徐华锋
- 作品数：18 被引量：108H指数：5
- 供职机构：黑龙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省博士后基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 舒必利对抑郁大鼠模型脑内酶的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:研究抑郁症模型大鼠脑内单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、γ-谷胺酰转移酶(γ-GT)的活性改变,探讨舒必利治疗抑郁症的作用机制。方法:本实验分为正常对照组、抑郁症模型组和舒必利治疗组3个实验组,每组10只Wistar雄性大鼠,除正常对照组外,其余两组均单笼饲养。从第14日起,抑郁症模型组和舒必利治疗组的大鼠按程序给予刺激,同时,抑郁症模型组的大鼠每日腹腔注射生理盐水1.0ml,舒必利治疗组的大鼠每日腹腔注射舒必利32.5mg/kg,在刺激的前、中、末期,分别对每只大鼠进行行为学测定和糖水消耗实验。刺激进行27d后,处死大鼠,冰上取脑,检测各实验组大鼠脑内MAO、GST、γ-GT的活性。结果:抑郁症模型组的MAO较正常对照组显著增高(P<0.05),舒必利治疗组与正常对照组间的差异无显著性(P>0.05);抑郁症模型组的γ-GT的活性较正常对照组和舒必利治疗组显著增高(P<0.01),正常对照组与舒必利治疗组间无显著差异(P>0.05);GST的活性在各组间均无显著差异。结论:舒必利治疗抑郁症模型大鼠可引起MAO、γ-GT的活性降低。
- 钟德泰王建醒徐华锋吴超全王军周莉徐文弟刘长久
- 关键词：舒必利抑郁单胺氧化酶谷胱甘肽硫转移酶
- 慢性应激大鼠抑郁模型的建立及其评价被引量：49
- 2006年
- 目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及模型的有效性。方法利用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为。结果大鼠抑郁模型在第27天建立成功。抑郁组大鼠敞箱试验得分、液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降。结论慢性轻度不可预见性应激可以成功建立大鼠抑郁模型。
- 王建醒周丽徐华锋王淑英徐文弟
- 关键词：抑郁症应激CUMS
- 重组人α降钙素基因相关肽的克隆与表达(英文)
- 2004年
- 通过PCR方法从人类基因组中扩增出编码hαCGRP的片段,将该片段定向克隆到pET-32a(+)载体上,构建pET-hαCGRP重组质粒。转化E.coli JM109菌株,利用酶切和测序方法筛选后,经IPTC诱导再转化E.coli BL21trxB(DE3)pLYsS菌株。SDS-PAGE和Western Blot分析表达产物,最后通过扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验来检测重组hαCGRP扩张血管的活性。结果表明,重组质粒含hαCGRP成熟肽编码基因序列(111bp),符合预想结果;表达出21 kD的融合蛋白,且主要以可溶性形式存在,其粗提物具有扩张血管能力。重组hαCGRP的成功表达为下一步纯化及研制基因工程药物奠定了重要基础。
- 赵丹丹于晓光班莺徐华锋林平邹海峰刘宇
- 关键词：PCR人类基因组融合蛋白克隆基因工程
- FAK反义寡聚脱氧核苷酸对FN诱导Hela细胞MMP-2表达的影响被引量：4
- 2004年
- 目的:利用反义核酸技术探讨纤黏连蛋白(fibronectin, FN)诱导Hela细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)基因表达的机制。方法:无血清培养Hela细胞,以不同浓度及作用时间的FN诱导Hela细胞中MMPs基因表达, 并用反义寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)封闭焦点黏着激酶(focal adhesion kinase,FAK), 用酶谱分析方法检测MMPs的活性。结果:FN浓度为0 μg/mL时,Hela细胞无MMP蛳2基因表达;FN浓度为5 μg/mL^10 μg/mL、作用时间为12 h,MMP蛳2活性最大;当在培养液反义ODN后,MMP蛳2活性明显降低。结论:MMP蛳2基因表达与FN的浓度以及作用时间有关;FN可通过其整合素受体的信号转导通路启动Hela细胞中MMP蛳2基因表达、降解ECM,从而促进肿瘤的浸润和转移。
- 班莺于晓光赵丹丹林平徐华锋邹海峰刘洋
- 关键词：寡聚脱氧核苷酸
- MMP-2特异性RNA干扰真核表达载体的构建
- 2006年
- 目的构建基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)特异的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制MMP-2表达在急性冠脉综合征治疗中的意义奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的MMP-2基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体,使用限制性内切酶PstⅠ酶切鉴定是否为阳性克隆。结果成功构建psiSTRIKETM-MMP2载体,拟进一步采用RNAi技术观察其对MMP-2基因表达的抑制情况,从而研究其在急性冠脉综合征治疗中的作用。结论MMP-2 RNAi真核表达载体被成功构建。
- 王政李为民徐华锋董广涛
- 关键词：基质金属蛋白酶-2RNA干扰急性冠脉综合征
- RNAi技术沉寂CFSC中TIMP-1基因表达与细胞凋亡的关系
- 目的应用RNA干扰技术抑制纤维化的肝星型细胞(CFSC)中表达增多的基质金属蛋白酶的抑制因子(TIMP-1)mRNA的表达，并探讨TIMP-1mRNA的表达下降与纤维化的肝星型细胞凋亡的关系。方法RT-PCR获得TIMP...
