崔晓华
- 作品数:7 被引量:19H指数:3
- 供职机构:吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金吉林省牧业管理局资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪圆环病毒2型吉林株ORF2基因克隆及序列分析
- 根据GenBank中发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成一对特异性引物,用PCR方法从接种经过鉴定的PCV2吉林株(JL01)PK-15细胞中,扩增出PCV2 JL01毒株的ORF2基因.将扩增片段...
- 冷雪崔晓华黄海龙胡桂学
- 关键词:猪圆环病毒2型ORF2基因基因克隆
- 文献传递
- 断奶仔猪多系统衰竭综合征间接ELISA方法的建立及应用研究
- 胡桂学姜海龙冷雪崔晓华高超于清祥胡哲刘岩王锐王政业周英周亚宽赵金红
- 该研究采用无PCV污染的PK-15细胞,从来自吉林某猪场具有PMWS典型临床症状和剖检特征的死亡仔猪体内分离到1株病毒,经电镜负染观察、间接免疫荧光试验和PCR技术鉴定为PCV_2,并命名为PCV_2-JL01株。设计P...
- 关键词:
- 关键词:克隆ORF2基因猪圆环病毒2型
- 猪圆环病毒检测技术研究进展被引量:4
- 2005年
- 猪圆环病毒是近年来新发现的畜禽病毒之一,疑为一种潜在人兽共患病病原,具有重要的经济意义。文章就其检测技术,如病毒分离、电镜观察、聚合酶链式反应(PCR)、多重PCR、多重套式PCR、定量竞争性PCR、PCR 限制性片段长度多态性分析(PCR RFLP)、免疫组织化学技术(IHC)、原位杂交技术(ISH)等的研究进展做一阐述。
- 胡哲冷雪崔晓华史纪新胡桂学
- 关键词:猪圆环病毒PCR免疫组织化学技术
- 猪圆环病毒2型吉林株的分离与鉴定及ORF2基因序列分析
- 本研究根据GenBank中已发表的猪圆环病毒(PorcineCircovirus,PCV)基因序列,设计一对PCV2特异性引物。利用PCR方法,对吉林省部分猪场的疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的9个自然病例的淋...
- 崔晓华
- 关键词:猪圆环病毒基因序列
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型吉林株的分离与鉴定
- 利用猪圆环病毒2型(PCV2)特异性引物,对吉林省某猪场发生的具有典型断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)症状病猪的淋巴结、脾脏组织进行PCR检测.将检测阳性的病料研磨、离心、过滤除菌,接种到无PCV污染的PK-15细胞...
- 崔晓华冷雪黄海龙胡桂学
- 关键词:猪圆环病毒2型病毒鉴定病毒纯化
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型吉林地方株ORF2基因的克隆、测序及其在原核细胞中的表达被引量:9
- 2007年
- 根据GenBank中发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成1对特异性引物,用PCR方法从接种PCV2吉林株(JL01)PK-15细胞中,扩增出PCV2毒株的ORF2基因。将扩增片段克隆于pMD18-T载体,进行序列测定。结果表明,PCV2 JL01毒株的ORF2基因核苷酸长度为702bp。将重组质粒用SalⅠ和XhoⅠ酶切后与同样处理的pET-32a载体连接,转化BL21细胞后,挑取阳性克隆。经PCR和酶切鉴定后,用IPTG诱导,细菌裂解液经SDS-PAGE和Western-blot分析,表明ORF2基因在大肠杆菌中得到了表达,并能被PCV2阳性血清所识别。
- 冷雪崔晓华黄海龙胡桂学
- 关键词:猪圆环病毒2型ORF2基因测序
- 猪圆环病毒2型吉林株的分离与鉴定被引量:6
- 2007年
- 利用猪圆环病毒2型(PCV2)特异性引物,对吉林省某猪场发生的具有典型断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)症状病猪的淋巴结、脾脏组织进行PCR检测。将检测阳性的病料研磨、高心、过滤除菌,接种到无PCV污染的PK-15细胞进行病毒分离。将PK-15细胞增殖所得的病毒纯化后,在电镜下观察到直径约为17 nm的圆形病毒样粒子。PCV2间接免疫荧光试验,可在细胞浆中观察到特异性荧光颗粒。PCV2特异性PCR检测细胞培养物,获得阳性结果。由此说明,分离出的病毒为猪圆环病毒2型。
- 崔晓华冷雪黄海龙胡桂学
- 关键词:猪圆环病毒2型PCR检测