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巴马香猪Toll样受体4基因cDNA的克隆及生物信息学分析被引量：7: 2010年; 目的研究TLR4在猪自然免疫中的作用及机制,为抗病育种及免疫佐剂的开发提供依据。方法利用NCBI公布的TLR4基因序列设计引物,RT-PCR技术克隆巴马香猪TLR4基因。结果所得基因序列提交GenBank,登录号:GQ304754。经序列分析,发现巴马香猪TLR4基因开放阅读框长2526 bp,编码785个氨基酸,该蛋白等电点为6.58,分子量为96.4×103;与普通猪比对发现巴马香猪TLR4基因有5个碱基发生突变;与小鼠、狗、鸡、牛、羊和人的同源性分别为71.9%、81.5%、54.2%、86.4%、85.5%和81.9%;TLR4膜外区蛋白为背侧多个α螺旋和内侧多个β折叠平行交替排列构成一个弯曲状螺旋结构;N末端存在信号肽,且可能在23～24位氨基酸处存在裂解位点;胞外区有13个明显的LRR,分别位于第53～74、77～100、101～124、149～173、174～192、201～225、372～393、398～429、446～469、470～494、495～518、519～541、543～566位氨基酸区;膜外区含8个N连接的糖基化位点。结论本研究成功克隆巴马香猪TLR4基因,为进一步研究该基因的功能和蛋白质的特性奠定了基础。; 巨向红徐汉进雍艳红安立龙效梅许英梅; 关键词：TOLL样受体生物信息学分析

热应激对巴马香猪PBMC TLRs mRNA及TLRs介导的炎症因子表达的影响: 为了探讨热应激诱发动物免疫抑制的可能机理,本研究以巴马香猪为试验材料,应用实时荧光定量PCR、ELISA、放射免疫和细胞培养等技术,系统分析了:/(1/)巴马香猪TLR2、TLR4基因和蛋白的分子特征;/(2/)热应激条...; 徐汉进; 关键词：热应激 TOLL样受体 PBMC; 文献传递

羊栖菜多糖对小鼠胎儿成纤维细胞生长、增殖及代谢的影响: 2010年; 用含5、10、204、0、80 mg/l羊栖菜多糖(SFPS)的培养液培养小鼠胎儿成纤维细胞(MEF),研究SFPS对MEF生长增殖、营养物质吸收利用和细胞因子分泌的影响。结果表明:5、10、20 mg/lSFPS对MEF形态和生长增殖均无显著影响(P>0.05),40、80 mg/l SFPS对MEF表现出明显的抑制作用(P<0.05),使MEF突触分叉,细胞内颗粒增多;SFPS可显著促进MEF对葡萄糖的摄取利用(P<0.05),但对钙和氨基酸的利用无显著影响(P>0.05);低浓度SFPS有促进MEF碱性成纤维细胞因子(bFGF)、干细胞生长因子(SCF)、白血病抑制因子(LIF)分泌的趋势,但高浓度SFPS对bFGF、SCF和LIF的分泌无显著影响。; 安立龙张土保吴凌锋苑麟勇胡洋徐汉进; 关键词：羊栖菜多糖增殖细胞因子

巴马香猪Toll样受体4基因cDNA的克隆及生物信息学分析: 目的：研究TLR4在猪自然免疫中的作用及机制,为猪的抗病育种及免疫佐剂的开发提供依据。方法：利用NCBI公布的TLR4基因序列设计引物,RT-PCR技术克隆巴马香猪TLR4基因。结果：所得基因序列提交GenBank,登录...; 巨向红徐汉进雍艳红安立龙效梅许英梅; 关键词：基因克隆 TOLL样受体生物信息学分析

SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测巴马香猪Toll样受体2mRNA方法的建立: 基于SYBR GreenⅠ技术的实时荧光定量PCR是目前定量检测核酸比较准确的方法之一。本试验目的是建立SYBR greenⅠ实时荧光定量PCR检测巴马香猪TLR2 mRNA的方法。前腔静脉采血，提取外周血单核细胞RNA...; 徐汉进雍艳红巨向红赵云涛安立龙效梅许英梅; 关键词：TOLL样受体荧光定量PCR 基因检测

