孙继国 作品数:225 被引量:684 H指数:12 供职机构: 河北农业大学 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 河北省重大技术创新项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒含量方法的建立 被引量:3 2014年 采用胶体金为标记物制备了快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫层析试纸条,拟合检测曲线,用金标分析仪进行定量检测。应用实验室与田间的样品检测证实其有较好的敏感性和特异性。对Asia 1型FM—DV抗原定量检测可以在15 min内完成,灵敏度为0.78μg·mL^(-1),线性范围在0.78~7.84μg·mL^(-1);变异系数在0.2%~5%;回收率在91%~102%,证明定量检测、准确度高。结果表明,本研究建立的定量检测Asia 1型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析方法能简便、廉价、快速、灵敏、特异、准确地定量检测样品中的Asia 1型口蹄疫病毒。 朱玉婵 林密 孙燕燕 孙继国 蒋韬关键词:ASIA 胶体金 脑心肌炎病毒先导蛋白结构与功能研究进展 被引量:1 2019年 脑心肌炎病毒(EMCV)可感染人和多种动物,其基因组先导蛋白编码区是比较保守的区域之一,含有两种高度保守的功能域,即锌指基序和酸性结构域。研究表明,先导蛋白基因组具有一定的容纳外源基因片段的能力,同时先导蛋白与病毒复制、干扰素产生以及细胞凋亡等均有关系。论文综述了EMCV先导蛋白结构与功能的研究进展。 李睿文 王许航 李丽敏 李丽敏 宋勤叶 孙继国关键词:脑心肌炎病毒 凸隆病毒的研究进展 被引量:4 2017年 凸隆病毒(Torovirus)作为一种重要的人畜共患病毒,在世界范围内广泛分布,给人和动物带来了严重威胁。该病毒从属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae),以引起人和动物消化道、呼吸道疾病为主要特征。随着分子生物学技术的不断发展和各种相关研究的不断深入,人们对凸隆病毒的研究取得了新的进展。笔者概述了凸隆病毒的发现及分类、病原学、流行病学、病理变化、诊断技术和研究前景等,以为该病的深入研究提供相关的理论参考。 邹云婧 梁中银 崔元 陈萍 袁万哲 孙继国关键词:病原学 流行病学 猪流行性腹泻病毒HB-XL株S基因遗传变异分析 被引量:2 2017年 本研究从河北保定某猪场的粪便中分离到1株病毒,该病毒能在Vero细胞上增殖,且盲传5代后出现明显的细胞病变,经鉴定证实该分离毒株为猪流行性腹泻病毒(PEDV),并命名为HB-LX,应用DNAStar软件对HB-LX毒株的S基因进行遗传变异分析。结果表明,HB-LX与疫苗株CV777的同源性为92.4%,与野毒株MK、83P-5的同源性分别为92.2%、92.7%,与中国流行株同源性高达97%以上。HB-LX与我国CHCCC、GJL、PJ1407等和韩国的AS01、KPV1402等亲缘关系最近。 李雅楠 庞琳琳 李定刚 李睿文 孙继国 孙继国关键词:PEDV S基因 胞内劳森菌的纳米PCR检测方法的建立 被引量:7 2016年 为建立一种猪增生性肠炎(PPE)的快速诊断方法,本研究根据Gen Bank中已登录的胞内劳森菌(LI)基因组16S rDNA基因序列,设计1对引物,以疑似PPE的病料样品,通过PK-15细胞培养,分离到一株LI,建立了LI的纳米金PCR检测方法。结果表明该方法能够扩增得到与实验设计相符的202 bp(LI)的特异性片段;与大肠杆菌、沙门氏菌、流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒无交叉反应,特异性良好。与普通PCR法进行比较,该方法检测灵敏度比普通PCR高100倍。经临床检测,从50份病料样品中检出5份阳性样品,并且发现回肠粘膜和粪便中LI的检出率明显高于组织中LI的检出率。该方法可以用于LI的临床快速检测与流行病学调查。本研究为进一步研究LI的人工培养和实验室诊断PPE奠定了基础。 白云 郑英帅 左奕 孙继国关键词:猪增生性肠炎 石家庄市猪链球菌分离鉴定及快速诊断方法研究 2010年 从石家庄市地区各县市猪场送检的疑似病例中分离得到72株猪源链球菌,选择其中具有一定区域、特定致病类型的代表性菌株18株,进行了病原分离和分群鉴定,并与标准株进行了对比试验.初步证实本地区流行菌株仍以兰氏分群C群及D群居多,以C群链球菌为主占50%,但D群有上升趋势占33.3%,此外还出现1株G群占5.6%,另有2株未定群的猪链球菌,其分布无明显的地域性.