陈智鹏
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：暨南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠骨髓来源巨噬细胞的SILAC代谢标记及生物质谱分析被引量：1
- 2012年
- 目的作为模型细胞之一,小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)是药理学、药效学研究的重要工具和对象。然而,由于巨噬细胞增殖能力较弱,代谢标记细胞内蛋白一直是巨噬细胞生物学中的一个难题。因此,本研究以SILAC(stable i-sotope labeling with amino acids in cell culture)方法标记BMM。方法小鼠骨髓细胞的分离,以M-CSF诱导6 d并制备BMM,同时,SILAC标记细胞内蛋白;进而,裂解细胞并收集蛋白质,以SDS-PAGE进行初步分离,经胶内酶解成肽段,再通过质谱分析测定,统计得其标记效率。结果小鼠骨髓细胞在分化6 d时点成熟BMM可占细胞总数的0.965。以70 ku条带为研究对象,d 6、8和d 10鉴定到重链赖氨酸标记蛋白数分别为18、12和13个。其中,有8个蛋白在该3个时点中均被检出。统计结果表明3个时点的重链赖氨酸蛋白标记效率分别为(90.62±0.03)%、(90.23±0.03)%和(90.40±0.02)%,达到了SILAC研究的要求。结论该方法解决了BMM的SILAC标记问题,可为以巨噬细胞为研究对象的药理学研究提供有效的研究手段。
- 王通郭嘉慧陈智鹏银兴峰马文心崔毅峙
- 关键词：SILAC质谱蛋白质组
- 人肺腺癌细胞系与支气管上皮细胞系差异蛋白质组学研究被引量：3
- 2010年
- 目的:通过对肺腺癌细胞系A549细胞和正常上皮细胞系HBE蛋白组成差异的分析,寻找与肺癌发生、发展相关的差异蛋白,为进一步阐明肺癌发病机制提供更多有价值的信息;为诊断或者预后提供候选分子标记物。方法:运用固相pH梯度双向电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI/TOF/TOF/MS)分析技术筛选出A549细胞和支气管上皮细胞系HBE间表达水平显著差异的蛋白,并且利用免疫印迹方法对筛选的标记物蛋白进行验证。结果:筛选出21个差异蛋白,涉及到细胞的代谢、蛋白质修饰、细胞运动,通道蛋白和信号转导调控等方面。鉴定并且验证在A549细胞中显著高表达热休克蛋白27(HSPB1)。结论:肺腺癌细胞系与正常支气管上皮细胞系蛋白质表达存在显著差异,其中肺腺癌中高表达HSPB1可能在肺腺癌癌变过程中发挥重要作用,本结果为进一步寻找肺腺癌癌变蛋白标志物奠定了基础。
- 李丽萍陈智鹏贾海涛王炜贾红玲卢春花
- 关键词：A549细胞蛋白质组
- 蛋白酶体抑制剂PS-341诱导骨髓瘤细胞凋亡的蛋白质组学研究(英文)
- 2010年
- 目的:比较蛋白酶体抑制剂PS-341处理多发性骨髓瘤细胞U266前后蛋白质组的差异,探究PS-341潜在的药物靶点,为多发性骨髓瘤的临床治疗提供理论依据。方法:用蛋白酶体抑制剂PS-341处理骨髓瘤细胞U266,应用双向凝胶电泳技术分离PS-341处理前后的U266细胞的蛋白质,Im-ageMaster 2D Platinum图像分析软件识别药物处理前后U266细胞的差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质。Western印迹法检测差异蛋白质BAG-2在药物处理前后U266细胞中的表达水平。结果:建立了PS-341处理前后U266细胞蛋白质的双向凝胶电泳图谱,找到55个差异表达的蛋白质点,鉴定了31个差异表达的蛋白质,有27个蛋白质在PS-341处理后下调。Western印迹分析证实BAG-2在药物处理前后U266细胞中的表达水平存在差异。结论:处理后下调的一些蛋白可能是蛋白酶体抑制剂PS-341潜在的药物靶标。
- 贾海涛葛峰卢心鹏曾慧兰李丽萍陈智鹏卢春花
- 关键词：PS-341多发性骨髓瘤双向凝胶电泳质谱药物靶标
- 一种治疗肺癌的药物
- 本发明公开了一种治疗肺癌的药物，该药物是由NG25和曲美替尼按质量比4:1组成；所述的肺癌是CLU基因功能缺失或下调的肺癌。进一步地，所述的肺癌是CLU基因功能缺失或下调的、由KRAS<Sup>G12D</Sup>癌基因...
- 陈良陈智鹏
- 文献传递
- 肺腺癌A549细胞EMT中的线粒体功能蛋白质组学研究
- 上皮间质转换(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)是一种逆分化现象,即已分化的成体细胞获得干细胞样表型。癌细胞在EMT中细胞迁移和侵袭能力增强,故其在保持恶性增殖表型的同时,需额...
- 陈智鹏
- 关键词：EMT线粒体SILACIPA
- 文献传递
- 一种治疗肺癌的药物
- 本发明公开了一种治疗肺癌的药物，该药物是由NG25和曲美替尼按质量比4:1组成；所述的肺癌是CLU基因功能缺失或下调的肺癌。进一步地，所述的肺癌是CLU基因功能缺失或下调的、由KRAS<Sup>G12D</Sup>癌基因...
- 陈良陈智鹏
- 文献传递
- 携带中国株HIV-1 gp120基因的重组腺病毒的构建及其感染巨噬细胞的形态学研究被引量：2
- 2012年
- 目的:构建携带中国株HIV-1 gp120基因并可感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)的重组腺病毒。方法:利用AdMax腺病毒构建系统,以双质粒共转染人胚肾转化细胞293Ad5+细胞,完成重组腺病毒载体包装,并进一步扩增和纯化。通过ELISA测定gp120的蛋白产量,以确认目的基因重组与表达成功。以Karber法对病毒进行TCID50滴度测定,利用BMM进行感染复数(MOI)流式细胞术测定,并利用荧光显微镜观察细胞活化形态。结果:成功构建AdMax-HIV-1 gp120(简称Ad-gp120)及其对照病毒(Ad-GFP),其滴度分别为108.3和108.1TCID50/mL。这些病毒可感染BMM,MOI测定结果表明2种重组腺病毒感染BMM和293Ad5+细胞的能力接近,验证了上述TCID50滴度结果。Ad-gp120可在293Ad5+细胞中表达gp120蛋白,并可感染和诱导BMM相关形态改变。结论:成功构建Ad-gp120,其感染可致BMM出现形态发生改变。
- 王通马文心郭嘉慧陈智鹏崔毅峙
- 关键词：重组腺病毒
