王芊艺 作品数:7 被引量:4 H指数:1 供职机构: 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
JAK1对平面细胞极性通路的调控及机制的研究 胚胎发育过程中,重要生物学过程的调节异常将导致许多疾病的发生。平面细胞极性(Planar cell polarity, PCP)的建立是胚胎发育过程中的一个关键环节。具体表现为细胞定向迁移,哺乳动物末端肢节的定向伸长,体... 王芊艺关键词:胚胎发育 文献传递 利用Oris技术观察多种因素对人乳腺癌细胞迁移的影响 被引量:2 2011年 为分析细胞生长的表面材质和细胞因子等不同刺激因素对人乳腺癌细胞二维迁移的影响,保证实验的可重复性,使用新型的Oris细胞迁移分析技术分析了Ⅰ型胶原、Matrigd和TNF-α等因素作用下运用动特征的变化,实验结果表明Ⅰ型胶原能够促进MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的迁移,而Matrigel对细胞迁移无明显影响。同时实验证明TNF-α对MDA-MB-231细胞的迁移有明显的促进作用。上述研究结果表明表面材质和细胞因子等刺激因素均能够影响乳腺癌细胞的迁移特性。实验同时表明Oris技术稳定可靠操作简便,具有良好的应用前景。 甄诚 陈亮 穆蕊 巩伟丽 柏兆方 王芊艺 满江红关键词:细胞迁移 TNF-Α 基于GST-pull down的小G蛋白Rac1活性检测体系的建立 被引量:1 2011年 目的:根据人PAK1基因的p21结合结构域(PBD)能够特异结合GTP-Rac1的特性,构建GST-PBD原核表达质粒,并利用GST-pull down方法检测真核细胞内小G蛋白Rac1的活性。方法:将人PAK1基因的PBD结构域克隆到pGEX原核表达载体上,经诱导纯化得到GST-PBD融合蛋白,并通过GST-pull down实验评估该方法的特异性和准确性。结果:pGEX-PBD质粒构建成功;纯化得到的GST-PBD融合蛋白能够特异性地与激活形式的Rac1(GTP-Rac1)结合,并且能够准确反映血小板衍生生长因子刺激下细胞内Rac1的激活过程。结论:GST-PBD融合蛋白及其整套GST-pull down检测体系能方便有效地检测细胞内Rac1的活性。 甄诚 陈亮 柏兆方 王芊艺 满江红关键词:RAC1 小G蛋白 Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2转基因小鼠的制备 2011年 建立Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠模型,构建转基因表达载体,经细胞诱导表达验证后,酶切得到含有CUEDC2的线性DNA片段,并采用显微注射的方法及后续筛选鉴定,得到CUEDC2转基因小鼠。进而通过与乳腺特异表达的MMTV-rtTA转基因小鼠交配,得到CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠。利用2 mg/mL的多西环素(Doxycycline)诱导小鼠体内CUEDC2表达。通过Western Blot、免疫组化检测表达。结果表明经诱导CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠的2个Founder的F1、F2代在转录水平和蛋白水平均成功表达CUEDC2,并具有乳腺特异性。表明Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠制备成功。为后续CUEDC2的功能研究奠定了技术基础。 王芊艺 柏兆方 梁冰 王玉博 周涛关键词:CUEDC2 转基因小鼠 可诱导型乳腺特异表达CUEDC2转基因小鼠模型的构建 CUEDC2(CUE domain containing protein 2)是含有CUE结构域的蛋白质。CUE结构域是一个大约含有40个氨基酸的保守序列,能识别细胞内的单泛素和多泛素。在本实验室的前期工作中,发现CUE... 王芊艺关键词:CUEDC2 转基因小鼠 文献传递 Tet-off诱导表达CUEDC2稳定细胞系的建立 2011年 CUEDC2(CUE domain containging protein 2)是近年来发现的一个功能尚未十分明确的蛋白质。实验室前期的研究表明,CUEDC2通过影响孕激素受体PR抑制乳腺癌细胞生长。此外,研究还发现CUEDC2通过招募PP1磷酸酶,促进IKK复合体的去磷酸化,抑制NF-kB信号通路的激活。为了深入研究CUEDC2的功能,构建了CUED2可诱导表达载体(p617-neo-T-CUEDC2-I-tTA4),并通过逆转录病毒系统获得tet-off可诱导表达CUEDC2的稳定细胞系。该诱导表达细胞株的建立为CUEDC2功能基因的研究提供了必要的手段。 徐金敬 王玉博 王芊艺 周杰 梁冰 穆蕊 于鸣 巩伟丽 张维娜关键词:CUEDC2 稳定细胞系 CUEDC2突变体的构建及在原核和昆虫表达系统中的表达 被引量:1 2011年 为构建CUEDC2的突变体并在原核和昆虫表达系统中表达验证,根据人cuedc2序列设计引物,以其突变体质粒为模板PCR扩增目的片段,酶切后连接至pET28a原核表达载体以及pFastBac1-Flag-N和pFastBac-HTA昆虫表达系统的表达载体。转化至DH5α后提取质粒,经菌液PCR、测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)及DH10Bac感受态细胞中。原核表达载体在E.coli中表达后用Ni-NTA亲和纯化,SDS-PAGE检测。昆虫表达载体提取杆粒,转染至昆虫细胞Sf9中表达。最后用western进行鉴定。结果成功构建了CUEDC2的突变体,并在原核和昆虫表达系统中表达。说明在原核和昆虫表达系统中,成功表达的CUEDC2突变体蛋白为CUEDC2的结构和功能研究奠定了基础。 王玉博 高彦飞 李腾 常艳 穆蕊 徐金敬 王芊艺 巩伟丽 于鸣 李慧艳关键词:CUEDC2 昆虫 突变体