王苹
- 作品数:123 被引量:383H指数:9
- 供职机构:吉林大学第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学政治法律文化科学更多>>
- caspase-3激活在庆大霉素所致耳蜗螺旋神经元延迟性死亡过程中的作用被引量:3
- 2007年
- 目的观察毛细胞丢失后耳蜗神经元延迟性死亡模式以及caspase-3的活动。方法采用3mol的庆大霉素作用离体培养的耳蜗24h,损毁全部毛细胞,分别在毛细胞丢失后1、3、5、7和14d收获样本。采用Neurofilament 200KDa标记耳蜗神经元,TRITC-labeled phalloidin标记毛细胞,免疫荧光染色观察神经元和毛细胞的存活数量,采用WesternBlot的方法检测caspase-3特异降解产物α-spectrin,间接确定caspase-3活动。结果3mol庆大霉素作用于培养的耳蜗24h,耳蜗毛细胞几乎全部消失。螺旋神经元和神经纤维的数目随培养时间的延长而减少,神经元存活从第1天的87%降至第14天的5%。神经元变小且形状不规则,在神经纤维上出现实质小体。检测caspse-3激活的特异降解带-120KDa的灰度值,发现在毛细胞丢失后24h,caspase-3活性明显高于毛细胞丢失的初时(P<0.01)。结论毛细胞丢失引起螺旋神经元死亡具有时间依赖效应,神经元出现凋亡的形态学特征,并且有caspase-3的活动。
- 王苹杜波丁大连杜宝东Salvi RJ
- 关键词:耳蜗螺旋神经元CASPASE-3
- 人胰岛素基因在幼仓鼠肾细胞中的表达及其降血糖效应(英文)被引量:3
- 2006年
- 背景:随着分子生物学和分子遗传学技术的发展和应用,人们利用基因工程方法进行人胰岛素的生产研究,并从分子水平再造分泌胰岛素的克隆细胞系来替代胰岛素注射和胰岛移植治疗糖尿病。目的:构建并筛选人胰岛素基因真核高效表达载体。设计:随机对照实验研究。单位:中国医科大学实验动物部。材料:实验选取健康成年清洁级昆明小鼠40只,雌雄各半,自由饮水,自由采食人工颗粒料,每日光照14h,实验动物由长春解放军军需大学实验动物中心提供。大肠肝菌DH5α和幼仓鼠细胞系由实验动物中心保存。方法:常规法构建重组质粒pEF1α-ImINS。将重组质粒pEF1α-ImINS和胰岛素其他3个重组质粒分别转染幼仓鼠肾细胞,经G418筛选,阳性克隆传至20代,分别用放射免疫和免疫组织化学技术方法分析胰岛素和/或胰岛素原在幼仓鼠肾细胞中表达的情况。并用重组质粒pEF1α-ImINS转染幼仓鼠肾细胞的阳性克隆20代的PBS细胞悬浮液(5×107细胞/只)及其培养上清(0.5mL/只)对昆明小鼠行腹腔注射,通过对注射前后小鼠血糖值测定,分析转基因产物降血糖的生物学效应。主要观察指标:胰岛素基因在幼仓鼠肾细胞中整合和表达的结果,以及注射前后血糖的变化。结果:胰岛素的表达量最高为7.984mIU/L,胰岛素表达水平的灰度值在幼仓鼠肾细胞质中为177.50±15.10,细胞核中为150.30±21.43;昆明小鼠注射pEF1α-ImINS转染幼仓鼠肾克隆细胞株的悬浮液后6h血糖值明显下降,与注射前24h比较,差异有极显著性意义(P<0.01)。结论:幼仓鼠肾细胞中重组质粒pEF1α-ImINS是胰岛素表达量最高的质粒;pEF1α-ImINS转染的克隆细胞株在小鼠体内有胰岛素表达,并且对正常小鼠有降血糖的作用。
- 李华王苹刘维全王吉贵
- 关键词:胰岛素基因仓鼠血糖
- 二甲胺四环素激活beclin 1诱导喉癌细胞自噬性死亡的研究
- 目的文献证实二甲胺四环素(minocycline)具有抑制基质金属蛋白酶的活性,MMPs在胚胎发生、伤口愈合、类风湿性关节炎、肿瘤的侵袭和转移中起重要作用;还可以抑制肿瘤血管生成。是否二甲胺四环素能够直接杀伤肿瘤目前还不...
