刘美辰
- 作品数：23 被引量：39H指数：4
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- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 不同生长年限人参中8种酶活力比较被引量：1
- 2012年
- 目的:通过对4、5、6、7年生人参中的8种酶活力进行比较,为人参的生长发育研究奠定基础。方法:采用中性缓冲液提取粗酶液,应用分光光度法对4个不同生长年限的人参中苹果酸脱氢酶(MDH),乳酸脱氢酶(LDH),乙醇脱氢酶(ADH),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH),超氧化物歧化酶(SOD),葡萄糖磷酸异构酶(GPI),谷丙转氨酶(GPT)和延胡索酸酶(Fumarase)8种酶活力进行比较。结果:除SOD和GPI外,其他6种酶活力均是6年生人参样品最高,4年生样品活力最低。结论:这8种酶的活力可以作为不同生长年限人参生长发育研究的理论依据。
- 李芸彤赵雨王思明刘海龙刘美辰
- 关键词：人参不同生长年限
- 人参生长发育过程中茎内5种酶活性的初步研究被引量：1
- 2011年
- 以五年生人参茎为供试材料,分别于人参展叶期、开花期、结果期、果后参根生长期、枯萎期采集人参茎样品,采用中性缓冲液制备粗酶液,应用分光光度法测定硝酸还原酶(NR)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷丙转氨酶(GPT)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、延胡索酸酶(FUM)的活力。结果表明:人参生长发育过程中,茎内NR和FUM均在展叶期和开花期出现活力高峰,SOD、GPT、GPI的活力在结果期较高。
- 张惠赵雨王思明刘美辰李晓华
- 关键词：硝酸还原酶超氧化物歧化酶谷丙转氨酶
- 不同生长时期人参叶中多酚氧化酶等几种氧化还原酶活力变化研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究人参生长季的不同时期叶中几种氧化还原酶的活性变化。方法:以五年生人参叶为供试材料,采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液。应用紫外分光光度法分别测定过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活力。结果:在人参生长季,叶中POD、CAT和APX活力变化相似,分别在展叶期、结果期和果后参根生长期出现活力高峰。PPO仅在展叶期和结果期出现活力峰值,且活力整体呈下降趋势。结论:人参叶中4种氧化还原酶的活力变化和叶片的生长、果实的形成及根的生长密切相关。
- 王涵赵雨刘海龙刘美辰李晓华
- 关键词：人参氧化还原酶
- 不同生长时期人参中水溶性蛋白含量比较被引量：4
- 2016年
- 目的:针对不同生长时期人参中水溶性蛋白的含量进行比较。方法:以5年生人参为供试材料,应用Bradford蛋白质定量试剂盒测定水溶性蛋白含量,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法得到人参水溶性蛋白的电泳胶片,并通过凝胶成像分析软件和Origin 7.5软件生成指纹图谱,导出重要技术参数,分析比较不同生长时期人参中水溶性蛋白的分布及含量差异。结果:不同生长时期的人参样品均显示12条水溶性蛋白谱带,且在人参果后参根生长中期直至枯萎期,水溶性蛋白含量达到最高。结论:人参水溶性蛋白的含量在不同生长时期存在较大差异,与人参生长的形态建成密切相关。
- 刘锡梅于江波张惠王思明刘诗超刘美辰潘智勇
- 关键词：人参不同生长时期水溶性蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 人参Cu/Zn SOD原核可溶性表达条件的优化被引量：4
- 2018年
- 目的在大肠杆菌中高效表达可溶性人参SOD,纯化后检测其活性。方法人参SOD cDNA插入到原核表达载体pET30α中,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达。分别对诱导时间、诱导温度、IPTG浓度以及离子浓度进行条件优化。对表达产物进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和考马斯亮蓝染色检测。检测上清中蛋白的抗氧化活性。结果双酶切结果显示质粒构建成功,经过条件优化,表达的SOD蛋白主要存在于破碎菌体的上清中,表达量约占菌体上清总蛋白的50%,上清酶活达到363.9 U/mg。结论成功在大肠杆菌中高效表达了可溶性人参SOD蛋白,且具有较高的酶活性,为其工业化生产和应用奠定了基础。
- 高云鹏赵雨王思明刘美辰王佳雯
- 关键词：人参CU/ZNSOD可溶性表达原核
- 人参叶生长发育过程中几种氧化还原酶活力比较
- 2012年
- 目的:对五年生人参叶生长发育过程中苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase MDH),乳酸脱氢酶(Lactate de-hydrogenase LDH),乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase ADH),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate Dehydro-genase G6PDH),α-磷酸甘油脱氢酶(α-Glycerophosphate dehydrogenaseα-GPD)5种氧化还原酶的活力进行比较,了解人参叶生长情况。方法:分别于展叶期、开花期、绿果期、红果期、枯萎期采取人参叶样品。采用中性缓冲液提取粗酶液,应用分光光度法测定MDH、LDH、ADH、G6PDH、α-GPD的活力。结果:在人参叶生长发育过程中,MDH、ADH和LDH活力在展叶期明显高于其他时期;LDH、G6PDH在展叶期和结果期末期活力最高;α-GPD在结果期出现活力峰值。结论:通过测量MDH、LDH、ADH、G6PDH、α-GPD的活力变化可判断人参生长情况。
- 杨菲赵雨王思明刘美辰陈雨
- 关键词：人参氧化还原酶
