刘钊
- 作品数：15 被引量：13H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程经济管理更多>>
- 水貂阿留申病毒(ADV)ELISA检测技术平台的构建、应用和辽宁地区ADV的系统进化分析
- 贾赟米丰泉王伟利李艳武蔡晓萍贾哲刘钊张雪孙晓飞
- 立项的目的和意义:水貂毛皮与狐皮、羔羊皮并称国际裘皮贸易的三大支柱产品,所以水貂作为毛皮经济动物在中国的养殖规模也越来越大,在东北三省中,仅以大连口岸为例,2004-2007年初就进口种用水貂36000只,年进口2000...
- 关键词：
- 关键词：水貂养殖阿留申病毒
- 水泡性口炎病毒N蛋白原核表达及免疫原性分析
- 2017年
- 本研究旨在克隆和表达水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)特异性抗原N蛋白,进而纯化并分析其免疫原性。根据GenBank中已发表的VSV基因组N基因序列,分别合成VSV两种不同血清型的N基因,经序列对比分析后,设计合成1对特异性引物,PCR扩增获得约1 300bp的N基因片段,将目的片段亚克隆至pColdⅠ原核表达载体中,经IPTG诱导表达后,采用Ni-NTA树脂亲和层析法纯化重组N蛋白。SDS-PAGE分析表明,N基因在大肠杆菌中得到表达,蛋白大小约为50ku;Western blotting检测结果表明,该重组蛋白与VSV多克隆抗体发生特异性反应。本试验成功构建了VSV-IND和VSV-NJ的原核表达载体,实现了N蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,纯化后的重组蛋白具有良好的免疫原性。
- 张雪娄丽陈阳周晓丽刘钊贾赟孙颖杰
- 关键词：N蛋白原核表达
- 非洲猪瘟病毒(ASFV)快速检测技术的研究及试剂盒的研制
- 肇慧君胡强张雪宋立奇殷国建刘钊
- 该课题通过对多株非洲猪瘟标准毒株和分离毒株的p54基因同源序列进行比对分析,设计检测该病毒的基于SYBR GREENⅠ技术的特异引物和基于TaqMan-MGB探针的实时定量PCR的通用引物和探针序列.采用实时定量PCR技...
- 关键词：
- 关键词：试剂盒
- 蓝舌病及其检测方法研究进展
- 2014年
- 本文从引起蓝舌病的病毒病原学、流行病学、发病机制及免疫防制、病理变化、诊断、预防措施等方面,对蓝舌病进行全面综述,重点总结了此病的诊断方法,为更深入研究此病奠定基础。
- 王贞钧孙颖杰贾赟张小飞王全凯刘钊张雪栾慎顺
- 关键词：蓝舌病毒病原学流行病学防御措施
- 水貂阿留申病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：4
- 2016年
- 为建立一种快速、敏感检测水貂阿留申病毒(AMDV)的方法,本研究根据AMDV的VP2基因保守区设计特异性引物和MGB探针,并优化检测反应条件,建立了AMDV的TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL^1.0×10~8拷贝/μL内具有良好的线性关系,相关系数(R^2)为0.998。该方法仅对AMDV的靶基因扩增呈阳性,而对猪细小病毒、犬细小病毒、水貂肠炎细小病毒等相关病毒检测结果均为阴性,特异性良好。该方法对AMDV检测的灵敏度为10拷贝/μL,为普通PCR灵敏度的100倍;组内和组间重复性试验表明该方法的组内和组间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。应用建立方法和普通PCR方法分别对40份疑似临床组织病料样品进行检测,该方法检出率比普通PCR高约7.5%。本研究结果表明建立的AMDV TaqMan-MGB荧光定量PCR方法灵敏、快速、特异性强、重复性好,适用于对AMDV的快速定量检测。
- 贾赟刘钊宋大贺李艳伍张岩岩栾慎顺王全凯孙颖杰
- 关键词：水貂阿留申病毒TAQMAN-MGB探针荧光定量PCR
- 全文增补中
- 澳大利亚输华活牛检疫情况分析被引量：5
- 2016年
