徐书景
- 作品数：44 被引量：65H指数：4
- 供职机构：河北师范大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- 丙氨酸消旋酶的研究进展被引量：3
- 2011年
- 简要介绍了丙氨酸消旋酶的分类、结构特征和催化机制。
- 张彩凤徐书景李艳红薛张伟马宁赵宝华鞠建松
- 一种合成四氢嘧啶的三基因串联表达载体及应用
- 本发明公开了一种高效合成四氢嘧啶的三基因串联表达载体的构建及应用。根据同尾酶原理，将假坚强芽孢杆菌中L‑二氨基丁酸转氨酶、L‑二氨基丁酸乙酰转移酶和四氢嘧啶合成酶基因依次插入含相同或不同启动子的质粒pET‑22bNS上，...
- 徐书景鞠建松何广正罗素亚赵佳微吴志玮王伟宁赵宝华
- 文献传递
- 一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法
- 本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列比对结果，通过定点突变技术将原玻璃蝇节杆菌(<I>Arthrobacter</I><I>protophormiae</I>,DSM15035)中D-...
- 鞠建松徐书景赵宝华李辉欣冯利伟
- 文献传递
- 巨大芽孢杆菌WSH-002丙氨酸脱氢酶066晶体制备及X-射线衍射分析（英文）
- 2015年
- 丙氨酸脱氢酶可逆催化丙氨酸脱氨生成丙酮酸,在氨基酸和酮酸的合成及代谢中至关重要.本研究通过PCR从巨大芽孢杆菌WSH-002中克隆并构建了丙氨酸脱氢酶基因(aldBM066)的原核表达载体,经原核表达后,采用Ni-NTA亲和层析法和阴离子交换色谱法纯化获得蛋白AldBM066,在289 K下以座滴法进行晶体生长条件筛选和制备.通过对蛋白质结晶条件的筛选,最终在蛋白质浓度为15 mg/mL及含有0.1 mol/L乙酸钠(p H 5.0)和2.4 mol/L甲酸钠的缓冲液中获得了理想的蛋白质晶体,晶体大小约为210μm×180μm×150μm,X-射线衍射数据显示,该蛋白质晶体衍射分辨率为2.88,空间群为三方晶系,晶胞参数为a=b=118.71,c=150.51,α=β=90°,γ=120°,每个不对称单位中含有1个AldBM066单体,马修斯系数为2.623/Da,溶剂含量约为53.02%.衍射数据的成功收集为解析巨大芽孢杆菌WSH-002中丙氨酸脱氢酶的三维结构奠定了前期基础,将有助于阐明以单体存在的丙氨酸脱氢酶的催化机制.
- 胡平雄王青青关婉怡鞠建松董辉徐书景
- 关键词：丙氨酸脱氢酶X-射线衍射
- 一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法
- 本发明公开了一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，将假坚强芽孢杆菌(Bacilluspseudofirmus)的L-丙氨酸脱氢酶活性中心附近73位赖氨酸通过PCR定点突变为丙氨酸，...
- 鞠建松徐书景赵宝华何广正李兵杰
- 文献传递
- 热激后冰浴时间与复苏时间对化学转化法转化效率的影响(英文)被引量：2
- 2010年
- [目的]研究化学转化过程中热激后冰浴时间和复苏时间对转化效率的影响,确定简便快速的转化方法。[方法]采用2种缓冲溶液制备感受态,以热激后冰浴时间或复苏时间为变量,研究这2个因素与转化效率的关系。[结果]冰浴2min,复苏30或40min达到最佳转化效率;冰浴和复苏时间为0时仍能获得相当数量的转化子。[结论]热激后冰浴和复苏时间对转化效率有一定影响,但不是决定性因素。因此,在一般性转化试验中可以省略这2个步骤以节省时间。
- 郭姣洁薛永常薛张伟徐书景鞠建松
- 关键词：感受态细胞
- 改进重叠延伸PCR技术构建定点双突变被引量：6
- 2010年
- 目的:DNA片段中快速构建位点不同的定点双突变体。方法:借鉴DNA shuffling技术中DNA小片段延伸扩增获得全长DNA片段的工作原理,与常规基因定点突变技术相结合,改进重叠延伸PCR技术构建定点双突变。结果:对嗜酸热脂肪杆菌(Alicyclobacillus acidocaldarius)Tc-12-31的甘露聚糖酶基因AamanA中两个可能的活性位点E151和E231进行双点突变,先后经过无引物和有引物两步PCR,扩增获得全长DNA,测序结果表明得到预期的定点双突变体;酶活性检测和薄层层析结果表明双点突变体丧失了酶的活性。结论:改良的重叠PCR技术,能经济、简便、高效地获得双点定点突变体,在酶的催化机理的阐述、蛋白质结构改造等分子生物学领域中具有较高的应用价值。
- 徐书景张跃灵张妍赵宝华鞠建松马延和
- 关键词：重叠延伸PCR甘露聚糖酶
- 热激后冰浴时间与复苏时间对化学转化法转化效率的影响被引量：2
- 2011年
- [目的]研究化学转化过程中热激后冰浴时间和复苏时间对转化效率的影响,确定简便快速的转化方法。[方法]采用2种缓冲溶液制备感受态,以热激后冰浴时间或复苏时间为变量,研究这2个因素与转化效率的关系。[结果]冰浴2 min,复苏30或40 min达到最佳转化效率;冰浴和复苏时间为0 min时仍能获得相当数量的转化子。[结论]热激后冰浴和复苏时间对转化效率有一定影响,但不是决定性因素。因此,在一般性转化试验中可以省略这2个步骤以节省时间。
- 郭姣洁薛永常徐书景马书娜鞠建松
- 关键词：感受态细胞
- 表达ST1-LTB-α-β融合蛋白基因工程菌株的构建
- 赵宝华王金锋徐书景田莉瑛王永鑫宋杰
- 该课题采用分子生物学技术构建含有ST1-LTB-α-β融合基因的重组菌株，SDS-PAGE和Westernblot分析ST1-LTB-α-β融合蛋白的表达，对重组菌株进行甲醛灭活，免疫昆明小鼠后攻毒，分析该重组菌株的保护...
- 关键词：
- 关键词：分子生物学融合蛋白表达
- 通过结构域交换探究丙氨酸消旋酶C-端结构域功能
- 丙氨酸消旋酶具有催化L-丙氨酸和D-丙氨酸之间的相互转化作用，是细菌合成细胞壁肽聚糖层的关键酶之一。丙氨酸消旋酶广泛分布于原核生物中，而在真核生物中只有少量发现，因此基于丙氨酸消旋酶的分子机制寻找酶的抑制剂，正成为抗菌药...
- 韩卿卿何广正徐书景鞠建松
- 关键词：嵌合体
