莫镜
- 作品数：9 被引量：42H指数：4
- 供职机构：广州医学院第三附属医院更多>>
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- RhoA—Rock信号通路抑制剂对缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白细胞骨架的影响被引量：2
- 2012年
- 目的用RhoA—Rock信号通路抑制剂探讨肺出血时肺微血管内皮细胞的调控因素。方法人肺微血管内皮细胞常规培养，分为4组：对照组、抑制剂组、缺氧组和抑制剂缺氧组。异硫氰酸荧光素一鬼笔环肽与胞浆内丝状肌动蛋白（filamentous actin，F—actin）结合而发出红色荧光，共聚焦显微镜扫描观察F—actin的变化情况并记录相应荧光值。结果细胞缺氧组1h、12h和24h的F—actin平均荧光强度分别为对照组的（64．3±5．5）％、（60．3±4．2）％和（47．8±4．6）％；抑制剂缺氧组1h、12h和24h分别为对照组的（66．2±3．2）％、（67．1±6．2）％和（72．5±6．1）％。细胞缺氧组缺氧1h后，F—actin平均荧光强度降低[（64．3±5．5）％]，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），至缺氧24h，F—actin含量已下降至对照组的（47．8±4．6）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。抑制剂缺氧组缺氧1h后，F—actin平均荧光强度较缺氧组1h有所升高，为对照组的（66．2±3．2）％，抑制剂组缺氧24h后F．actin平均荧光强度为对照组的（72．5±6．1）％，与缺氧组缺氧24h相比差异有统计学意义（P〈0．05）。而抑制剂组不经缺氧的F—actin平均荧光强度与对照组相比无显著变化（P〉0．05）。缺氧后细胞皮质状结构消失，应力纤维排列紊乱，随着缺氧时间的延长，F—actin逐渐解聚断裂。用RhoA-Rock信号通路抑制剂预处理细胞后再缺氧，核周围F—actin所形成的皮质状结构重新出现，细胞浆内应力纤维的排列和分布趋向于规律，F—actin断裂减少。结论RhoA—Rock信号通路在肺微血管内皮细胞缺氧过程中介导了F—actin的损伤，用RhoA-Rock信号通路抑制剂干预可以为新生儿肺出血的治疗研究提供一个新的方向。
- 张费通崔其亮莫镜
- 关键词：肺出血肺微血管内皮细胞
- 超未成熟儿高酪氨酸血症I型1例被引量：3
- 2011年
- 患儿 男．出生后1h＋．因“胎龄26周，生后1＋h”入院。患儿为第3胎第1产孕26周臀位助产娩出，出生体重986g。无早破水，羊水清，胎盘、脐带正常。无宫内窘迫史，有产后窒息抢救史，经复苏处理，于气管插管正压通气下转入NICU。其母自然流产1次。
- 谭小华崔其亮莫镜李颖林黎黎
- 关键词：酪氨酸血症超未成熟儿臀位助产宫内窘迫NICU正压通气
- 双歧杆菌对溃疡性结肠炎小鼠外周血和肠系膜淋巴结CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节T细胞表达的影响被引量：9
- 2011年
- 目的探讨双歧杆菌治疗溃疡性结肠炎与CD4+ CD25+ Foxp3+调节T细胞的相关可能机制。方法采用DSS制作UC小鼠结肠炎模型,随机分成3组:正常对照(NC)组,模型(MD)组,双歧杆菌治疗(BbT)组。造模7 d后,给予双歧杆菌后续治疗7 d。评估小鼠疾病活动指数(DAI),结肠行HE染色及病理学评分(HDS);流式细胞仪检测外周血和肠系膜淋巴细胞中表达CD4+ CD25+ Foxp3+的Treg细胞的百分比率。结果 BbT组的DAI明显低于模型组(P<0.05);MD组HDS明显高于正常组(P<0.05);BbT组的HDS明显低于模型组(P<0.05);模型组外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显低于正常组(P<0.05);BbT组结肠外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显高于模型组(P<0.05)。结论双歧杆菌可以提高CD4+ CD25+ Foxp3+Treg数量,调节机体和肠道免疫功能,对UC发挥了一定的治疗作用。
- 姚君王立生师瑞月王建尧李迎雪张茹莫镜
- 关键词：溃疡性结肠炎双歧杆菌CD25+
- 激光共聚焦扫描显微镜检测缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白的变化被引量：1
- 2011年
- 目的研究人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白(F-actin)在缺氧前后的变化,探讨在血管内皮细胞水平研究新生儿肺出血机制的方法。方法人肺微血管内皮细胞常规培养,分为对照组和1、2、4、6、12 h和24 h缺氧培养组,每组设8个复孔,异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽与胞浆内F-actin结合而发出红色荧光,共聚焦显微镜扫描观察F-actin的变化情况并记录相应荧光值。结果缺氧1 h组F-actin平均荧光强度明显降低,为对照组的66.3%±5.3%,差异有统计学意义(P<0.05),缺氧24 h F-actin含量下降至对照组的47.1%±6.9%。缺氧后,细胞变得狭长,细长的丝状伪足明显可见,核周F-actin的分布明显减少,皮质状结构消失,应力纤维排列紊乱或部分消失,随着缺氧时间的延长F-actin逐渐解聚断裂。结论通过观察缺氧前后肺血管内皮细胞F-actin变化,可以为在内皮细胞水平研究新生儿肺出血发病机制提供实验研究基础。