臭气、高温对集约化养鸡的影响及营养调控方法: 2009年; 阐述了臭气对集约化养鸡造成的危害及高温对集约化养鸡产生的不良的影响;提出了通过日粮中蛋白质、氨基酸水平、能量水平的调整,某些饲料添加剂的添加等营养调控方式控制养殖场内臭气产生和缓解鸡高温应激的方法。; 许英梅吴凌锋张土保苑麟勇胡洋徐汉进安立龙; 关键词：臭气高温营养调控养鸡场

热应激条件下巴马香猪PBMC内参基因的筛选: (目的)为了选择热应激条件下巴马香猪外周血单核细胞(PBMC)在体内较稳定的内参基因,为实时荧光定量PCR检测目的基因表达奠定基础.(方法)本研究利用实时荧光定量PCR法检测了ACTB、GAPDH、TBP、B2M、RPL...; 巨向红雍艳红徐汉进焦培荣廖明; 关键词：内参基因热应激; 文献传递网络资源链接

巴马香猪Hsp70基因的克隆、生物信息学分析及其在猪肠上皮细胞IPEC-J2中的表达被引量：2: 2017年; 为研究热应激蛋白70(HSP70)在巴马香猪(Sus scrofa domestica)耐热中的作用,利用NCBI公布的猪Hsp70基因序列设计引物,用RT-PCR克隆巴马香猪Hsp70基因。核酸序列分析表明,巴马香猪Hsp70基因开放阅读框(ORF)长1 932 bp,编码643个氨基酸。该蛋白分子质量为71.1 ku,等电点(PI)为5.88,与野猪、人、牛、羊、犬和鸡的同源性分别为99.2%、82.8%、83.2%、83.6%、82.4%和77.7%。该蛋白非叶绿体转运肽和线粒体导肽,亦非信号肽分泌通道,存在多个明显的疏水区,其中397位疏水性最强,达2.211。将该基因的ORF与真核表达载体pc DNA 3.1/V5-HisTOPO连接构建真核表达载体,并转染IPEC-J2细胞,荧光定量PCR及Western blot检测可见其在基因和蛋白水平的高量表达。; 韦美兰徐汉进雍艳红贾汝敏赵云涛巨向红; 关键词：HSP70基因克隆真核表达

巴马香猪TLR2基因cDNA的克隆及生物信息学分析被引量：4: 2010年; 利用NCBI公布的TLR2基因序列设计引物,RT-PCR克隆巴马香猪(Sus barbatus)TLR2基因。核酸序列分析表明,巴马香猪TLR2基因开放阅读框长2358bp,编码785个氨基酸,该蛋白等电点为7.52,相对分子质量为89480;与普通猪比对发现,巴马香猪TLR2基因有15个碱基发生突变;与小鼠、狗、鸡、牛、羊和人的同源性分别为73.4%,82.4%,59.5%,85.3%,84.6%,82.4%。TLR2膜外区蛋白为背侧多个α螺旋和内侧多个β折叠平行交替排列构成一个弯曲状螺旋结构;N末端存在信号肽,且可能在21～22位氨基酸处存在裂解位点;胞外区有4个明显的LRR,分别位于第76～99、360～385、413～432和457～476位氨基酸区;膜外区含6个N连接的糖基化位点。; 徐汉进雍艳红安立龙巨向红; 关键词：生物信息学分析

SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测巴马香猪Toll样受体2 mRNA方法的建立: 基于SYBR GreenⅠ技术的实时荧光定量PCR是目前定量检测核酸比较准确的方法之一。本试验目的是建立SYBR greenⅠ实时荧光定量PCR检测巴马香猪TLR2 mRNA的方法。前腔静脉采血,提取外周血单核细胞RNA...; 徐汉进雍艳红巨向红赵云涛安立龙效梅许英梅; 关键词：荧光定量PCR; 文献传递

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