赵敏星
- 作品数:7 被引量:21H指数:3
- 供职机构:南通大学附属医院更多>>
- 发文基金:南通市科技局社会发展科技计划项目江苏省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人Glypican3 N端融合蛋白多克隆抗体制备及鉴定
- 江枫肖明兵赵敏星倪润洲
- GST-Glypican 3 N端融合蛋白表达载体构建及表达纯化被引量:3
- 2010年
- 目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3 N端基因,产物经纯化回收后与载体PGEX-4T-1连接并转化大肠埃希菌Rosetta,酶切鉴定序列完全正确者诱导表达GST-GPC3 N端融合蛋白,并以谷胱甘肽琼脂糖小珠亲和纯化。结果Glypican 3 N端基因片段成功插入载体PGEX-4T-1,插入位点及碱基序列完全正确,转化Rosetta后,经IPGT诱导成功表达分子质量为64 000的GST-GPC3 N端融合蛋白。结论成功建立了重组GST-GPC3 N端融合蛋白的原核表达载体、表达菌株及诱导表达和纯化的方法,为GPC3 N端融合蛋白的进一步应用打下基础。
- 肖明兵赵敏星倪润洲江枫周嘉伟
- GST-Glypican3N端融合蛋白表达载体构建及表达纯化
- 肖明兵赵敏星倪润洲江枫
- 人磷酯酰蛋白聚糖3N端融合蛋白多克隆抗体制备及鉴定被引量:2
- 2010年
- 目的:制备人磷酯酰蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)N端蛋白的多克隆抗体。方法:在大肠埃希菌Rosetta中诱导表达磷酯酰蛋白聚糖3N端融合蛋白,从SDS-PAGE中切胶纯化,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体。用辛酸-硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清,并用ELISA、Westen-blot检测抗体的灵敏度和特异性。结果:成功制备了抗磷酯酰蛋白聚糖3N端的多克隆抗体,抗体滴度为1:64000,经Western blot检测特异性良好。结论:成功制备了抗人磷酯酰蛋白聚糖3N端融合蛋白多克隆抗体。
- 江枫肖明兵赵敏星倪润洲周嘉伟
- 关键词:融合蛋白多克隆抗体原发性肝细胞癌
- HS-AFP GGT-Ⅱ及AFP预测肝硬化癌变的临床价值被引量:4
- 2009年
- 目的:探讨肝癌特异性甲胎蛋白(HS-AFP)、甲胎蛋白(AFP)和γ-谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ(GGT一Ⅱ)对肝硬化患者肝癌发生风险的预警价值。方法:HS-AFP采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)结合Western blot分离检测。AFP采用放射免疫分析测定法。GGT-Ⅱ采用PAGE分离检测。对341例肝硬化患者进行跟踪随访18个月,了解肝癌发生情况,分析比较HS-AFP、GGT-Ⅱ和AFP预测肝硬化患者发生肝癌风险的价值。结果:6、12、18个月随访期内HS-AFP、GGT-Ⅱ两项指标阳性组癌变率高于阴性对照组;随访12个月以上AFP阳性组癌变率高于阴性对照组;Hs-AFP、GGT-Ⅱ阳性组癌变率高于AFP阳性组,但前两者差异不明显;HS-AFP与GGT-Ⅱ及AFP之间存在互补性,其中HS-AFP和GGT-Ⅱ联合检测预测肝硬化癌变的敏感性、特异性和准确度分别达71.6%、91.4%、91.6%。结论:HS-AFP、GGT-Ⅱ和AFP对肝硬化癌变均有预测价值;HS-AFP和GGT-Ⅱ预测肝癌的特异性、准确度优于AFP;HS-AFP与GGT-Ⅱ预测肝癌的特异性、准确度相似;多项指标联合检测可提高预测肝硬化癌变的敏感性、特异性和准确度,以HS-AFP和GGT-Ⅱ联合检测效果最优。
- 赵敏星倪润洲肖明兵江枫陆翠华魏群李峰
- 心脏型脂肪酸结合蛋白和心肌肌钙蛋白Ⅰ在急诊胸痛患者对心肌梗死的诊断价值被引量:4
- 2016年
- 目的:比较心脏型脂肪酸结合蛋白和心肌肌钙蛋白Ⅰ对心肌梗死的诊断价值。方法:回顾性分析2015年7月—2016年7月在南通大学附属医院急诊抢救室因胸痛或胸闷不适并检测该指标的留院观察患者282例。按入院时症状发作时间分为〈4 h、4-24 h和〉24 h 3个时间段,分别比较心脏型脂肪酸结合蛋白和心肌肌钙蛋白Ⅰ在这3组患者中诊断心肌梗死的敏感性、特异性和准确性。结果:对于症状发作〈4 h的患者,心脏型脂肪酸结合蛋白的敏感性与心肌肌钙蛋白Ⅰ类似。对于症状发作≥4 h的患者,心肌肌钙蛋白Ⅰ的敏感性优于心脏型脂肪酸结合蛋白。3个时间段里,心肌肌钙蛋白Ⅰ的特异性、准确性均显著优于心脏型脂肪酸结合蛋白。结论:与心肌肌钙蛋白Ⅰ相比,心脏型脂肪酸结合蛋白没有显著提高急性心肌梗死的早期检出率;心肌肌钙蛋白Ⅰ较脂肪酸结合蛋白具有更高的诊断特异性。
- 赵敏星王霆李晶菁
- 关键词:急诊胸痛心脏型脂肪酸结合蛋白
- 血清glypican 3 ELISA检测法的建立及初步应用被引量:9
- 2011年
- 目的建立血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)的双抗体夹心ELISA检测法,并探讨其应用价值。方法以本室自制抗GPC3单克隆抗体为包被抗体,以兔抗人GPC3抗体为检测抗体,建立检测GPC3的双抗体夹心ELISA法。对建立的方法进行线性范围、灵敏度、精密度、回收率等方法学评价,并用于测定原发性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及体检健康者血清标本。结果该法线性范围为0.2~12.5μg/L,灵敏度为0.101μg/L,批内CV≤5.99%,批间CV≤6.96%,平均回收率为99.9%。原发性肝癌患者血清GPC3浓度5.43(2.28~8.62)μg/L明显高于肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及健康对照组(P均<0.05)。以3.19μg/L为临界值时,诊断肝癌的敏感性和特异性分别为85.4%及98.9%。结论该法灵敏、特异和准确,可用于原发性肝癌的诊断。
- 江枫肖明兵倪润洲赵敏星朱净周嘉伟
- 关键词:磷脂酰肌醇蛋白聚糖3ELISA法原发性肝癌