顾万钧
- 作品数：42 被引量：135H指数：8
- 供职机构：佛山科学技术学院农牧学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科委资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- HIV-2 env基因在大肠杆菌和重组痘苗病毒中的表达被引量：1
- 1998年
- 将编码人Ⅱ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－２）ｅｎｖｇｐ１２０（Ｅ１）和ｇｐ３６（Ｅ２）分别克隆到原核高效表达载体ｐＥＴ１７ｂ、ｐＢＶ２２０和真核表达载体ｐ１０、ｐ１６中，构建成８个重组质粒。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明，在原核表达系统成功地表达了ＨＩＶ－２ｅｎｖ融合蛋白，表达的蛋白分子量分别为３５０００、７００００和５００００，而原核表达质粒ｐＥＴＥ１在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶的３５０００处可见明显的额外蛋白带。经薄层扫描测定，原核系统表达的Ｅｎｖ蛋白（ｇｐ１２０）相对含量为５．８％。在真核细胞中表达的Ｅｎｖ蛋白经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测分析，分子量分别为６００００、５７０００和４２０００。上述表达的Ｅｎｖ蛋白均能与ＨＩＶ－２阳性血清发生特异性反应。
- 王秀清金宁一田梅郭志儒郭志儒顾万钧方厚华殷震
- 关键词：HIV-2大肠杆菌痘苗病毒
- 鸡痘病毒282E_4株基因组BamHⅠ片段的克隆及酶切图谱分析被引量：5
- 1995年
- 本研究用ｐＵＣ１８质粒作载体，采用鸟枪法克隆ＦＰＶ基因组ＢａｍＨⅠ部分片段，用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ－ｄＵＴＰ标记的ＦＰＶ２８２Ｅ４ＢａｍＨⅠ片段探针打点杂交，证实２２个克隆插入了ＦＰＶ２８２Ｅ４ＤＮＡ的ＢａｍＨⅠ片段，２２个阳性克隆提取的质粒经琼脂糖凝胶电泳，选取具有代表性的大小不同的６个质粒ｐＵＡ、ｐＵＢ、ｐＵＣ、ｐＵＤ、ｐＵＥ、ｐＵＦ。６个质粒插入的片段Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ分别为７．３ｋｂ、４．９ｋｂ、４．２ｋｂ、３．６ｋｂ、３．２ｋｂ、３．０ｋｂ。分别以ＣｌａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｏｃＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ、ＳｍａⅠ、ＸｈｏⅠ进行单酶切，又经适当组合的双酶切。实验结果表明．在各片段存在的单酶切位点为Ａ：ＥＣＯＲⅠ、ＳａｃⅠ、ＸｈｏⅠ位点；Ｂ：ＥｃｏＲⅠ、ＸｈｏⅠ、ＨｉｎｄⅢ位点；Ｃ：ＣｌａⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ位点；Ｄ：ＳａｌⅠ、ＰｓｔⅠ位点；Ｅ：ＥｃｏＲＶ位点；Ｆ：ＥｃｏＲⅤ位点。以上结果为随机筛选ＦＰＶ基因组非必需区奠定了基础。
- 顾万钧王淑敏金宁一周复春殷震
- 关键词：克隆酶切图谱鸡病鸡痘病毒基因组
- 珠江三角洲地区鸭肝炎病原分离及其致病性和理化特性测定被引量：9
- 2001年
- 对珠江三角洲地区鸭肝炎发病雏鸭群进行病原分离、致病性试验及理化特性测定。结果共分离到 9株野毒 ,初步研究结果表明该 9株野毒具备Ⅰ型鸭肝炎病毒 (DHV Ⅰ )的基本特征 ,但其毒力具有不均一性。对 7日龄雏鸭的致病力 ,其中 3株LD50 分别为 10 -4 .36/0 .3mL、10 -4 .17/0 .3mL和 10 -4 .0 8/0 .3mL ;另外 3株LD50 分别为 10 -2 .4 8/0 .3mL、10 -2 .39/0 .3mL和 10 -2 .19/0 .3mL ;其余 3株对 7日龄雏鸭无致病性 ,但 2株对 1日龄的雏鸭却有一定的致病性 ,1株无致病性。该研究结果为分析本地区鸭肝炎疫情变化提供了依据。
- 陈建红张济培司兴奎顾万钧
- 关键词：变异株理化特性病毒性肝炎
- 珠江三角洲及其附近地区鸭肝炎流行动态调查被引量：18
- 2000年
- 调查了珠江三角洲地区近 2 0个县、市鸭肝炎 (DH)的流行情况、临床表现、病理变化和免疫防制现状。从本调查的结果可见 ,该地区DH多发区的雏鸭以 7～ 2 1日龄发病最多 ,最早的 2～ 3日龄 ,最迟的在樱桃谷鸭及其改良品种可见于3 5日龄 ,在番鸭可见于 60～ 70日龄 ,个别番鸭在 2 0 0日龄还有零星发病。 3～ 14日龄发病的雏鸭死亡率在 60 %～ 95 % ,15～ 3 5日龄发病的死亡率在 15 %～ 40 % ,3 5～ 70日龄发病的死亡率在 5 %～ 15 % ,更大日龄发病的死亡率在 5 %以下。根据防治效果 ,许多用标准DHV Ⅰ型弱毒疫苗免疫的鸭群 ,或在发病初期注射标准DHV Ⅰ型超免疫卵黄抗体的鸭群 ,其疫情还不能控制 ,往往需在发病初期用本地病鸭分离的DHV作疫苗 ,进而制备超免疫卵黄抗体及时治疗 ,才能将鸭群的死亡率控制在 2 %～ 8%。提示该地区原来流行的DHV Ⅰ型野毒株有可能发生抗原毒力变异或已传入DHV Ⅱ型或DHV Ⅲ型。
- 陈建红张济培司兴奎顾万钧
- 关键词：鸭肝炎珠江三角洲
- 一种高效通用的平端亚克隆方法被引量：5
- 1995年
- 一种高效通用的平端亚克隆方法毛春生，金宁一，顾万钧（解放军农牧大学研究所病毒室，长春１３００６２）关键词平端亚克隆亚克隆是分子生物学和基因工程研究中常用技术之一。在理论上，任何一对平末端ＤＮＡ片段都可经Ｔ４连接酶催化连接。这给不同ＤＮＡ分子之间的连接...
