龚炎长
- 作品数:121 被引量:375H指数:11
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省科技攻关计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 用正交设计优化M13mp18RFDNA转染大肠杆菌TG_1的条件被引量:1
- 1997年
- 采用正交设计(L9(34))对影响M13mp18转染其宿主大肠杆菌TG1的3个因素:热激温度、时间和DNA量各设3个水平进行优化。直观分析表明:热激温度是主要的,其次是DNA量,最后是热激时间。直观分析确定的较优转染条件为:热激温度44℃、时间120s、DNA量600pg。验证转染试验表明:在该条件下M13mp18对TG1的转染效率较高。
- 龚炎长李奎彭中镇师守坤赵书红
- 关键词:畜牧转染正交设计
- 鸭MHCⅡα基因的表达纯化与抗体制备被引量:1
- 2009年
- 根据NCBI上已发表的序列自行设计引物,通过RT-PCR从北京鸭脾脏的总RNA中扩增得到鸭MHCⅡα基因,将其克隆至pMD18-T,经酶切分析及序列测定鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pET-28a。转化大肠杆菌BL21中诱导表达。电洗脱纯化蛋白,用于免疫昆明小鼠制备多克隆抗体。结果表明:克隆了鸭MHCⅡα基因,大小为633 bp,经核苷酸测序与已登录的基因序列同源性为99%;成功构建了原核表达载体,融合蛋白得到了高效表达且纯化后纯度可达90%,制备的鼠抗鸭MHCⅡα多克隆抗体经酶联免疫吸附试验(ELISA)与免疫印迹法(Western-blot)证实了抗体的效价高、特异性强,研究结果为研究鸭MHCⅡ分子奠定了基础。
- 张舒婕邓干臻龚炎长杨庆磊胡福利杨桓彭秀丽
- 关键词:克隆原核表达多克隆抗体
- 与母鸡储精能力期间受精率相关的SNP分子标记
- 本发明提供了一种与母鸡储精能力期间受精率相关的SNP分子标记及其应用,通过全基因组关联分析(GWAS)和限制性内切酶长度多态性(PCR‑RFLP)技术方法,首次在母鸡基因组13号染色体上筛选到6个与母鸡储精能力期间受精率...
- 李世军南九红彭秀丽刘华珍牟春燕赛义德.阿里.阿自木龚炎长俸艳萍盛哲雅朱桂玉莫长欢周鑫周慧敏
- 鸡受精持续时间性状相关的SNP分子标记及其应用
- 本发明提供了一种鸡受精持续时间性状相关的SNP分子标记及其应用,是运用关联分析的方法对TGFB3基因的进行了多态研究和关联分析,并首次在鸡TGFB3基因的第一内含子找到鸡受精持续时间性状相关的SNP分子标记,该SNP分子...
- 李世军辜澜涛孙成浩许东伟陈鹏杨刘斌龚炎长
- 文献传递
- 肉鸭经济性状的主基因指数分析被引量:1
- 1996年
- 肉鸭经济性状的主基因指数分析龚炎长,罗清尧,师守坤(中国农业大学动物科技学院北京100094)前言主效基因(Majorgene)是指对数量性状(经济性状)有较大影响的单个基因(相对于微效基因),但这只是一个较为模糊的概述,较为深刻的理解是Morton...
- 龚炎长罗清尧师守坤
- 关键词:肉用鸭经济性状
- 一种体外培养鸡小黄卵泡的方法
- 本发明公开了一种体外培养鸡小黄卵泡的方法。涉及家禽卵泡体外培养技术领域。包括将筛选后的小黄卵泡转移到PET细胞培养小室上层,并加入预热好的生长培养基,得培养物;将培养物转移到38.5℃,5%CO2的环境下培养。本发明采用...
- 龚炎长 程漫漫 郭妍 管振越 梅子 周昊博
- 逆转录病毒介导的鸡FOXL2在DF-1细胞中的超表达
- 本文通过对鸡的试验研究,PCR扩增得到918bp产物,测序结果经BLAST分析与NCBI上鸡FOXL2基因序列一致,将已获得的FOXL2序列连接到已连有报告基因GFP的pSLAX13载体上,再将FOXL2-GFP片段连接...
- 王静龚萍李世军俸艳萍彭秀丽龚炎长
- 关键词:FOXL2超表达逆转录病毒
- 鸡快慢羽分子鉴定方法
- 本发明属于动物育种技术领域,具体涉及一种应用双重PCR进行鸡快羽和慢羽鉴定的方法。其步骤包括:1)利用在鸡Z染色体上找到的K基因位点相关序列,根据快慢羽等位基因的结构设计两对引物;2)提取已知快慢羽的鸡血样DNA,进行引...
- 龚炎长彭秀丽李世军俸艳萍陈忠
- 文献传递
- 与母鸡储精能力期间受精率相关的SNP分子标记
- 本发明提供了一种与母鸡储精能力期间受精率相关的SNP分子标记及其应用,通过全基因组关联分析(GWAS)和限制性内切酶长度多态性(PCR‑RFLP)技术方法,首次在母鸡基因组13号染色体上筛选到6个与母鸡储精能力期间受精率...
- 李世军南九红赛义德.阿里.阿自木彭秀丽龚炎长俸艳萍盛哲雅朱桂玉莫长欢周鑫周慧敏
- 文献传递
- 禽肉瘤白血病病毒重组载体的包装及病毒滴度的测定
- 2014年
- 将重组逆转录病毒融合蛋白表达载体RCASBP-GFP-SMARCE1包装为病毒颗粒,并测定其病毒滴度。利用脂质体转染法在DF-1细胞系中转染重组质粒,收集上清液,超速离心浓缩病毒,用GFP标记法测定病毒滴度。结果显示,转染后3-4 d可见少许GFP阳性细胞的出现,6-7 d后所有细胞均有GFP的表达,11 d左右细胞达到超汇合状态,开始收集上清液;GFP标记法测定超速离心后的病毒滴度为5×10^10IU/mL。结果表明,成功制备了高滴度的重组逆转录病毒颗粒,为下一步在胚胎中进行相关基因的功能研究奠定了基础。
- 龚萍杨宇杨永平叶胜强王丽霞邓兵喻婷钱运国龚炎长
- 关键词:逆转录病毒载体绿色荧光蛋白病毒滴度