刘萍
- 作品数：14 被引量：8H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种具有协同作用的治疗t(11;17)急性早幼粒细胞白血病的组合药物及其应用
- 本发明涉及一种具有协同作用的治疗t(11;17)急性早幼粒细胞白血病的组合药物，所述的组合药物由ATRA和8-CPT-cAMP组成。本发明还提供一种组合药物在制备治疗t(11;17)急性早幼粒细胞白血病药物中的应用。本发...
- 陈赛娟陈竺任志宏焦波刘萍施静艺
- 活化型c-Src对整合素αvβ3相关肿瘤行为的影响
- 2013年
- 目的:探讨活化型c-Src对整合素αvβ3相关肿瘤行为的影响及其分子机制,为寻找治疗肿瘤的分子靶点提供思路。方法:通过定点突变的方法构建活化型c-Src真核表达载体,应用脂质体法转染至表达有整合素αvβ3的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,即CHO-αvβ3细胞中建立稳定细胞株。通过流式细胞术、蛋白印迹法检测细胞中目的蛋白的表达,检测稳定细胞株在固相化αvβ3配体玻连蛋白(Vn)上的黏附、伸展功能,利用人工重组基底膜侵袭小室,观察细胞株的迁移能力,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞中整合素β3酪氨酸磷酸化的水平。结果:流式细胞术和蛋白印迹法检测结果均证实,CHO-αvβ3中成功表达活化型c-Src。活化型c-Src对CHO-αvβ3细胞在固相化Vn上的黏附、伸展能力无明显影响,但增强了细胞迁移能力及整合素β3的磷酸化水平。结论:活化型c-Src参与αvβ3相关肿瘤行为的调节,可能与增强整合素β3磷酸化水平相关,为进一步深入了解相关机制奠定基础。
- 刘萍周玉兰黄建松崔雄鹰施小凤阮铮奚晓东
- 关键词：整合素ΑVΒ3迁移磷酸化
- Wiskott-Aldrich综合征合并克罗恩病一例并文献复习
- 2022年
- 目的 :分析1例克罗恩病合并Wiskott-Aldrich综合征(Wiskott-Aldrich syndrome,WAS)患儿的临床、结肠镜表现及其基因特征,为临床诊断提供参考。方法:回顾性分析1例克罗恩病合并WAS患儿的临床表现和生化指标、结肠镜检查、基因检测结果以及其治疗、随访情况,并在PubMed、中国知网、万方数据库中检索相关文献,综合分析。结果:患儿为6岁男童,表现为反复腹痛、便血1个月及肛周脓肿半个月,并从婴儿期出现血小板计数减少。实验室检查提示患儿存在中度贫血(血红蛋白70 g/L),血小板(77×109/L)降低,红细胞沉降率(71 mm/h)升高,粪钙卫蛋白(大于1 800μg/g)升高;电子结肠镜检查提示结肠多发溃疡,肠镜活检病理提示末端回肠及全结肠黏膜慢性活动性炎,部分伴局灶微脓肿和隐窝脓肿。该患儿被诊断为克罗恩病。基因检测显示其WAS基因外显子8上剪接位点出现半合子突变(c.777+3_777+6del GAGT),根据美国医学遗传与基因组学学会指南,该突变为可能致病性突变,故确诊为克罗恩病合并WAS。文献复习共检索到9篇炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)合并WAS基因突变病例的文献,共16例患者,均为幼年起病(1 d~14.9岁),其中10例伴有血小板减少。治疗方法包括药物、手术及骨髓移植等,获得随访的7例患者中有3例死亡。结论:对于儿童IBD患者,尤其是极早发型儿童IBD患者,应考虑单基因突变致病的可能性,如男性IBD患儿伴有自幼出现的血小板减少时,应检测WAS基因。
- 刘萍肖园王歆琼陆亭伟赵雪松杨媛艳
- 关键词：克罗恩病WISKOTT-ALDRICH综合征原发性免疫缺陷血小板减少
- Setd^(2−/−)急性髓系白血病小鼠模型中白血病起始细胞的转录和化疗抵抗异质性
- 2022年
- 背景与目的白血病起始细胞(leukemia-initiating cell,LIC)的异质性是急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)治疗的主要障碍。越来越多的证据表明,AML中同一患者体内经常共存多种具不同致病性的LIC。然而,这些共存的LIC在药物反应性等功能方面是否存在异质性尚不明确。因此,本研究旨在阐明LIC的内在异质性以帮助预测白血病的行为以开发更有效的治疗手段。方法将原代Setd2^(-/-)-AML发病鼠的全脾细胞移植入C57BL/6受体小鼠中,建立疾病的可移植模型。采用流式细胞术对白血病小鼠进行免疫表型分析,并利用全基因组测序技术检测诱导白血病发生的二次打击事件。