孙亚伟
- 作品数：66 被引量：94H指数：5
- 供职机构：河南科技学院动物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省高校科技创新团队支持计划河南省教育厅科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 鸡福氏志贺菌SHV-12型ESBLs基因的扩增、原核表达及酶特性研究被引量：1
- 2009年
- 对5株鸡福氏志贺菌产SHV-12型ESBLs基因进行重组表达并优化表达条件,观察了表达蛋白的底物水解特性和抑制剂的抑酶特性。结果表明:构建的重组质粒经EcoRⅠ和XholⅠ双酶切后,可切下目的条带。重组质粒转化BL21后所表达的重组蛋白有超广谱β-内酰胺酶活性。SHV-12原核表达的最佳条件是IPTG浓度为0.5 mmol/L、温度37℃、诱导时间5 h;SHV-12型ESBLs亲和力最强的底物是头孢噻呋钠,Km值为1.29μmol,较难水解的底物是头孢曲松钠,Km值为24.13μmol;它唑巴坦、舒巴坦对头孢曲松钠的抑酶保护率分别为21.01%、25.51%,对头孢噻呋钠的抑酶保护率分别为34.99%、35.49%。
- 孙亚伟胡功政陈红英刘建华苑丽邓立新袁业友
- 关键词：福氏志贺菌原核表达酶特性
- 猪流行性腹泻病毒jiaozuo1012/2019株的分离鉴定及遗传进化分析被引量：2
- 2020年
- 为确定2019年河南焦作某猪场哺乳仔猪发生腹泻的病因,本研究采用RT-PCR方法对该发病猪场送检的5份仔猪肠内容物样品进行仔猪腹泻相关病毒检测,对检测的猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性样品进行病毒分离,对分离的PEDV S基因和ORF3基因进行PCR扩增,并分析这两个基因与GenBank中的PEDV参考株相应基因的同源性及遗传进化分析。结果显示,送检的5份猪肠道内容物样品PEDV检测结果均为阳性,而猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)的检测结果均为阴性;将随机选取的1份PEDV阳性样品接种Vero细胞并经传代培养,对培养5代的病毒经PCR检测表明分离到一株PEDV,并将其命名为jiaozuo1012/2019株;基于S基因同源性分析结果显示,该分离株与河南分离的PEDV CH/HNLH/2015株同源性最高,为99.3%,与近期河南分离株的同源性为96.4%~99.0%,与经典PEDV CV777株的同源性较低为93.4%。分离株S基因编码的氨基酸在aa59~aa62位存在4个氨基酸(59QGVN62)的插入,在aa140和aa163~aa164分别存在1个和2个氨基酸的缺失(140N和163NI164);ORF3基因的同源性分析结果显示,分离的PEDV与江苏分离的PEDV JSCZ1601株的同源性最高,为99.7%,与近年来河南分离株的同源性为98.5%~99.6%,与经典株CV777的同源性较低为96.6%;S基因与ORF3基因的进化树结果显示,该分离株与目前国内流行株遗传关系最近。上述结果表明,本研究分离的PEDV具有近年来新流行PEDV株的序列特征,与经典PEDV株具有相对较远的遗传进化关系。本研究为进一步探究PEDV在河南地区的变异规律提供了参考依据。
- 王晓斐王青王玲彩杭柏林孙亚伟王磊胡建和徐彦召
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S基因ORF3基因
- 一种抗菌肽HJH-3及其应用
- 本发明公开了一种抗菌肽HJH-3及其应用。所述抗菌肽HJH-3的氨基酸序列为缬氨酸-天冬酰胺-脯氨酸-赖氨酸-亮氨酸-亮氨酸-丝氨酸-组氨酸-丝氨酸-亮氨酸-亮氨酸-缬氨酸-苏氨酸-亮氨酸-精氨酸-丝氨酸-组氨酸-亮氨酸...
- 胡建和徐彦召王青杭柏林孙亚伟张庆华
- 猪肺源致病性多重耐药大肠杆菌的分离鉴定和药敏分析被引量：1
- 2022年
- 河南省某养殖场83例仔猪出现厌食、呼吸困难等症状,并伴随不同程度的腹泻,死亡率约为4.5%。为确定该养殖场猪只感染的病原菌,本试验于无菌条件下对感染猪只肺脏进行病原菌分离、药敏试验和16S rRNA序列分析。结果显示,本试验分离的病原菌为革兰阴性短杆菌,在麦康凯鉴别培养基上菌落呈粉红色圆形,生化反应显示其可发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖和麦芽糖;16S rRNA序列分析显示,病原菌与致病性大肠杆菌同源性为99%;药敏试验显示,该菌对苯唑西林、头孢噻吩、头孢吡肟、链霉素等23种抗菌药均有较强耐药性。本试验结果为肺源多重耐药大肠杆菌的鉴定和临床用药提供了有价值的数据支持。
- 朱春玲刘丽刘少龙刘欣王恒赵雪芹赵娅娅刘双双夏小静张守平罗维玉徐彦召杭柏林孙亚伟胡建和王磊张学明
- 关键词：药敏试验
- 一种基于直接竞争酶联免疫法检测铬离子试剂盒及其应用
- 本发明提供了一种基于直接竞争酶联免疫法铬离子检测试剂盒，包括：包被有羊抗鼠IgG二抗的检测板，所述检测板真空密封包装；所述羊抗鼠IgG二抗的包被浓度为50～200μg/mL；质量浓度为20～50μg/mL的酶标Cr‑IT...
