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周泽扬: 作品数：317 被引量：1,338H指数：22; 供职机构：西南大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>

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柞蚕微孢子虫部分孢壁蛋白的分离鉴定及孢壁蛋白8的序列分析被引量：3: 2010年; 研究柞蚕微孢子虫的孢壁蛋白组成和结构特点,有助于解明柞蚕微孢子虫在侵染过程中与蚕体细胞的互作机制。分别采用煮沸法和Laemmli法分离提取柞蚕微孢子虫总蛋白和孢壁蛋白,回收30kD左右的蛋白条带进行液质联用离子阱电喷雾质谱分析,获得的短肽序列经Mascot在线检索工具进行蛋白同源序列比对,共鉴定出27种具有功能注释的蛋白,有3种注释为孢壁蛋白。其中获得了与家蚕微孢子虫孢壁蛋白8(NbSWP8)高度同源的柞蚕微孢子虫孢壁蛋白8(NaSWP8)的基因全长序列。序列分析表明NaSWP8与NbSWP8的氨基酸序列相似性达到90%,且均具有特征性的肝素结合基序,二者的编码基因核苷酸序列的非同义替换率和同义替换率比值(dN/dS)明显小于1,表明孢壁蛋白8基因在2种蚕类微孢子虫中受到纯化选择压力的作用,基因的功能相对稳定。; 张玺许金山张小燕周泽扬; 关键词：柞蚕微孢子虫孢壁蛋白质谱鉴定

筛选家蚕分子标记的有效方法—SADF法被引量：4: 1999年; 从家蚕品种Ｃ１０８和大造后部丝腺提取的基因组ＤＮＡ用Ｐｓｔ Ⅰ酶解后与自行设计的人工接头相连，并用与人工接头序列相匹配的选择性引物进行选择性ＰＣＲ扩增（ＳｅｌｅｃｔｉｖｅＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测显示，用ＳＡＤＦ法在两品种中能检测到稳定的ＤＮＡ多态性片段，表明此方法可用于分子标记的筛选。经研究发现：当ＰＣＲ反应体系中Ｍｇ２＋为１５ｍｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰｓ为２００μｍｏｌ／Ｌ，引物为１μｍｏｌ／Ｌ时可得到较好的结果；在热循环过程中，以５６ ℃退火为宜；扩增反应对模板ＤＮＡ质的要求远胜于量。; 何宁佳鲁成周泽扬向仲怀; 关键词：家蚕分子标记

家蚕微孢子虫类枯草杆菌蛋白酶Nbslp2的保守性及转录活性分析被引量：1: 2017年; 为研究家蚕微孢子虫类枯草杆菌蛋白酶Nbslp2的保守性及转录活性,采用生物信息学相关软件对微孢子虫类枯草杆菌蛋白酶slp2基因共线性、多重序列及系统进化进行比对分析,并通过Western blot分析Nbslp2在家蚕微孢子虫、柞蚕微孢子虫及纳卡变形微孢子虫中的表达特征,以验证其保守性;进一步以感染家蚕微孢子虫不同天数的家蚕中肠组织为材料,利用RT-PCR检测Nbslp2的转录活性。共线性、多重序列比对及系统进化分析发现,Nbslp2在微孢子虫基因组中的位置较保守,Western blot结果显示Nbslp2抗体在柞蚕微孢子虫总蛋白中杂交出2条带,而在纳卡变形微孢子虫没有杂交条带,说明Nbslp2相对保守,并且可将Nbslp2作为区分柞蚕微孢子虫和纳卡变形微孢子虫的靶标;RT-PCR结果显示Nbslp2在感染家蚕微孢子虫后72 h检测到转录活性,进一步推测Nbslp2可能在家蚕微孢子虫感染家蚕早期发挥作用,为分子水平深入研究Nbslp2的功能奠定理论基础。; 马强刘方燕党晓群孙厚良李国利熊书潘国庆周泽扬; 关键词：家蚕微孢子虫保守性转录活性共线性系统进化

RFLP技术构建家蚕现行品种DNA指纹图谱的研究被引量：33: 2000年; 利用RFLP技术 ,结合应用两种酶切探针组合 ,构建了家蚕 9个现行品种的标准DNA指纹图谱 ,并论证了该方法在家蚕几种现行品种相互区别鉴定方面的可行性。; 程道军周泽扬鲁成向仲怀曾华明漆定梅杨彪; 关键词：RFLP 家蚕指纹图谱

植酸酶产生菌黑曲霉N14的诱变选育及其基因分析被引量：6: 2005年; 以植酸酶产生菌黑曲霉03214为出发菌株,经紫外线和亚硝基胍诱变,获得了产酶活性较出发菌株提高了22.3%,达422IU/ml发酵液的突变菌株黑曲霉N14,其最适pH值为2.5,最适温度为50℃。通过对黑曲霉N14植酸酶phyA基因进行PCR扩增,获得了一条长约1.5kb的特异性产物。以pMD18 T为载体,构建了含有目的基因片段的重组质粒。DNA序列测定表明,目的基因片段含有植酸酶phyA基因的完整序列(GenBankAccession:AY426977),phyA基因全长1506bp,其中包含一段长102bp的内含子,编码467个氨基酸,有10个潜在的糖基化位点,5'端有一编码19个氨基酸的信号肽序列。实验结果为植酸酶基因工程菌的构建奠定了基础。; 彭远义马丽苹李春明刘生峰周泽扬; 关键词：植酸酶诱变 PHYA基因

