赵京卉
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 节律基因mPER1对小鼠Lewis肺癌细胞迁移的影响被引量：1
- 2007年
- 目的通过节律基因mPeriod1(mPer1)过表达,研究mPer1对小鼠Lewis肺癌细胞迁移的影响。方法采用脂质体介导法将mPer1基因转染入Lewis细胞。通过RT-PCR检测mPer1在Lewis细胞中的表达;采用Chemico公司QCM(tm)24-Well Colorimetric Cell Migration Assay检测细胞迁移的变化。结果与pcDNA3.1空质粒相比,pcDNA3.1-mPer1转染组mPer1表达增加,其迁移率与对照组比较明显下降。结论节律基因mPer1过表达能够抑制Lewis肺癌细胞的迁移。
- 赵京卉汪宇辉刘延友段志青林丽要然朱小云王正荣
- 关键词：细胞迁移近日节律
- 蛋白质转导技术的应用及研究进展
- 2007年
- 生物膜的脂质双分子层对极性强的蛋白质、DNA及高分子复合物是一个有力的屏障,使用具有临床应用价值的蛋白质等都必须克服这个障碍。研究发现,一些蛋白质上具有蛋白质转导区(PTD)的小片段,能够有效地通过生物膜,几乎进入所有细胞。以PTD为载体,已成功地携带多种物质进入细胞或进入机体的组织器官。蛋白质转导在运送蛋白质、寡核苷酸、特异性杀伤肿瘤细胞、神经退行性疾病等方面具有巨大的潜力。
- 李治昊高梅叶珊赵京卉甘友清
- 关键词：蛋白质转导
- 光照对小鼠活动节律及生长的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨光照周期变化对小鼠活动节律及生长的影响。方法利用不同光暗周期（LD5／5、LD10／10、LD12／12、LD14／14、LD16／16）对小鼠施加影响，观察小鼠活动性变化，并检测其生长速度和血浆皮质酮水平。结果备组小鼠活动性周期与光暗循环周期一致，LD5／5、LD16／16组的生长速度快于其余三组，LD5／5、LD16／16血浆皮质酮水平高于LD12／12组。结论小鼠的活动可以很好的适应环境变化，但超过其近日节律可调范围（20-28h）的光暗循环条件可影响其生长，很可能使其处于应激状态。
- 朱小云江舟王正荣刘延友段志青赵京卉林丽张宇要然
- 关键词：近日节律血浆皮质酮
- hClock-(35-47)的表达、纯化及其功能的检验被引量：2
- 2007年
- 目的构建hClock-(35-47)的表达质粒,进行诱导表达,纯化,在体外初步鉴定其跨膜功能。方法合成hClock-(35-47)全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,构建好重组体的表达菌株。IPTG诱导并优化表达后,以NTA-Ni亲合层析进行分离纯化,及SDS-PAGE和Western bloting鉴定。纯化鉴定后的hClock-(35-47)用FITC标记,以一定的浓度孵育体外培养的血管内皮细胞(ECV-304),荧光显微镜下观察其穿膜活性。结果成功构建了hClock-(35-47)的表达载体,插入片断为51bp,表达产物相对分子质量约为21kD,经Western bloting鉴定,与抗His-Tag抗体有特异性反应,与培养的ECV-304孵化,显示具有穿膜功能。结论原核表达的hClock-(35-47)仍然保留其穿膜功能,为进一步研究提供基础。
- 高梅赵京卉冀治鸿刘延友肖静汪宇辉王正荣
- 关键词：纯化内皮细胞
- PMA诱导节律基因表达对细胞紫外线损伤的影响
- 2007年
- 目的研究诱导NIH3T3细胞节律基因表达对细胞紫外线损伤的影响。方法用体外节律诱导剂乙酰肉豆蔻佛波酯诱导NIH-3T3细胞节律基因表达。分别选择mPer2基因表达的谷值和峰值时刻对细胞进行紫外线照射,以非诱导节律的单纯照射组为对照,通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,平板克隆形成试验检测细胞增殖情况。结果mPer2基因表达峰值时进行紫外线照射的细胞,与mPer2基因表达谷值时和非诱导节律紫外线照射细胞比较,增殖能力强、凋亡率低、G1期阻滞明显。结论节律基因诱导的NIH3T3细胞的紫外线损伤减小,并与mPer2的基因表达相关,其保护作用可能与mPer2基因过表达有关。
- 林丽史修波要然赵京卉刘延友汪宇辉王正荣
- 关键词：近日节律PMA紫外线照射DNA损伤
- 节律基因mPer1对肿瘤细胞迁移的影响及其机制的初步研究
- 赵京卉
- hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达和纯化被引量：4
- 2007年
- 目的:构建hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达质粒,进行诱导表达,纯化和鉴定。方法:合成hClock-(35-47)_Bax-(55-77)全长DNA序列,重组入pET-32a表达载体中,测序鉴定后转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,构建好重组体的表达菌株。IPTG诱导并优化表达后,以NTA-Ni亲合层析进行分离纯化,及SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功构建了hClock-(35-47)_Bax-(55-77)的表达载体,插入片断为128bp,表达产物相对分子质量约为23kD,经Western blotting鉴定,与抗His-Tag抗体有特异性反应。结论:hClock-(35-47)_Bax-(55-77)融合蛋白可以用原核表达的方法大量获得,并通过亲和层析纯化达到较好的纯度,为下一步的研究提供基础。
- 高梅刘延友汪宇辉赵京卉叶珊肖静王正荣
- 关键词：BAX原核表达纯化
- PMA诱导小鼠Lewis肺癌细胞节律基因的表达
- 2008年
- 目的采用体外节律诱导剂以研究小鼠Lewis肺癌细胞近日节律基因的表达情况。方法采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)刺激体外培养的小鼠Lewis肺癌细胞(LLC),RT-PCR检测不同时间点mPer1的mRNA表达水平。Real-time PCR和RT-PCR检测mClock的mRNA表达水平。结果发现LLC细胞的节律基因mClock、mPer1存在近日节律振荡。结论经PMA诱导后,LLC细胞的节律基因存在近日节律振荡,为体外研究授时因子对近日节律的导引机制提供证据。
- 要然刘延友张太明赵京卉朱晓云张宇汪宇辉王正荣
- 关键词：近日节律PMA小鼠LEWIS肺癌细胞
- 肿瘤细胞节律基因对其药物敏感性的影响被引量：1
- 2008年
- 目的通过体外实验诱导节律基因表达,探讨肿瘤细胞节律基因对其药物敏感性的影响。方法采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)诱导体外培养的EMT6乳腺癌细胞节律基因的表达;在不同时间点,以RT-PCR检测节律基因的代表mPer1基因的表达水平。在mPer1基因表达的高峰与低谷分别给予阿霉素(ADM)处理。采用二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(MTT)法和流式细胞术检测ADM对EMT6细胞增殖的影响。结果PMA诱导后,EMT6细胞的mPer1基因呈近日节律。在mPer1基因表达高峰时,ADM对肿瘤细胞的抑制率高于其在低谷的抑制率。结论肿瘤细胞节律基因能够影响其对药物的敏感性。
- 段志青要然薛建新赵京卉朱小云汪宇辉刘延友王正荣
- 关键词：近日节律阿霉素细胞增殖