为检测石家庄地区SS分离株的毒力因子,选取了猪链球菌8种主要毒力因子基因,设计并合成8对引物,用PCR方法进行检测.结果显示:已知21株SS2菌株中90.5%表现为cps2/gdh+/gapdh+/ef+/mrp+/sly+/fbps+/orf2+;送检的疑似SS2的病例中,仅有10%左右表现为cps2/gdh+/gapdh+/ef+/mrp+/sly+/fbps+/orf2+.可见,石家庄地区的猪链球菌与国内其他地区SS2分离株的基因型不同,表明石家庄目前SS2的主要流行菌株是具有部分毒力因子的弱毒菌株. 马冬雪 肖梦 朱子杰 孙继国 赵宝华关键词:猪链球菌 PCR 猪圆环病毒2型HB-MC1株全基因组序列测定与分析 被引量:1 2015年 参照发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对2014年从河北省满城县某发病猪场分离到的1株PCV2(命名为HB-MC1)的全基因组进行了序列测定。应用DNAStar序列分析软件,对所测序列与GenBank中登录的PCV2序列进行同源性比较,结果显示,HBMC1株的基因组全长为1 767nt,其ORF1序列与GenBank登录的一些具有代表性的PCV2参考序列同源性高达97.2%~99.9%,其ORF2同源性在89.9%~99.6%之间。进化树分析结果显示,该毒株为PCV2d亚型,毒株部分核苷酸位点显示其属于强毒力毒株。研究结果揭示了HB-MC1株基因组特征与基因亚型,丰富了PCV2的基因组信息数据。 左奕 袁万哲 孙继国关键词:猪圆环病毒2型 全基因组 猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF6基因的克隆及原核表达 被引量:4 2009年 从河北沧州分离到一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒,接种Marc-145细胞,经4代盲传,出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为HB-3(cz)株。根据GenBank公布的PRRSV JXA1株ORF6基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物(P1/P2),用RT-PCR方法扩增完整ORF6基因,将扩增产物连接到pGM-T载体并转化克隆菌,阳性重组质粒PGM-M进行序列测定与分析。后将克隆质粒PGM-M双酶切后连接原核表达载体pET-32a(+),在Rosseta-DE3中成功获得表达,经Western-blotting分析表明,表达蛋白与阳性血清发生特异性反应。 王娇 孙继国 陈赛娟 刘涛 王坤 赵泽坤关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 河北分离株 ORF6基因 原核表达 八种抗菌药物对绵羊肺炎霉形体的体外敏感性研究 被引量:4 2003年 测定了环丙沙星、单诺沙星、氧氟沙星、红霉素、泰乐菌素、枝原净、四环素、多西环素等 8种抗菌药物对绵羊肺炎霉形体Y98株的体外最小抑菌浓度 (MIC)以及四环素、多西环素分别与红霉素、泰乐菌素和枝原净的联合药敏作用。结果表明 ,环丙沙星、单诺沙星、氧氟沙星、红霉素、泰乐菌素、枝原净、四环素、多西环素对MOY98的MIC分别为 0 .0 2 6、0 .0 4 2、0 .0 73、0 .583、0 .1 67、0 .0 4 2、0 .2 92、0 .2 0 8μg mL。四环素与红霉素的联合药敏指数是 1 ,为相加作用 ;其他联合药敏指数是 0 .5 。 刘聚祥 林密 孙继国 乔健关键词:抗菌药物 绵羊 霉形体 体外敏感性 河北省部分羊场布鲁氏菌病血清流行病学调查 被引量:5 2020年 为了了解河北省羊布鲁氏菌病(简称“布病”)流行情况,2018年本项目组对河北省10个养羊场进行现场调查,收集了316份羊血清进行血清学检测。通过调查显示,10个养殖场均未接种过布病疫苗,其布病个体阳性率17.4%。其中,不同性别羊的感染率不同,135份公羊血清中有18份阳性,阳性率13.3%;181份母羊血清中有37份阳性,阳性率20.4%。不同阶段羊的感染率也不同,86份羔羊血清中有9份阳性,阳性率10.5%;111份育成羊血清中有16份阳性,阳性率14.4%;119份种羊血清中有30份阳性,阳性率25.2%。调查结果表明,河北省羊群中母羊的布病感染率略高于公羊,种羊感染率高于羔羊、育成羊。 李睿文 安琪 宋梦昭 赵兴华 张铁 陈福星 王建昌 张若曦 李丽敏 郭笑然 孙继国 孙继国 袁万哲关键词:布鲁氏菌病 血清流行病学 CELISA