另外,通过连续移植实验评判Setd2^(-/-)-AML细胞的自我更新能力,进行有限稀释实验确定不同细胞亚群中的LIC频率。群体细胞和单细胞RNA测序技术被用于分析LIC的转录异质性。同时,通过小分子抑制剂筛选以及体内药物实验揭示了不同LICs亚群在药物反应方面的差异性。结果本研究中,我们观察到一只年老Setd^(2−/−)小鼠出现了AML表型,并伴有Nras^(G12S)和Braf^(K520E)共突变。进一步研究发现,此小鼠体内共存2种不同的LIC,分别富集于c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1^(−)和c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1^(+)亚群。体内移植实验揭示,这2种LIC存在分化差异。此外,转录组分析显示c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1^(+)亚群富集了阿霉素抗性相关的转录信号。后续实验证实,AML标准化疗方案阿霉素联用阿糖胞苷确实可以特异性杀伤c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1^(−)细胞,但几乎不影响c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1^(+)细胞的存活。进一步的研究显示,c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1+亚群RAS下游信号通路的激活水平高于c-Kit^(+)B220^(+)Mac-1^(−)亚群,DA联合RAS通路抑制剂可同时有效杀伤这两个亚群,进而显著减缓Setd2^(-/-)-AML小鼠的疾病进展。结论本研究在Setd^(2−/−)-AML小鼠模型中鉴定到2个LIC富集群,同时揭示�
- 宋佳纯杜龙廷刘萍王福慧张波谢银银鲁静金怡周雁吕纲张建明陈赛娟陈竺孙晓建张元亮黄秋花
- 关键词：药物反应性
- 实时定量PCR检测骨髓移植转基因动物模型移植嵌合率
- ＜正＞目的:用带有突变整合素β3基因和GFP基因的逆转录病毒MSCV MigR1感染小鼠造血干细胞并移植到野生型小鼠体内,建立血小板整合素β3转基因小鼠模型,从而在体内研究整合素β3对血小板功能的调控作用。造血干细胞移植...
- 施小凤黄建松周玉兰崔雄鹰刘萍陶岚岚奚晓东
- 文献传递
- BCR-ABL与泛素E3连接酶c-CBL的相互作用在慢性髓系白血病靶向治疗中的作用及相关机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的:通过对BCR-ABL与泛素E3连接酶c-CBL的相互作用结构域的筛查,明确砷剂治疗慢性髓系白血病(CML)的结构基础。方法:根据BCR-ABL与c-CBL的结构信息,对二者的结合界面进行结构模拟与分析,基于此构建BCR-ABL的不同突变体[(△SH2(Src同源结构域2)、△TyrKC(酪氨酸激酶催化结构域)和△SH2/TyrKC(S/H))以及c-CBL的突变体△RF(环指结构域),转染293T及HeLa细胞,应用免疫共沉淀(Co-IP)]及免疫荧光(IF)共定位的方法筛查BCR-ABL与c-CBL的相互作用结构域。结果:Co-IP发现BCR-ABL的TyrKC结构域主要参与了与c-CBL的相互作用,SH2结构域也发挥一定的作用,但作用弱于TyrKC结构域;当两个结构域同时截短后,BCR-ABL与c-CBL几乎不发生相互作用;同时c-CBL的RF结构域在一定程度上影响了与BCR-ABL的相互作用。IF的结果与Co-IP相符,证明了结构模拟的准确性。结论:BCR-ABL的TyrKC和SH2结构域主要参与了与c-CBL的相互作用,而c-CBL的RF结构域参与了与BCR-ABL的相互作用。c-CBL与BCR-ABL的相互作用对BCR-ABL的稳定性发挥调控作用,对于深入理解砷剂靶向治疗CML分子机制提供了结构基础。
- 毛建华黄秋花刘萍罗成奚晓东
- 关键词：BCR-ABLC-CBL慢性髓系白血病砷剂靶向治疗
- 中药复方制剂砷靛参及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明涉及一种中药复方制剂砷靛参及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。其中该中药复方制剂中的活性组分四硫化四砷、靛玉红和丹参酮IIA的重量比为1～10∶1∶1。本发明的中药复方制剂砷靛参可以在制备抗肿瘤的药物中应用。药...
