的HUVEC体外模型,并常规培养HUVEC作为正常对照,Western blot方法检测VN蛋白的表达,免疫荧光细胞化学法观察HUVEC中微丝骨架F-actin的变化,划痕法检测HUVEC迁移能力的改变,Matrigel法检测HUVEC的成管能力。结果培养24h时,正常组和高糖组中VN蛋白表达量分别为0.893±0.119、1.295±0.080,48h时分别为0.874±0.115、1.724±0.098,差异均有统计学意义(t=-4.857、-9.710,均为P<0.05)。免疫荧光细胞化学结果显示培养24h、48h时高糖组中都伴有更加明显的细胞微丝骨架结构改变。划痕法检测培养24h时正常组和高糖组中迁移到划痕内的细胞数分别为(198.000±15.880)个、(242.000±11.130)个,48h时分别为(293.000±8.681)个、(334.000±10.863)个,差异均有统计学意义(t=-5.495、-7.193,均为P<0.05)。Matrigel法发现培养6h时高糖组中形成的闭合管腔数目(120.000±9.813)个多于正常组(91.000±9.867)个,12h时形成的闭合管腔数目(19.000±3.209)个也多于正常组(8.000±3.011)个,差异均有统计学意义(t=-5.163、-5.659,均为P<0.05)。结论 VN可能在糖尿病视网膜病变中起一定作用,且VN功能的发挥可能涉及到细胞骨架重塑,但需要进一步干扰VN的表达以证实其作用。
- 王玉风杨侠董晓光
- 关键词：高糖人脐静脉内皮细胞细胞骨架细胞迁移
- 玻连蛋白对高糖培养的人脐静脉内皮细胞的作用被引量：1
- 2013年
- 背景玻连蛋白是一种多功能糖蛋白。本研究组前期的动物实验表明，玻连蛋白在缺氧小鼠视网膜中表达明显增高，体外细胞实验表明高糖可以诱导人脐静脉内皮细胞人（UVECs）中玻连蛋白表达的增加。但目前尚未证实玻连蛋白在视网膜新生血管病变中的作用机制。目的观察玻连蛋白对高糖培养下人UVECs的细胞骨架结构、细胞迁移、细胞成管能力的影响。方法建立高糖培养的人UVECs体外模型，利用干扰RNA技术干扰玻连蛋白的表达。实验分为高糖组（含50mmol／L葡萄糖的DMEM培养液培养人UVECs）、阴性干扰组（对照用siRNA预干扰人UVECs后，再用含50mmol／L葡萄糖的DMEM培养液培养）和阳性干扰组（玻连蛋白siRNA预干扰人UVECs后，再用含50mmol／L葡萄糖的DMEM培养液培养），在各组中分别利用Westernblot法检测玻连蛋白的表达量，免疫荧光细胞化学染色结合荧光显微镜观察人UVECs微丝骨架，划痕法观察人UVECs的迁移情况，Matrigel法检测人UVECs的成管能力。各组的总体差异比较采用单因素方差分析，组间的多重比较采用LSD—t检验。结果Westernblot结果显示，0h时3个组间玻连蛋白表达量的差异无统计学意义（F=1．064，P〉0．05）；培养24h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白的表达量依次降低，差异有统计学意义（F=15．519，P〈0．05）；培养48h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白表达量也依次降低，3个组间的差异亦有统计学意义（F=37．521，P〈0．05）。免疫荧光结果显示，24h时高糖组中的细胞微丝骨架结构最明显，阴性干扰组次之，阳性干扰组最不明显；培养48h细胞微丝骨架分布亦然。划痕实验表明，培养24h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中迁移人划痕区的细胞数量依次减少，3个组间的差异有统计学意义（F=90．685，P〈0．05）；培养48h
- 王玉风杨侠董晓光
- 关键词：高糖细胞骨架细胞迁移人脐静脉内皮细胞
- 玻连蛋白对高糖培养下人脐静脉内皮细胞作用的初步探讨
- 王玉风杨侠董晓光
