罗慧珍
- 作品数：6 被引量：32H指数：3
- 供职机构：山西大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项国家自然科学基金山西省农业科学院博士研究基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- γ射线辐射花粉对苹果受精及胚发育的影响被引量：2
- 2014年
- 辐射花粉法是诱导苹果孤雌生殖的重要手段,了解辐射后胚发育过程对提高单倍体诱导率很有必要。本研究利用500 Gyγ射线照射‘珊夏’苹果花粉后,分别授于‘富士’、‘王林’柱头,观察其受精及胚发育过程,同时以正常花粉授粉为对照。结果表明:500 Gyγ射线照射后降低了‘富士’、‘王林’的结果率,影响果实大小,且不能产生正常、饱满的种子。显微观察结果表明:γ射线照射后花粉能够萌发,花粉管能够正常伸长进入子房,可以形成胚细胞并能进行初期发育,但在20 d时停止发育,40 d时完全解体消失。因此,对γ射线处理后的‘富士’、‘王林’进行幼胚培养的最佳时期应是授粉后20 d左右。研究结果为‘富士’、‘王林’孤雌生殖体系的建立提供了依据。
- 任莹张春芬小森贞男邓舒肖蓉罗慧珍孟玉平曹秋芬
- 关键词：Γ射线苹果花粉受精胚发育
- 枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因Zj2-CP的生物信息学分析及表达载体的构建被引量：2
- 2015年
- 本研究使用生物信息学相关软件对本课题组前期获得的枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因Zj2-CP(Gen Bank登录号:AB812086)的c DNA序列进行了分析。结果表明:该序列是一个全长为834 bp的开放阅读框,可编码277个氨基酸,分子质量为30.65 k D,理论等电点8.95,无信号肽和跨膜区,不属于分泌蛋白,有亲水性;二级结构以无规则卷曲为主,三级结构成弯曲螺旋状。氨基酸序列相似性分析表明,Zj2-CP基因编码的氨基酸序列与豇豆、玉米氨基酸序列的同源性最高,达到90%。以Zj2-CP基因的c DNA序列为模板进行PCR扩增,用内切酶消化后与载体PEZR(K)-LNY连接并转入大肠杆菌感受态细胞DH5α中,经酶切及测序证明,植物表达载体构建成功。研究结果可为深入探讨枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因的功能及枣树抗逆机制提供基础。
- 罗慧珍邓舒肖蓉张春芬任莹郭慧娜孟玉平曹秋芬
- 关键词：枣树生物信息学分析植物表达载体
- 低温诱导下苹果花药差异表达基因分析被引量：7
- 2016年
- 低温处理是苹果花药培养诱导胚状体形成的关键步骤,花药中的小孢子在经过一定时间的低温诱导后才能获得胚性潜能。本文通过转录组测序的方法对低温处理前和低温处理30 d的苹果花药进行研究,分析低温诱导条件下花药中的差异表达基因。结果表明:转录组测序共得到10.90 Gb的Clean Data。基因表达分析结果显示,共有4 105个基因发生差异表达,包括表达上调基因1 849个,表达下调基因2 256个。注释到GO、COG、KEGG、Swiss-Prot和nr数据库的差异表达基因分别有3 325个、1 504个、733个、2 993个和3 758个。差异表达基因主要富集在与糖类代谢和激素信号转导有关的过程中,其中在淀粉和蔗糖代谢、植物激素信号转导这两个代谢通路中富集的差异表达基因最多。筛选出的差异表达基因中控制蔗糖合成、细胞分裂素、脱落酸和油菜素内酯信号转导的相关基因表达量上调,控制淀粉合成、生长素信号转导的相关基因表达量下调。差异表达基因的荧光定量PCR结果显示测序结果和实际结果变化趋势完全一致。由此可见,苹果花药经低温诱导后,影响蔗糖、淀粉生物合成和生长素、细胞分裂素、脱落酸、赤霉素和油菜素内酯信号转导相关基因的表达变化是影响小孢子获得胚性潜能的关键。
