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建立基于荧光素报告基因系统检测雌激素样物质方法的研究被引量：1: 2009年; 目的建立基于报告基因的HeLa细胞体外雌激素样物质检测方法。方法分别构建含有人雌激素hERα和hERβ编码序列的表达质粒以及人雌激素反应元件(estrogen response elements,ERE)调控的荧光素报告质粒,用脂质体将hERα、ERE质粒或hERβ、ERE质粒共转染HeLa细胞,用雌二醇(E2)处理后检测报告基因荧光素酶的活性。结果构建了pERαneo和pERβneo质粒以及ERE调控的荧光素酶报告质粒pGL3-ERE-Luc,共转染质粒pERE4-Luchygro和pERαneo或pERE4-Luchygro和pERαneo到HeLa细胞株后,建立稳定表达ERE-Luc的hERα/hERβHeLa细胞株,实验证实报告基因的表达与E2呈明显的剂量反应关系,ERα和ERβ的EC50分别为9.2×10-11mol/L和2.5×10-10mol/L。结论基于荧光素酶报告基因的体外雌激素样物质检测方法有效可靠。; 倪秉强段小群谭宁李军刘永明; 关键词：雌激素报告基因荧光素酶

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谭宁