- 杜波张岩付涛王苹
- 基因检测在遗传性耳聋中的应用被引量:2
- 2008年
- 耳聋,又名听觉障碍或听力丧失,其中遗传性耳聋是临床上常见的遗传病之一。在新生儿中患有先天性重度耳聋者约占0.05%--0.1%,其中超过50%是由遗传因素导致。在所有被认为与遗传因素相关的先天性耳聋病例中,有约70%属于非综合征性耳聋,无其他临床异常症状与耳聋关联。另外在大量的迟发性听力下降患者中,亦有许多患者由自身的基因缺陷致病,或由于基因缺陷和多态性造成对致聋环境因素易感性增加而致病。遗传性耳聋不仅会影响到耳聋患者本身,而且还可以遗传给后代,其致病的根源是聋儿的父母亲将有缺陷的基因传递给了下一代。
- 王苹吴晓盼贾志蓉吴镝韩家峰高华方
- 关键词:遗传性耳聋基因检测非综合征性耳聋先天性耳聋听力丧失听觉障碍
- 细胞共培养体系在观察骨髓间充质干细胞对损伤脊髓神经元生长存活影响中的应用被引量:2
- 2011年
- 目的:建立细胞共培养体系,观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对正常及损伤的脊髓神经元的影响。方法:选取新生7d的大鼠,无菌条件下分离骨髓间充质干细胞。选取新生24h的大鼠,无菌条件下分离脊髓背根神经节神经元,并制备机械损伤的模型细胞。用Transwell可渗透培养皿构建共培养体系,通过细胞形态学,免疫细胞化学方法进行细胞纯度鉴定,观察不同条件作用下神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞的存活。结果:共培养组神经元细胞NSE阳性率较相应对照组高。在BMSCs与神经元共培养到第6天,计数神经元的存活率,单纯神经元细胞培养组仅有40%的神经元存活,而共培养组神经元的存活率达到65%。单纯损伤神经元细胞培养组仅有26%的神经元存活,共培养组神经元的存活达到51%,细胞凋亡的数量较对照组明显低。结论:BMSCs可促进正常的脊髓神经元存活,对损伤的脊髓神经元有保护作用,并能诱导神经前体细胞分化为脊髓神经元。
- 刘然范东艳金鹏范洪学王苹
- 关键词:骨髓间充质干细胞脊髓损伤神经元
- 低剂量CoCl_2预处理降低耳蜗毛细胞和螺旋神经元的顺铂毒性
- 2017年
- 目的研究低剂量氯化钴预处理对顺铂导致的耳蜗毛细胞和螺旋神经节损伤的保护作用。方法体外培养小鼠耳蜗基底膜,随机分为4组:正常组、100μM氯化钴处理组、200μM顺铂处理组、100μM氯化钴预处理加200μM顺铂干预组,通过免疫荧光染色观察细胞状态并计数,通过蛋白质印记法检测各组Caspase 3、HIF-1α、NF-kB表达量。结果氯化钴处理组与正常组之间无明显差异,顺铂处理组较正常组毛细胞和螺旋神经元损伤严重,氯化钴预处理加顺铂作用组毛细胞和螺旋神经元存活数目分别是顺铂处理组的2.81、1.40倍。氯化钴预处理组和顺铂组Caspase 3表达量分别比正常组高2.50、3.91倍。
- 李浩楠王东霞王泺璎范东艳王苹于姝媛
- 关键词:氯化钴顺铂耳毒性毛细胞螺旋神经节
- 缝隙连接蛋白connexin26与遗传性非综合征性耳聋被引量:1
- 1999年
- 内耳结构和功能异常是遗传性非综合征性耳聋的病理学基础。近年来的研究证明,大约有100多个基因参与听觉功能,目前已发现33个耳聋基因定位于常染色体,6个基因定位于X染色体。其中编码缝隙连接蛋白β的connexin26基因与非综合征性感音神经性耳聋DFNA3/DFNB1关系密切,80%的DFNB1患者携带突变的connexin26基因。有关connexin26基因突变及其产生异常缝隙连接蛋白在听觉功能中的作用尚不清楚,本文综合目前对connexin26基因的突变及缝隙连接蛋白在遗传性耳聋发病机制中的研究资料做一简要论述。
- 王苹
- 关键词:耳聋遗传性缝隙连接蛋白CONNEXIN26
- 腺病毒介导的神经营养因子和Calpastatin对大鼠耳蜗神经元退化的保护作用
- 耳蜗是开展基因治疗的理想器官。病毒载体介导的基因治疗可以将外源基因带入靶部位,并且在耳蜗内长期稳定表达。因此,耳蜗转基因技术是治疗耳聋的新途径。耳蜗各种类型细胞对腺病毒的易感性目前尚未见报道。SGNs延迟性死亡可能与细胞...
- 王苹
- 关键词:重组腺病毒神经营养因子耳蜗螺旋神经元
- 文献传递
- 基于医学生创新训练构建创新教育质量监控体系被引量:6
- 2019年
- "大学生创新训练计划"是国家"本科教学工程"的重要组成部分,也是开展"卓越计划"下大学生创新教育的主要内容之一。导师制下"大学生创新训练"项目的全面实施,有助于推进以教师为主导,学生为主体的创新教学模式改革,培养高素质的创新人才。以指导国家级医学生创新训练项目为契机,探索以教师科研项目为依托、以学生自主设计完成实验为基础、以阶段性检查为监督机制、采用过程与结果相结合方式进行总体效果评价。学生通过选题、设计、实施及结果分析的实践过程,培养医学生创新意识和实践能力,激发他们对科研的兴趣。
- 王秋静王苹陈霞
- 关键词:医学生
- 噪声所致耳蜗毛细胞表达NF-κB中维生素E的调节被引量:2
- 2009年
- 目的探讨维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用及机制。方法健康雄性纯种Wistar大鼠9只,鼠龄2~3个月,体质量180~200g,由长春市高新开发区实验动物中心提供(清洁级)。无噪声暴露及耳毒性药物使用史,耳廓反射正常,实验前清洁外耳道,显微镜下检查均无中耳炎。以听阈、耳蜗基底膜铺片及免疫荧光染色为指标,观察大白鼠在稳态噪声持续暴露之前30d至暴露后7d,灌维生素E及生理盐水,对大白鼠听觉脑干电位分析和耳蜗外毛细胞(OHC)丢失率分析及NF-κB在耳蜗毛细胞中表达定量分析。结果维生素E在噪声暴露后大白鼠听力阈值明显低于单纯噪声组,OHC丢失率也明显降低,免疫荧光染色结果显示VE干预组的耳蜗细胞表达NF-κB的强度低于单纯噪声组(P<0.05)。结论维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用,通过上调耳蜗毛细胞中NF-κB的表达。
- 鞠善德王苹杜宝东
- 关键词:噪声耳蜗毛细胞维生素ENF-ΚB