- 范国英姜金庆贺永惠孙亚伟柳东阳杨雪峰胡建和葛亚明齐永华丁菡
- 文献传递
- 鸡志贺氏菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的基因分型
- 【研究目的】对5株临床分离产ESBLs的鸡福氏志贺氏菌及1株头孢噻呋诱导产ESBLs的标准福氏志贺氏菌进行基因型鉴定,研究鸡福氏志贺氏菌ESBLs的分了进化机制。【方法】对标准福氏志贺氏菌用0.5MIC的头孢噻呋诱导,每...
- 胡功政孙亚伟陈红英司红彬苑丽邓立新莫娟李胜利
- 关键词：福氏志贺氏菌ESBLS基因型
- 文献传递
- 鸡福氏志贺氏菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的基因分型
- 本文利用临床分离产ESBLs的鸡福氏志贺氏菌5株及头孢噻呋诱导产ESBLs 的标准福氏志贺氏菌1株,分别用TEM、SHV、CTX-M三种通用引物进行PCR扩增、基因克隆及测序分析,确定鸡福氏志贺氏菌ESBLs的基因型和基...
- 孙亚伟陈红英司红彬胡功政苑丽邓立新莫娟李胜利
- 关键词：福氏志贺氏菌ESBLS基因分型
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门菌cpxR和acrB双基因缺失菌株的构建及其对抗菌药物敏感性分析被引量：7
- 2016年
- 为了探索cpxR基因对鼠伤寒沙门菌多重耐药性的调控机制,同时避免外排泵acrB的存在掩盖cpxR对其他外排泵或外膜蛋白的调控作用,利用基于Red同源重组系统的一步法失活染色体基因,用含有同源臂的线性打靶DNA片段替换目的基因,构建鼠伤寒沙门菌JS株的acrB基因缺失株JSΔacrB。然后利用噬菌体转导技术,以前期构建的cpxR缺失株JSΔcpxR∷kan为供体菌,本研究新构建的JSΔacrB为受体菌,在P22噬菌体的作用下构建双基因缺失菌株JSΔacrBΔcpxR∷kan,同时制备cpxR基因回补菌株JSΔacrBΔcpxR∷kan/pcpxR。最后用微量稀释法测定10种临床常用代表性抗菌药物对JS和各缺失株的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,成功构建鼠伤寒沙门菌的双基因缺失菌株JSΔacrBΔcpxR∷kan以及其cpxR基因互补菌株JSΔacrBΔcpxR/pcpxR。MIC结果显示,acrB基因缺失后,多西环素、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢曲松和头孢噻呋的MIC值分别降低32、4、4、16、32、4、2和128倍;双基因缺失后,多西环素、庆大霉素、阿米卡星和头孢噻呋的MIC值进一步降低2、8、2和2倍;而将cpxR基因回补之后,这4种抗菌药物的MIC值会升高4、16、2和4倍。结果表明,cpxR能调控鼠伤寒沙门菌对多西环素、庆大霉素、阿米卡星和头孢噻呋的敏感性。
- 黄慧刘保光孙亚伟马彩珲陈丽鹏苑丽潘玉善胡功政
- 关键词：鼠伤寒沙门菌ACRBMIC
- 对分课堂在兽医微生物学教学中的应用
- 2020年
- 本文从时间分配、讨论环节、作业布置3个方面阐述了对分课堂在兽医微生物学教学中的实践,介绍了对分课堂的优势,主要有改变教师授课计划和减轻教学负担、让学生主动参与课堂教学、使课堂的教与学充分结合、提高课堂教学效果等,简要分析了对分课堂存在的问题并提出解决措施,以期为兽医微生物学教学提供参考。
- 郑亚轩赵雪芹赵娅娅刘双双朱春玲刘少龙刘欣欣夏小静张守平徐严召孙亚伟胡建和刘红洋王磊
- 关键词：兽医微生物学教学实践
- 一种抗菌肽HJH-1及其应用
- 本发明涉及一种包含氨基酸序列赖氨酸-亮氨酸-亮氨酸-赖氨酸-组氨酸-赖氨酸-亮氨酸-亮氨酸-缬氨酸-苏氨酸-亮氨酸-丙氨酸的抗菌肽HJH-1，该抗菌肽含有12个氨基酸残基，分子量1376.81Da，等电点10.30。抗菌...
- 徐彦召王青胡建和杭柏林孙亚伟刘保国杨雪峰王秋霞