- 毛春生金宁一顾万钧
- 关键词：克隆基因工程
- 产酸生物防腐细菌的分离与生长条件研究被引量：8
- 1992年
- 本文应用不同的培养方法,分离、筛选出3种产酸细菌:植物乳杆菌、乳酸片球菌和屎链球菌。由于其各自生长繁殖所需的pH值和对氧的需求以及耐酸程度不同,通过协同作用,则可作为生物防腐产酸细菌的菌种。
- 顾万钧何昭阳王淑敏肖振铎王洪图
- 关键词：植物乳杆菌乳酸片球菌防腐剂
- 囊尾蚴病猪治愈前后胴体氨基酸分析
- 1992年
- 囊尾蚴病猪肌肉中寄生了数量不等的囊尾蚴虫体,经药物治疗后,治愈的胴体营养成分是否能够恢复正常,尚未见有报道。我们曾对经治疗达到鲜销猪的胴体进行了一些研究,对肉眼观察已经恢复正常的胴体,经病理组织学研究证明囊虫体所占据的空间位置已被肌细胞填充,经过一定的理化学分析证明胴体的蛋白质、脂肪等含量与健康猪体没有明显差异。但其氨基酸的含量是否受到影响,治愈前后与健康猪胴体氨基酸相比较有无差异,笔者就此问题对囊尾蚴病猪、治愈猪胴体和健康猪胴体的氨基酸含量进行了对比试验,现报告如下。(一)材料与方法1.试验动物:第1组(未治组):经改良酶标判定为强阳性的囊尾蚴病猪3头,宰后来集不同部位肌肉备用。第2组(治愈组):改良酶标诊断为强阳性的囊虫病猪3头。
- 韩宇陈义陈晓平胡耀辉顾万钧曹志楠
- 关键词：囊尾蚴病胴体氨基酸
- 狂犬病病毒糖蛋白基因在原核细胞中的表达被引量：5
- 1996年
- 将狂犬病病毒糖蛋白（ＲＶｇｐ）基因ＢｇｌⅡ片段（１６７５ｂｐ）分别正向插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－１７ｂ和ｐＥＴ－１７ｂ２（用ＳａｃⅠ－ＮｄｅⅠ缺失掉ｐＥＴ－１７ｂ６０ｂｐ含起始密码子ＡＴＧ小片段）的ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＥＴ－１７ｂＲＶｇｐ和ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ。将其分别转化表达受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）和Ｅ，ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ．ＩＰＴＧ诱导表达，菌体经超声波裂解处理后ＳＤＳ－ｐＡＧＥ，染色，在分子量约６００００处可见重组质粒表达的较宽的蛋白带，以抗ＲＶｇｐＭｃＡｂ进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，表明该表达蛋白为ＲＶｇｐ。通过扫描显示，表达的ＲＶｇｐ占菌体总蛋白的１０％～１４％，其中ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ在Ｅ。ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中的表达量最高。
- 秦翠丽金宁一佟明华刘楠郭志儒顾万钧毛春生李吉平殷震
- 关键词：狂犬病病毒大肠杆菌
- FPV282E4株BamHI7．3kb片段的亚克隆被引量：1
- 1996年
- 选用ＦＰＶ２８２Ｅ４株ＢａｍＨＩ７．３ｋｂ含非必需区片段，经ＸｂａⅠ酶切，将Ａ、Ｂ、Ｃ３个片段亚克隆于ＫＳ（—）质粒中，同时使Ｄ片段自身环化，获得ＫＳＦａ、ＫＳＦｂ、ＫＳＦｃ、ｐＵＣＦｄ４个重组克隆，经酶切鉴定证明亚克隆正确。为以ＦＰＶ基团组非必需区的ＢａｍＨＩ７．
- 司兴奎顾万钧金宁一殷震
- 关键词：亚克隆鸡病鸡痘病毒病毒载体
- 猪囊尾蚴病特异诊断方法研究 Ⅱ.ABC-ELISA法
- 1990年
- 对囊尾蚴寄生较少、体液抗体量甚微的病猪,其它方法不容易检测出来,应用ABC-ELISA法,即亲和素-生物素复合物(Aridin Biotin Compiex)酶标法,借助其放大作用,大大提高了灵敏度。经试验测定,其灵敏度高于ELISA法的9～14倍,并且可将EL-ISA法判定的疑似猪得到分化,从而提高了符合率。
- 韩宇胡耀辉顾万钧陈晓平黄欣骆一凡
- 关键词：猪囊尾蚴病ABC-ELISA法