家蚕微孢子虫蓖麻毒蛋白B链基因RBL463-4的克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2010年; 基于家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)基因组中发现的蓖麻毒素B链(ricin B chain)序列数据设计引物,提取感染Nb第8天的家蚕幼虫中肠组织总RNA,利用RT-PCR方法扩增出RBL463-4基因,并将其克隆进毕赤酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组酵母表达载体pPIC-R4。重组质粒pPIC-R4经SacⅠ线性化后,电击导入毕赤酵母X33中,利用博莱霉素(zeocin)筛选获得重组酵母X33/RBL463-4。以2%甲醇诱导表达后,经SDS-PAGE、Western blot检测表达产物,结果出现25kD和20kD2种蛋白,其中25kD蛋白与预测融合蛋白大小一致,表明获得了RBL463-4的融合蛋白。研究结果为进一步探究RBL463-4蛋白在家蚕微孢子虫侵染宿主过程中的功能作用奠定了基础。; 李能章潘国庆李田贾立丽邓远洪周泽扬; 关键词：家蚕微孢子虫毕赤酵母表达免疫印迹法

家蚕C-型凝集素11基因BmCTL11的克隆及表达分析: 2016年; 昆虫的C-型凝集素参与先天免疫系统中细胞间的相互作用,家蚕C-型凝集素11(C-type lectins,CTL11)基因BmCTL11是经家蚕微孢子虫(Nb)感染诱导后在蚕体内持续高量表达的基因。用生物信息学方法分析BmCTL11基因编码有307个氨基酸的多肽,预测分子质量34.51 kD,等电点4.69,含2个串联的典型C-型凝集素糖识别结构域,与烟草天蛾的IML-1蛋白进化距离最近。RT-PCR检测BmCTL11基因在家蚕幼虫时期的转录水平较高,并在多个组织有转录。将灭活的家蚕病原细菌、真菌、微孢子虫、病毒等注射家蚕5龄幼虫后的24 h内,qRT-PCR检测BmCTL11基因在幼虫脂肪体和中肠组织内的转录水平均发生上调,说明该基因能够被多种病原微生物诱导。以家蚕5龄第3天幼虫脂肪体c DNA为模板克隆了BmCTL11基因,连接到p ET-32a载体,诱导表达后将纯化的融合蛋白免疫昆明鼠制备出效价为1∶102 400的BmCTL11多克隆抗体。Western blot分析结果显示,BmCTL11蛋白可能以二聚体形式主要分布于家蚕脂肪体、血浆、中肠、表皮等组织中,推测BmCTL11在家蚕识别病原微生物并介导引发进一步的先天免疫反应过程中有重要的作用。; 季小存李春峰孙滨郑容李致宏陈洁龙梦娴李田潘国庆周泽扬; 关键词：家蚕基因克隆表达谱多克隆抗体

快速检测家蚕微孢子虫的引物对及其试剂盒和检测方法: 本发明涉及快速检测家蚕微孢子虫的引物对及其试剂盒和检测方法，其引物对的核苷酸序列如SEQ？ID？NO.7和SEQ？ID？NO.8所示，利用该引物对在上、下游引物分别加入不同的核酸分子标记物，标记引物的PCR产物能够直接用...; 潘国庆倪琪周泽扬孙滨宋跃

野桑蚕丝胶1基因Ser1A′及其上游调控序列的克隆和序列分析被引量：1: 2011年; 家蚕由野桑蚕驯化而来,而野桑蚕sericin1及其上游调控序列的相关研究较少。本研究以家蚕sericin1及其上游调控序列设计引物克隆野桑蚕sericin1及其上游调控序列,将克隆得到的野桑蚕Sericin 1序列翻译后用muscle软件与家蚕Sericin 1蛋白序列比对,结果表明预测的野桑蚕Sericin 1氨基酸序列与家蚕Sericin 1 A′(Ser1 A′)氨基酸序列相似性很高,达98%。野桑蚕丝胶1基因上游调控序列与家蚕一样也存在多态性,克隆得到了1061bp和636bp的两条序列,中间存在425bp的插入序列,与家蚕丝胶1基因上游调控序列相似性分别为98%和97%。; 黄科伍杰陈典刚张永红李春峰周泽扬; 关键词：野桑蚕家蚕

一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法: 本发明涉及一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法，具体步骤如下：(1)利用0.1M KOH水溶液处理家蚕微孢子虫孢子，离心，弃上清，加入TC100昆虫培养基悬起孢子沉淀，孵育，得到培养基悬起的孢子样品；(2)吸取步骤(1)...; 李田何强周泽扬; 文献传递

周泽扬

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