- 近年来我国从澳大利亚引进种牛数量急剧增多。本文对近3年来部分口岸澳大利亚输华活牛检疫情况进行整理和分析,以期为今后两国间动物贸易提供参考。按照中澳协定对2012-2014年间19 611份澳大利亚输华活牛样品进行了6种传染病的检测并检出105份阳性样品,总阳性率为0.54%。其中蓝舌病阳性样品10份(0.05%)、副结核病13份(0.07%)、赤羽病57份(0.29%)、病毒性腹泻25份(0.13%),未检出牛地方流行性白血病和鹿流行性出血热阳性样品。2012—2014年,蓝舌病和赤羽病阳性率先增高后下降,牛病毒性腹泻阳性率呈持续增长趋势。不同品种牛对各种疾病的易感性有一定差异,娟姗牛的赤羽病和病毒性腹泻阳性率最高,荷斯坦牛和安格斯牛疾病阳性率均保持在较低水平,而海福特牛中未检出阳性,只在荷斯坦牛中检出蓝舌病。夏季入境牛的疾病阳性率显著高于其他季节,秋季均未检出阳性牛。国家质检总局组织实施境外预检工作制度对于筛选对口农场及疾病控制取得明显效果。分析表明,应继续加强对蓝舌病、赤羽病、副结核病和牛病毒性腹泻的检疫力度,同时要考虑季节和牛品种因素,以保障种牛引进安全。
- 魏菁姜伟王琦孙德刚刘钊黄小丹李广兴
- 牙鲆弹状病毒研究进展被引量：1
- 2015年
- 牙鲆弹状病毒(Hirame rhabdovirus,HIRRV)可以引起牙鲆、香鱼等肌肉组织器官及内脏出血,造血器官坏死,给鱼类养殖带来巨大经济损失。HIRRV具有囊膜,属于弹状病毒科粒外弹状病毒属。病毒基因组为单股负链的RNA,长约11 000 bp,主要包含5个基因,可编码核蛋白(nucleoperotein,N)、磷蛋白(phosphoperotein,P)、基质蛋白(matrix preotein,M)、糖蛋白(glycoperotein,G)、依赖RNA的RNA酶(RNA polymerase protein,L)和非结构蛋白(nonvirion perotein,NV)。本文就目前国内外关于HIRRV的流行特点、生物学特征、分类地位、基因组及其蛋白产物的特征以及检测方法等方面进行了较为全面的概述,旨在为该病的预防、控制以及致病机理方面的研究提供依据。
- 张小飞孙颖杰贾赟林长军李华王贞钧刘钊张雪栾慎顺
- 关键词：基因组编码蛋白
- 水貂阿留申病毒地方强毒株ADV-LN的分离鉴定
- 2016年
- 本研究采用对流免疫电泳方法(CIEP)检测辽宁水貂养殖场疑似水貂阿留申病毒(aleutian mink disease virus,ADV)水貂血清抗体,采集抗体阳性水貂的肝脏、脾脏、肾脏和肠系膜淋巴结组织,电镜观察存在细小病毒样颗粒。组织液研磨无菌处理后,接种CRFK细胞,盲传6代,取病毒细胞分离液用PCR方法检测,呈ADV阳性。将病毒分离液纯化后接种健康水貂,隔离观察,接种后3d即出现食欲减退,贫血,被毛无光泽,后期出现拒食、狂饮、死亡,个别水貂出现神经症状,表现抽搐、痉挛、步态蹒跚、共济失调,证明分离获得的病毒为ADV强毒株,命名为ADV-LN株。
- 贾赟李艳伍孙铭英张雪张岩岩宋大贺刘钊王全凯孙颖杰
- 关键词：水貂阿留申病毒
- 水泡性口炎病毒N蛋白原核表达及免疫原性分析
- 为获得水泡性口炎病毒特异性抗原N蛋白,用于血清中抗水泡性口炎病毒抗体检测方法的建立,根据GenBank中已发表的VSV基因组N基因序列,分别合成VSV两种不同血清型的N基因,经序列对比分析后,设计合成1对特异性引物,PC...
- 张雪娄丽陈阳刘钊
- 关键词：水泡性口炎N蛋白原核表达
- 荧光定量聚合酶链式反应检测乳及乳制品中结核分枝杆菌方法的建立与评价
- 2015年
- 建立一种快速检测乳及乳制品中结核分枝杆菌的荧光定量聚合酶链式反应法。根据结核分枝杆菌保守序列设计特异引物,建立结核分枝杆菌的实时荧光定量聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)检测法。对该方法的灵敏度、特异度和重复性进行考察。结果表明:建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线线性关系良好,得到标准曲线方程为y=-3.29x+38.60(R2=0.998 0);敏感性高,可达1×102 copies/μL;抗干扰能力强,仅结核分枝杆菌出现特异性扩增曲线;重复性良好,分别用不同质量浓度的标准质粒进行组内和组间平行实验,批内和批间的变异系数均小于1%。因此,实时荧光定量PCR法能准确快速检测乳及乳制品中结核分枝杆菌。
- 张晨曦刘钊潘伟贾贇吴斌
- 关键词：乳及乳制品结核病结核分枝杆菌
