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吴威: 作品数：18 被引量：41H指数：3; 供职机构：吉林大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项广州市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学经济管理政治法律更多>>

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贾第虫核糖核酸酶PRNA转录本3′端序列及其存在形式被引量：1: 2013年; 目的确定贾第虫滋养体内核糖核酸酶P(RNase P)RNA 3′端序列及其存在形式。方法提取贾第虫滋养体总RNA,大肠埃希菌(E.coli)Poly(A)聚合酶加polyA尾后,进行反转录,扩增出加polyA尾后的cDNA,经PCR及测序进行鉴定,确定其3′端序列。应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测RNase P-GLsR15共转录体与RNase PRNA成熟体的总表达量,两者之差即为RNase P RNA成熟体的表达量,确定贾第虫RNase P RNA的存在形式。结果 RNase P RNA 3′cDNA大小约300 nt,3′端序列与GLsR15 3′端序列一致;RNase P-GLsR15共转录体和RNaseP RNA成熟体的总表达量与RNase P-GLsR15共转录体表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论已成功克隆了RNase P RNA 3′端序列,证实RNase P RNA和GlsR15的共转录体即为RNase P RNA成熟体的存在形式。; 高珺珊吴威宫鹏涛李建华杨举李赫张国才张西臣; 关键词：核糖核酸酶

蜡样芽孢杆菌ATCC14579毒力基因plcR缺失株的构建及其一般特性被引量：6: 2010年; 蜡样芽孢杆菌是土壤中的优势菌,具有作为益生菌的潜在能力,同时它也是条件致病菌,能引起食物中毒等。蜡样芽孢杆菌的多种毒力因子受到多效性调控子(pleiotropic regulator,plcR)的调控,在其条件致病性作用中起着重要作用。真养产碱杆菌JMP34(Alcaligenes eutrophus)质粒上的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)单加氧酶(tfdA)基因可以降解2,4-D。本研究利用同源重组技术使tfdA基因置换掉蜡样芽孢杆菌的plcR基因,构建了蜡样芽孢杆菌ATCC14579突变株B.cereus△plcRΩtf-dA,并对其毒性、一般生理生化特性进行分析。研究结果表明,突变株B.cereus△plcRΩtfdA的毒性显著减弱;生理生化实验结果显示突变株与野生株并没有明显区别,且突变株并没有表现出tfdA酶活性。所有的结果表明plcR控制着蜡样芽孢杆菌ATCC14579的致病性,同时剔除plcR并不破坏其酶系统。本研究为今后构建蜡样芽孢杆菌工程菌提供了新的思路和依据。; 吴威郑经成闫广谋王思洮盛相鹏胡丹张阳阳韩文瑜; 关键词：蜡样芽孢杆菌同源重组

Annexin V/PI双标记检测高电压脉冲电场诱导K562细胞凋亡的研究被引量：1: 2008年; 目的:探讨高电压脉冲电场诱导红白血病细胞K562和淋巴细胞凋亡的最佳参数。方法:调节电场强度和脉冲频率分别作用K562细胞和淋巴细胞后,用Annexin V/PIKit标记凋亡细胞,流式细胞术检测凋亡细胞的百分比;设计正交试验确定电场诱导K562细胞凋亡的最优参数组合;电场作用K562细胞与淋巴细胞(1∶1)混合悬液进行选择性诱导凋亡;MTT法检测电场作用后的K562细胞与淋巴细胞的增殖。结果:K562细胞的凋亡率随着脉冲频率的增加而升高,当脉冲频率为30Hz时,凋亡率高达79.13%;K562细胞和淋巴细胞的凋亡率均随着电场强度的增加而升高,在电场强度达到30kV/cm时,二者的凋亡率分别达82.40%、57.08%。诱导K562细胞凋亡的最优参数组合为脉冲宽度1μs、电场场强25kV/cm、脉冲个数为12个。K562细胞与淋巴细胞混合液在电场作用下发生凋亡的细胞百分比具有显著性差异(P<0.05);K562细胞与淋巴细胞经相同条件的电场作用后,二者生存率比较,差异显著(P<0.05)。结论:利用高电压脉冲电场使癌细胞选择性失活是可行的。; 段秀梅宋艳秋谭岩方艳秋许淑芬车媛媛吴威殷涌光; 关键词：高电压脉冲电场 K562细胞淋巴细胞凋亡

曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子的原核表达及多克隆抗体的制备: 2011年; 目的原核表达曼氏血吸虫虫卵白细胞介素-4诱导因子(IL-4-inducing principle of schistosoma eggs,IPSE),并制备小鼠多克隆抗体。方法人工合成IPSE基因,采用PCR技术克隆其成熟体开放阅读框,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-IPSE。转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析后,应用组氨酸标签蛋白纯化柱纯化包涵体蛋白,免疫BALB/c鼠,制备多克隆抗体。结果克隆的IPSE基因与GenBank中登录的基因序列同源性为100%;重组表达质粒pET-28a-IPSE经PCR及双酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为16 000,以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%,可与鼠抗His单抗特异性结合;用纯化的包涵体蛋白免疫BALB/c小鼠后,获得的特异性抗血清效价为2×10-4,该血清可与IPSE蛋白发生特异性反应。结论已原核表达、纯化了曼氏血吸虫IPSE蛋白,并制备了高滴度的特异鼠抗血清,为进一步从日本血吸虫中筛选相似蛋白及研究其功能奠定了基础。; 赵娜李世杰徐晓芳吴威范大为宫鹏涛李建华张西臣; 关键词：原核细胞包涵体多克隆抗体

高电压脉冲电场选择性致使K562癌细胞凋亡的研究: 本文是吉林大学创新基金课题“血液中肿瘤癌细胞高电压脉冲电场选择性失活的研究”的部分内容,主要研究高电压脉冲电场选择性致使 CML 系红白病变细胞 K562 和人体外周血淋巴细胞的凋亡问题。高电压脉冲电场液体灭菌是近几年...; 吴威; 关键词：高电压脉冲电场 K562细胞淋巴细胞选择性凋亡

高电压脉冲电场对K562细胞凋亡的影响: 2008年; 背景与目的:探讨高电压脉冲电场诱导K562细胞凋亡的情况,寻求血液肿瘤治疗的新途径。材料与方法:采用高电压脉冲电场装置处理K562细胞,利用双标记流式细胞术(Annexin V-FITC/PI法)测定细胞凋亡率,通过透射电子显微镜观察K562细胞的超微结构。结果:经过高电压脉冲电场处理后的K562细胞,胞内出现大量空泡及裂隙,核内染色质向核周边聚集形成凋亡小体,呈典型细胞凋亡形态学改变;K562癌细胞的凋亡比例随着脉冲个数和电场强度的增加而增加。结论:高电压脉冲电场可以诱导K562细胞凋亡,该结果可为治疗癌症提供一个新的途径。; 殷涌光于庆宇吴威; 关键词：高电压脉冲电场 K562细胞凋亡

一种多自由度操纵的无人潜水器: 一种多自由度操纵的无人潜水器属于水下无人潜水器技术领域，目的在于解决现有技术存在的转向半径大、反向推进能力不足以及存在水下监测死角的问题。本发明包括：主壳体；设置在主壳体上的操作机械手；设置在主壳体上的监测单元，监测单元...; 刘军国婧倩陈延礼崔军红吴威罗松松; 文献传递

利用地高辛标记EDC交联桥连法检测miRNAs方法: 本发明公开一种利用地高辛标记EDC交联桥连法检测miRNAs的方法，应用地高辛标记系统，灵敏度比传统地高辛标记Northernblots检测系统至少高50倍，与放射性同位素标记Northernblots检测系统相当；对环...; 张西臣李建华吴威宫鹏涛杨举张楠李赫杨正涛张国才; 文献传递

犬贾第虫巢式PCR检测方法的建立被引量：2: 2013年; 目的建立犬贾第虫巢式PCR检测方法并进行验证。方法根据犬贾第虫Rnase P基因序列设计两对特异性引物,通过优化Mg2+浓度和退火温度建立巢式PCR检测方法,并进行灵敏度和特异性验证。用优化的巢式PCR方法检测60份犬临床粪样。结果建立的巢式PCR方法的最佳Mg2+浓度为3.0 mmol/L;最佳退火温度为53℃;对犬贾第虫的最低检测量可达1个虫体DNA/ml;对柔嫩艾美尔球虫、伊氏锥虫、弓形虫、阴道毛滴虫、犬心丝虫等寄生虫基因组DNA的扩增结果均为阴性;60份犬临床粪样贾第虫的检出率为61.7%。结论建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于犬贾第虫感染的临床检测。; 李棕松高珺珊翟涛吴威宫鹏涛李建华杨举李赫张国才张西臣; 关键词：贾第虫巢式聚合酶链反应

创意产业与区域经济增长互动发展研究: 进入21世纪，创意产业从概念提出、政策制定再到实践探索，在全球范围内掀起一股不可抵挡的经济浪潮，对包括欧美、亚太地区，特别是新兴经济体的经济发展产生了极大的影响。在经济全球化和信息技术飞速发展以及知识经济和服务经济逐步占...; 吴威; 关键词：创意产业区域经济增长

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