- 张费通崔其亮莫镜
- 关键词：肺出血肺微血管内皮细胞F-肌动蛋白激光共聚焦显微镜
- 重组人白细胞介素-10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究低氧条件下,重组人IL-10(rhIL-10)对人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响。方法常规培养HPMVEC细胞株,分为5组:正常对照组(常规培养);缺氧对照组(50 mL·L-1CO2,950mL·L-1N2);缺氧培养并加入rhIL-10,并按rhIL-10剂量(10×103ng.L-1、50×103ng.L-1、100×103ng.L-1)分为rhIL-10低剂量干预组、rhIL-10中剂量干预组、rhIL-10高剂量干预组。培养4 h、12 h、24 h、48 h离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内Caspase-3活性,24 h核荧光染色并在荧光显微镜下观察荧光强度,并进行统计学分析。结果 4 h,凋亡蛋白Caspase-3相对活性各组间无明显差异(P>0.05);12 h,缺氧对照组,rhIL-10低、中剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),rhIL-10高剂量干预组与正常对照组比较无明显差异(P>0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05);24 h,缺氧对照组、rhIL-10各剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较明显降低(Pa<0.05);48 h,缺氧对照组和rhIL-10低剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较明显降低(Pa>0.05);缺氧凋亡峰值见于24 h。24 h,各组行凋亡细胞核Hoechst荧光染色,缺氧对照组和rhIL-10低、中、高剂量干预组灰度值与正常对照组比较均显著升高(Pa<0.05);rhIL-10低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05)。结论缺氧可促进HPMVEC凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制HPMVEC凋亡,这些变化可能与急性缺氧性各器官疾病密切相关。
- 莫镜崔其亮姚君张费通谭小华
- 关键词：缺氧凋亡人肺微血管内皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
- 重组人白介素10对低氧条件下人单核细胞凋亡变化规律的影响被引量：6
- 2011年
- 目的研究低氧条件下,重组人白介素10(rhIL-10)对人单核细胞白细胞(THP-1)凋亡和caspase-3活性变化规律的影响。方法悬浮培养THP-1细胞株,分为正常对照组(常规培养);低氧(5%O2,5%CO2,90%N2)培养THP-1,rhIL-10以10、50、100 ng/mL的浓度干预,分为低氧对照组,rhIL-10低、中、高剂量干预组;培养12、24、48、72 h,离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内caspase-3活性,48 h核荧光染色荧光显微镜观察,分析荧光强度,行统计学分析。结果凋亡蛋白caspse-3相对活性,12 h各组差异无统计学意义(P>0.05);24 h低氧对照组及低、中剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高(P<0.05),高剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),rhIL-10干预各组与低氧对照组比较降低(P<0.05);48 h低氧对照组和rhIL-10干预低、中、高剂量组与正常对照组比较升高(P<0.05),低、中、高剂量rhIL-10干预组与低氧对照组比较明显降低(P<0.05);72 h低氧对照组、低剂量rhIL-10干预组与正常组比较升高(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05);缺氧凋亡峰值见于48 h。取48 h行各组凋亡细胞核Hoechst荧光染色,灰度值分析低氧对照组和低、中、高剂量rhIL-10干预组与正常对照组比较升高(P<0.05);低、中、高剂量rhIL-10干预组与低氧对照组比较降低(P<0.05)。结论缺氧可促进单核细胞凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制人单核细胞凋亡,这些变化可能与各器官急性缺氧性疾病有密切相关性。
- 姚君王立生王建尧李迎雪朱惠明师瑞月张茹莫镜张利国
- 关键词：低氧凋亡人单核细胞CASPASE-3