- 陈竺陈赛娟王兰周光飚刘舒畅刘萍
- 造血干细胞移植建立血小板整合素β3胞内段截短体转基因小鼠模型
- 2013年
- 本研究通过逆转录病毒感染整合素β3缺陷小鼠(β3-/-)骨髓造血干细胞再进行骨髓移植建立β3及其胞内段不同截短体的转基因小鼠模型,为进一步研究整合素β3胞内段在血小板双向信号转导途径中的作用提供基础。将整合素β3野生型、β3-Δ759(缺失R760GT762氨基酸片段)和β3-Δ754(缺失T755NITYRGT762氨基酸片段)的cDNA分别克隆至带有GFP编码基因的MSCV MigR1逆转录病毒载体质粒中,用质粒转染BOSC23包装细胞株包装出带有β3全长及不同突变体的逆转录病毒,再感染β3-/-供体小鼠骨髓细胞,尾静脉注射移植入经致死剂量辐照的野生型C57BL/6小鼠体内,移植后6-8周流式细胞术检测GFP和β3的表达率以评估转基因效率。结果表明,成功建立了空载(Vector)、β3野生型和截短突变β3-Δ759、β3-Δ754等4种小鼠模型,血小板转基因成功的比率(即GFP阳性率)为18%-66%,转基因血小板β3表达可达到β3+/-水平。结论:利用逆转录病毒感染的造血干细胞移植建立血小板转基因小鼠模型是一种高通量快速有效的建立转基因小鼠模型的方法,这为进一步研究整合素β3胞内不同区段对血小板整合素信号转导途径的影响及体内对血小板进行基因操作和基因治疗奠定了基础。
- 崔雄鹰施小凤黄建松刘萍陶岚岚周玉兰阮铮奚晓东
- 关键词：逆转录病毒转基因小鼠模型造血干细胞移植
- 整合素β3的RGT序列在肿瘤进展中的作用
- ＜正＞目的:整合素αvβ3广泛表达于各种正常细胞和肿瘤细胞,而其中的β3亚单位胞浆段与Src激酶的相互作用与肿瘤细胞的增殖、浸润迁移、凋亡等重要的病理过程相关。本研究目的是明确在与整合素αv复合的模式下,整合素β3亚单位...
- 周玉兰黄建松施小凤刘萍奚晓东
- 文献传递
- 整合素β3胞浆段尾部序列对αvβ3介导的细胞行为的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨在与整合素αv复合的模式下,整合素β3亚基胞浆段序列在肿瘤细胞的黏附、伸展和迁移中所起的作用,从而为寻找干扰肿瘤进展的分子靶点提供思路。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型,建立共表达整合素αv与整合素β3全长及其T758、Y759位截短体的稳定细胞株,检测各稳定细胞株在固相化的αvβ3配体玻璃黏连蛋白上的黏附、伸展功能,运用transwell观察各细胞株的迁移能力。结果:稳定表达整合素αvβ3全长的CHO细胞具有在固相化玻璃黏连蛋白上的黏附、伸展和迁移能力。相较于CHO-αvβ3全长细胞株,CHO-αvβ3△758截短体细胞株的黏附、伸展以及迁移能力均明显受损;而CHO-αvβ3△759截短体细胞株仍保留着黏附能力,但伸展能力减弱,并且迁移能力受损明显。结论:整合素β3胞浆尾端YRGT和RGT氨基酸序列在αvβ3介导的细胞黏附和迁移方面发挥不同的作用,提示β3亚基胞内段参与调控肿瘤细胞的重要细胞行为,是潜在的肿瘤治疗靶点。
- 周玉兰黄建松刘萍施小凤崔雄鹰阮铮奚晓东
- 关键词：整合素ΑVΒ3