- 徐华锋
- 关键词：肝纤维化RNA干扰技术细胞凋亡
- 文献传递
- PGEM-T/TIMP-1重组质粒的构建及其在体外转录法合成dsRNA中的作用
- 2005年
- 目的 构建大鼠PGEM -T/TIMP 1重组质粒,获得TIMP -1基因的dsRNA。方法 RT PCR获得TIMP 1cDNA ,克隆于PGEM- T载体上,PCR鉴定并进行序列分析;以PGEM- T/TIMP- 1重组质粒为模板,PCR获得带有T7启动子的TIMP 1cDNA ;体外转录获得TIMP- 1dsRNA。结果 RT- PCR及测序分析证明成功构建PGEM- T/TIMP 1重组质粒;并获得带有T7启动子的TIMP- 1cDNA以及TIMP- 1dsRNA。结论 成功构建PGEM T/TIMP -1重组质粒,并获得TIMP -1dsRNA ,为RNAi实验奠定了基础。
- 徐华锋邹海峰刘洋林平司云峰于洪伟于晓光
- 关键词：TIMP-1T7启动子RNAIDSRNA
- RNAi抑制肝星状细胞TIMP-1基因表达及对细胞生物学行为的影响被引量：4
- 2007年
- 研究了siRNA对大鼠肝星状细胞(CFSC)TIMP-1基因表达及对细胞生物学行为的影响.用RT-PCR方法获得带有T7启动子的TIMP-1全基因序列,体外转录法获得TIMP-1dsRNA,Dicer酶切后得到siRNA,用质脂体将siRNA转染至CFSC,RT-PCR检测TIMP-1 mRNA的表达,MTT方法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果成功获得TIMP-1 siRNA,将TIMP-1 siRNA转染至CFSC12、24、48h后,与对照相比,TIMP-1 mRNA的表达逐渐下降,经Quanity One(BIO-RAD,USA)分析后,其抑制率分别为49.18%、58.72%和64.73%;siRNA转染CFSC细胞后,CFSC生长受到抑制,细胞凋亡不明显.实验结果表明体外转录法得到的siRNA能有效地降低大鼠CFSC中TIMP-1的表达,明显抑制CFSC的增殖,但不直接引起CFSC的凋亡.
- 徐华锋邹海峰林平刘鑫刘秀萍于晓光
- 关键词：RNAI基质金属蛋白酶组织抑制因子-1肝星状细胞
- 肝纤维化基质金属蛋白酶-26/基质金属蛋白酶抑制因子-1mRNA的表达被引量：5
- 2006年
- 基质金属蛋白酶（MMPs）是一组能降解细胞外基质（ECM）的酶，该家族的一些酶是迄今为止已发现的惟一能分解纤维类胶原的酶类，MMP-26是MMPs家族的一个新成员，又称endometase或matrilysin-2，MMP-26可能参与一系列与组织重建有关的事件。基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）是一组能特异性抑制MMPs活性的低分子蛋白质，
- 邹海峰刘洋徐华锋林平赵丹丹吴进荣刘鑫于晓光
- 关键词：肝纤维化基质金属蛋白酶原位杂交
- SOLiD测序技术在结肠癌转录组中的应用
- 目的：通过新一代测序技术SOLiD对结肠癌、结肠息肉和结肠正常组织的转录组测序，筛选出新的差异表达基因，并探讨其在结肠癌中的生物学作用。 方法：病历资料于2011年3月15日从哈医大肿瘤医院获取，该病人为女，44岁，乙...
- 徐华锋
- 关键词：结肠癌差异表达基因