- 罗慧珍邓舒张春芬肖蓉王卉孟玉平曹秋芬
- 关键词：胚状体转录组测序差异表达基因荧光定量PCR
- 苹果花药石蜡切片制片技术改良及其解剖学观察被引量：9
- 2016年
- 石蜡切片是常规制片技术中应用最普遍的方法,主要用于观察组织细胞结构。本研究以苹果花药作为实验材料,通过改良脱水、染色等制片环节,即增加脱水时乙醇的浓度梯度,以及用埃里希氏(Ehrlich)苏木精染色15 min,得到了染色更均匀、细胞完整度更高的玻片标本。实验结果表明,用改良后的制片方法得到切片组织更完整,更能清晰地辨认出花粉细胞的结构,利于观察。
- 冯丽云张春芬聂园军邓舒温鑫肖蓉李倩任莹罗慧珍曹秋芬
- 关键词：石蜡切片染色
- 干旱和盐胁迫条件下枣树谷胱甘肽过氧化物酶基因(ZjGPX)的差异表达及功能分析被引量：14
- 2015年
- 【目的】研究枣树谷胱甘肽过氧化物酶基因(Zj GPX)的功能,为其在果树抗逆基因工程改良中的利用奠定基础。【方法】以‘壶瓶枣’(Ziziphus jujuba Mill.Hupingzao)结果枝构建的c DNA文库中选取一条与其他植物谷胱甘肽过氧化物酶基因有较高同源性的序列为研究对象进行序列分析,预测其功能。通过实时荧光定量技术分析目的基因在盐胁迫及干旱胁迫条件下的表达特性,并构建植物表达载体PEZR(K)-LNY-Zj GPX,运用农杆菌介导法,将Zj GPX转入拟南芥,对转基因及野生拟南芥植株作盐胁迫及干旱胁迫处理,验证其抗逆功能。【结果】Zj GPX编码序列(CDS)长510 bp,编码169个氨基酸。Blast比对发现该基因与多种植物GPX基因具有高度同源性(>80%)。实时荧光定量分析表明,在辣椒枣组培苗中,Zj GPX能够被一定浓度的干旱胁迫和盐胁迫诱导表达,且反应迅速,仅胁迫15 min,其相对表达量与对照相比即出现大幅升高,暗示该基因可能对枣树抗旱性和耐盐性具有重要的作用。结合50μg·m L-1 Kan抗性筛选、PCR验证及激光共聚焦显微镜观察,共获得10株阳性转基因拟南芥株系,干旱及盐胁迫处理结果显示,转基因拟南芥种子萌发率均高于野生型拟南芥;成株在胁迫15 d后,野生型拟南芥出现叶片发黄、萎蔫、整株干枯、死亡的迹象,而转Zj GPX拟南芥生长基本正常。表明过表达Zj GPX拟南芥株系具有良好的耐旱性和耐盐性。【结论】Zj GPX在植物的干旱和盐胁迫应答反应机制中起重要作用,过量表达Zj GPX可提高转基因拟南芥的耐旱和耐盐能力。
- 肖蓉罗慧珍张小娟邓舒张春芬任莹孟玉平曹秋芬聂园军
- 关键词：枣树GPX胁迫转基因拟南芥
- 苹果MdSWEET1基因生物信息学和表达分析
- 2016年
- 糖转运蛋白SWEET作为一种新发现的蛋白在动植物中广泛存在,其对植物花蜜的生产和种子、花粉的发育有重要作用。本研究通过对本课题组获得的新基因MdSWEET1利用生物信息学软件进行分析,并利用实时荧光定量PCR对经低温预处理不同时间段后的苹果花药中该基因的表达量进行分析。生物信息学分析结果表明:MdSWEET1的cDNA中包含342 bp的开放阅读框(ORF),编码113个氨基酸,相对分子质量12.985 kD,等电点8.93,该基因编码蛋白的二级结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成,中间夹杂分布β-折叠;具有三个跨膜结构域,N端位于膜外;序列分析表明MdSWEET1与其他物种中发现的该蛋白氨基酸序列同源性很低。实时荧光定量分析表明,经低温预处理的苹果花药中MdSWEET1基因表达量随着冷处理时间的增加呈下调趋势,由此预测低温预处理阻碍了MdSWEET1基因的表达而影响其功能。该研究为进一步了解MdSWEET1对苹果花粉育性的影响提供理论依据。
- 温鑫邓舒罗慧珍张春芬冯丽云肖蓉聂园军李倩任莹曹秋芬
- 关键词：苹果生物信息学表达量