- 应用激光共聚焦扫描显微镜技术检测缺氧人肺微血管内皮细胞内钙离子浓度动态变化被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨应用激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)技术检测缺氧状态的人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)内钙离子(Ca2+)浓度动态变化的价值。方法:HPMVEC常规培养,按观察时间点不同分为5个缺氧培养组(1h hyp组、2h hyp组、4h hyp组、6h hyp组和8h hyp组)以及1个对照组(0h con组)共6个组,每组设8个复孔,应用LSCM技术测定缺氧后HPMVEC内Ca2+浓度水平及随时间推移的变化。结果:LSCM技术显示HPMVEC内Ca2+的荧光强度1h hyp组与0h con组比较、2h hyp组与1h hyp组比较、4h hyp组与2h hyp组比较、6h hyp组与4h hyp组比较、8h hyp组与6h hyp组比较有显著差异(P<0.05)。线性回归分析结果显示Ca2+荧光强度与缺氧时间成正相关(r=0.969,P<0.01)。结论:HPMVEC内Ca2+浓度随缺氧时间增长而增高;LSCM在动态检测缺氧状态下HPMVEC内的Ca2+浓度变化中具有明显优势。
- 莫镜崔其亮张费通林黎黎李颖廖嘉仪
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜缺氧人肺微血管内皮细胞钙离子浓度
- 白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠外周血和肠系膜淋巴结CD4^+CD25^+Foxp3^+调节T淋巴细胞表达的影响被引量：12
- 2010年
- 目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱发的UC小鼠模型中的变化情况以及白藜芦醇对溃疡性结肠炎(UC)治疗的可能机制.方法:采用DSS制作UC小鼠模型,小鼠随机分成4组:正常对照(NC)组,模型(MD)组,低剂量(RLD)、高剂量(RHD)白藜芦醇治疗组.造模7d后停用造模药物,给予白藜芦醇后继续治疗7d.14d后,处死小鼠,结肠行HE染色和病理学评分(HDS);流式细胞仪检测外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率.结果:MD组HDS明显高于NC组(P<0.05);RLD和RHD组的HDS明显低于MD组(0.88±0.32,0.23±0.20vs1.39±0.21,均P<0.05);RHD组的HDS明显低于RLD组(P<0.05).RLD和RHD组结肠外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率明显高于MD组(均P<0.05),低于NC组(均P<0.05);RHD组外周血和肠系膜淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率高于RLD组(均P<0.05).结论:白藜芦醇可以提高CD4+CD25+Foxp3+Treg数量,调节机体和肠道免疫功能,对UC的治疗发挥了一定的作用.
- 姚君王立生李迎雪王建尧孙丽萍莫镜邵聪文
- 关键词：溃疡性结肠炎白藜芦醇
- 脂多糖对人肺微血管内皮细胞骨架及TNF-α和IFN-γ表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨脂多糖(LPS)直接诱导人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)后细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变。方法 HPMVEC生长至80%以上融合时,加入LPS以500 ng/mL浓度刺激细胞分别至0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察HPMVEC细胞骨架的变化。至预定时相点离心收集培养液上清液,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γmRNA的表达,采用ELISA方法测定细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析。结果 LPS刺激培养后,8 h组细胞开始出现细胞骨架改变;4 h组TNF-α、IFN-γmRNA表达与0 h组差异无统计学意义(P>0.05),6 h组TNF-α、IFN-γmRNA表达高于0 h组(P<0.05),8 h组TNF-α、IFN-γ表达高于0 h组(P<0.05);4 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平与0 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05),8 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05)。结论细菌致病因子LPS能直接刺激HPM-VEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子的分泌,使促炎因子TNF-α和IFN-γ分泌升高,参与肺损伤。这可能是LPS发挥其毒性作用诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的一个重要途径。
- 莫镜崔其亮姚君张费通张费通
- 关键词：人肺微血管内皮细胞脂多糖细胞骨架TNF-ΑIFN-Γ
