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大黄鱼(Pseudosciaena crocea)热激蛋白的基因克隆、原核表达及抗血清的制备被引量：12: 2006年; 应用trizol裂解法提取象山港网箱养殖大黄鱼肝脏总RNA,采用RTPCR获得大黄鱼cDNA;通过设计特异引物进行PCR扩增,将PCR产物转化到质粒并直接测序,得到1.7kb的目的基因;同时将此目的基因连接到表达质粒pSBET中,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达以及表达产物的分析。克隆基因的表达产物经SDSPAGE分析表明,HSP基因的蛋白分子量为60kDa左右,与阅读框的编码大小一致;表达蛋白经纯化后免疫小鼠制备抗血清。Westernblotting检测结果表明,制备的抗血清与HSP蛋白起较强的特异性反应。HSP基因的系统进化分析表明,大黄鱼与非洲爪蟾最为接近,从侧面印证了脊椎动物中两栖纲动物与鱼纲动物的亲源关系。通过大黄鱼HSP基因的提取和分析,可为以后制备出核酸探针、筛选和克隆出一批具有优良性状的基因、构建基因文库等研究工作奠定基础。; 张祖兴李明云陈炯邬勇; 关键词：大黄鱼热激蛋白基因原核表达抗血清

大黄鱼热激蛋白cDNA克隆及系统发育分析被引量：1: 2007年; 根据已报道的HSP基因序列(EMB登录号:AF506290),设计出特异引物,PCR扩增后测序,获得1.7 kb大小的大黄鱼热激蛋白cDNA基因序列。HSP氨基酸序列的系统进化分析表明:不同物种编码的HSP存在一些明显相关的群体,高等动物编码的HSP在进化上紧密相关,形成一个显著群体,大黄鱼编码的HSP蛋白位于高等动物群体中,这与大黄鱼的亲缘关系大致吻合,其中与非洲爪蟾的同源性最高(92.3%),也间接印证了脊椎动物中两栖纲动物与鱼纲动物的亲源关系。通过大黄鱼HSP基因的提取和分析,可为以后制备出核酸探针、筛选和克隆出一批具有优良性状的基因、构建基因文库等研究工作奠定基础,同时对大黄鱼的品质改良和良种的选育有重要意义。; 李明云张祖兴邬勇陈炯史雨红; 关键词：大黄鱼克隆系统发育

罗氏沼虾浙江养殖群体与缅甸自然群体遗传差异的RAPD分析被引量：36: 2004年; 利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,对浙江省罗氏沼虾养殖群体和新引进的缅甸自然群体的遗传差异进行了比较分析,以期从分子水平了解罗氏沼虾的种群遗传多样性背景及与引种的关系。采用经筛选的22个10bp的随机引物对罗氏沼虾两群体各20尾进行群体RAPD分析。22个引物共检测到139个位点。养殖群体的多态位点比例为30.22％,群体平均杂合度为0.2646,Shannon多样性指数为0.0780,群体内各个体之间的遗传共享度为0.9353,遗传距离为0.0647;自然群体的多态位点比例为33.82％,群体的平均杂合度和Shannon多样性指数分别为0.2888和0.0940,群体内各个体之间的遗传共享度为0.9202,遗传距离为0.0799;两群体之间的遗传距离为0.1845。自然群体的遗传多样性水平比养殖群体要高。利用随机引物S9和S52,在罗氏沼虾两群体间扩增出2条稳定、明显的群体间特异性标记带。; 李明云张海琪朱俊杰邬勇黄福勇何中央徐晓林杜建明; 关键词：罗氏沼虾 RAPD

鮸鱼亲鱼培育及其人工繁殖的研究被引量：24: 2005年; 采用自然苗培育成的1龄(鱼免)鱼,通过'春肥、夏育、秋繁、冬保'8字方针培育成亲鱼,性成熟率达到95%.经LHRH-A3 0.8～1.8 μg /kg催产并放人产卵池自行产卵,获产率达到96.83%.获受精卵650万余粒,受精率达到52%.受精后21.8 h孵化出鱼苗,孵化率达到70%.; 李明云郑忠明竺俊全徐万土邬勇黄福勇张祖兴刘伟成; 关键词：亲鱼培育人工催产人工孵化

大黄鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱被引量：3: 2006年; 从大黄鱼（Pseudosciaena crocea）肝脏中提取线粒体DNA（mtDNA）。用限制性核酸内切酶酶切后，得到酶切图谱。以1 kb ladder作为相对分子量标准。以电泳迁移率为纵坐标，分子量的对数值为横坐标作标准图，利用电泳迁移率与分子量的对数值的线性关系，计算出各酶切片段的分子量，并推算出大黄鱼mtDNA分子量为27．33×10^6D，大小为16．891kb左右。根据单酶切和双酶切的数据，以及mtDNA是环状分子等特征，建立了大黄鱼的mtDNA酶切图谱。; 李明云朱俊杰邬勇张春丹黄福勇; 关键词：石首鱼科大黄鱼线粒体DNA 限制性内切酶酶切图谱

美国红鱼(Sciaenops ocellatus)鳍条组织的同工酶表达被引量：5: 2005年; 通过用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法,对美国红鱼(Sciaenops ocellatus)鳍条组织的4种同工酶(LDH,POD,ATP,EST)的表达进行研究,并与眼睛、肌肉、心脏、肝脏、脾脏和肾脏等6种组织或器官的4种同工酶(LDH,POD,ATP,EST)表达进行比较.结果表明:在鳍条组织中共表达出12条酶带,与其他几种组织或器官相差不多,可以替代其他组织或器官作为同工酶检测的材料之一,从而避免杀死鱼类来作同工酶分析,大大减少了科研成本并明显简化了实验步骤.; 邬勇李明云范华钟爱华; 关键词：美国红鱼同工酶

镉胁迫条件下大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)外周血微核标记及肝脏过氧化物酶标记的变化被引量：23: 2006年; 采用静态毒性实验方法,研究重金属镉胁迫条件下大弹涂鱼外周血微核率和肝脏过氧化物酶活性的变化。结果表明,在0.05mg/L Cd2+浓度组,10d时检测到微核率极显著升高;0.5mg/L和5mg/L组5d时就可检测到微核率极显著升高,到10d时微核率达到最高值;10d时转入清洁海水后,3个组在15d再次出现一个微核率的最高值。大弹涂鱼肝脏过氧化物酶标记包括谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽转硫酶(GST)。3个组的GSH-Px酶活性和5mg/L浓度组GST酶活性在12h后显示出极显著变化,3个组GST酶活性在24h检测到极显著差异;在转入清洁海水5d时,3个组GSH-Px酶活性和对照组相比可检测到极显著差异,而3个组的GST酶活性均无显著差异。研究结果表明,大弹涂鱼外周血微核标记和肝脏过氧化物酶标记能够灵敏地指示水环境中的镉污染;大弹涂鱼外周血微核标记和肝脏内过氧化物酶标记具有一定的互补作用。; 张春丹黄福勇李明云陆孙杰竺俊全邬勇; 关键词：镉大弹涂鱼微核谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽转硫酶

大黄鱼热激蛋白和海帕西啶蛋白基因的克隆与原核表达研究: 大黄鱼（Pseudosciaena crocea<Richardson>）是我国沿海网箱养殖的主要对象之一，在海水养殖上具有重要的经济价值。虽然我国大黄鱼养殖业形成了一定的规模，人工繁殖也已经取得成功，并开展了大黄鱼的人...; 邬勇; 关键词：大黄鱼热激蛋白基因基因克隆原核表达

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邬勇