- 3-酮基嘌呤还原酶(TSC10)基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达
- 2018年
- TSC10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子。设计了一种从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法:(1)利用构建含有TSC10基因的毕赤酵母GS115表达载体p PIC3.5K-TSC10;(2)电转化法将该表达质粒转化到GS115感受态细胞中;(3)用G418筛选以及PCR鉴定;(4)使用qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测。结果经过G418筛选以及PCR鉴定后确定获得了包含TSC10基因的毕赤酵母转化子,经过qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测后发现TSC10基因在20个阳性菌株中均可以稳定、高效表达。成功构建了3-酮基嘌呤还原酶高表达的毕赤酵母菌株,并为后续获得高收率神经酰胺奠定了基础。
- 郑丽娜刘美辰王思明白雪媛赵雨赵大庆王佳雯
- 关键词：毕赤酵母基因表达
- 人参多糖对氧化应激损伤肝细胞的保护作用机制研究被引量：11
- 2020年
- 目的:以氧化应激损伤模型,通过对人参中物质基础的筛选,研究其对氧化应激造成的肝细胞损伤的保护作用及其可能的作用机制的初步探讨。方法:采用浓度为25μmol/L的过氧化氢溶液建立肝细胞损伤模型,对人参中总蛋白、总多糖、总皂苷的保护作用进行筛选。在此基础上,采用流式细胞术检测其凋亡程度、线粒体膜电位的改变,活性氧的含量变化。并采用ELISA法测肝糖原,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)及ATP酶等指标的变化情况。结果:经过氧化氢诱导后的肝细胞,细胞活力极显著降低(P<0.01),通过对比人参中活性成分,发现人参多糖的保护作用较强,且呈现浓度依赖性;与模型组比较,人参多糖高剂量组大鼠肝细胞中MDA含量非常显著降低(P<0.001);中、高剂量组大鼠肝细胞中SOD含量显著升高(P<0.05);低剂量组大鼠肝细胞中G6P含量显著升高(P<0.05),中、高剂量组中G6P含量极显著升高(P<0.01);中剂量组大鼠肝细胞中PEPCK的含量显著升高(P<0.05),高剂量组中PEPCK的含量极显著升高(P<0.01);低、中剂量组大鼠肝细胞中ATP酶含量极显著升高(P<0.01);中、高剂量组大鼠肝细胞中肝糖原含量显著升高(P<0.05)。结论:人参多糖通过提高肝细胞中ATP酶的活力,升高线粒体膜电位来恢复肝细胞线粒体的功能,通过恢复G6P与PEPCK的含量来恢复肝脏糖异生的功能,同时通过升高SOD,降低MDA来减弱氧化应激带来的损伤,为后续研究氧化应激造成肝损伤提供一定的基础。
- 杨松王隶书刘美辰陈艳艳白雪媛王思明
- 关键词：人参多糖氧化应激肝细胞糖异生
- 山药总蛋白对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的保护作用及机制研究
- 2024年
- 探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机分为对照组、模型组、山药总蛋白低剂量组(0.5 mg/mL)以及山药总蛋白高剂量组(1 mg/mL),评估山药总蛋白对HG处理的HUVECs的细胞活力、细胞形态及血管生成能力的影响;检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活力;以及培养基上清液中一氧化氮(Nitric oxide,NO)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平;测定B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(Cleaved caspase-1)和IL-1β蛋白的表达水平。结果显示,山药总蛋白能显著提高HG处理后的HUVECs的细胞活力(P<0.01),改善细胞凋亡形态,并显著升高SOD和CAT的活力(P<0.05或P<0.01)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2/Bax)的比值、血管形成能力、NO分泌量。此外,山药总蛋白还显著降低了HUVECs的ROS、MDA、8-OHdG、IL-1β和IL-6的水平(P<0.05或P<0.01)及炎症相关蛋白(Txnip、NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β)的表达水平(P<0.05或P<0.01),并且上述指标的变化均呈现明显的浓度依赖性。本研究结果表明,山药总蛋白可能通过抑制Txnip/NLRP3信号通路从而保护HUVECs拮抗HG诱导的氧化应激,恢复HUVECs内的氧化平衡,进一步减轻细胞的炎症反应。
- 姜蕾蕾冯佳宝刘颖金辰蓉刘美辰王思明赵大庆于士婷
- 关键词：人脐静脉内皮细胞氧化应激
- 人参叶生长过程中硝酸还原酶等5种酶的活力比较
- 2012年
- 目的:通过对人参生长发育阶段叶片中硝酸还原酶(Nitrae reductase NR),超氧化物歧化酶(Superoxide dis-mutase SOD),谷丙转氨酶(Glutamic-pyruvic transaminase GPT),葡萄糖磷酸异构酶(Glucose Phosphate Isomerase GPI),延胡索酸酶(Fumarase)5种酶活力的测定,作为对人参长势优劣的评价指标。方法:分别于展叶期、开花期、绿果期、红果期、枯萎期采取人参叶样品。采用中性缓冲液提取总蛋白,应用分光光度法测定NR、SOD、GPT、GPI、Fumarase的活力。结果:在人参叶片生长发育过程中,NR活力只在展叶期表现较高的活力;SOD、GPI分别在展叶期和结果期出现活力峰值;GPT在展叶期、结果期、果熟期均出现活力峰值;Fumarase活力从展叶期开始活力缓慢下降,在枯萎期稍有回升。结论:展叶期和结果期为人参叶片生长较旺盛时期。
- 王思明赵雨陈雨刘美辰李晓华连树林
- 关键词：人参硝酸还原酶超氧化物歧化酶谷丙转氨酶
