徐采云
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录因子SP1参与TNF-α介导的肺泡上皮细胞氧化损伤中Nox1基因的表达调控
- 1研究背景急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)是指心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性进行性呼吸衰竭,其病理特征为由于肺微血管通透性增高、肺泡渗出物...
- 徐采云
- 关键词：转录调控SP1
- NF-κB结合元件缺失对NOX1启动子转录活性的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:构建含NADPH氧化酶1(NOX1)近端启动子区的pGL3萤光素酶报告基因载体及缺失NF-κB结合元件的相应载体,分别测定其相应活性,探讨NF-κB结合元件缺失对NOX1启动子区转录活性的影响。方法:采用PCR法克隆NOX1启动子区序列(1 415 bp),将目的片段与pGL3萤光素酶载体分别双酶切、纯化后进行连接(pGL3-NOX1-1415),测序鉴定;应用Alibaba 2.1软件分析NOX1近端启动子区,获取NF-κB结合元件;重叠PCR法将含该元件的启动子区域(88 bp)缺失,并构建相应载体(pGL3-NOX1-1327)。将两载体分别与pRL-TK内参质粒瞬时转染进入A549细胞,采用TNF-α(10μg/L)刺激细胞24 h,萤光酶标仪检测A549细胞的萤光素酶活性。结果:测序鉴定结果提示pGL3-NOX1-1415及NF-κB结合元件缺失的pGL3-NOX1-1327载体构建成功;细胞实验显示,TNF-α刺激后,转染pGL3-NOX1-1415的A549细胞萤光素酶活性明显强于对照组(P<0.05),而转染NF-κB结合元件缺失的pGL3-NOX1-1327的细胞萤光素酶活性明显低于转染pGL3-NOX1-1415组(P<0.05)。结论:TNF-α诱导A549细胞NOX1基因活化与NF-κB密切相关,NF-κB参与了TNF-α诱导的NOX1基因启动子的转录调控。
- 吴炜景李理徐采云黄文杰
- 关键词：NF-ΚB急性肺损伤启动子转录因子
- 转录因子SP1参与TNF-α介导的肺泡上皮细胞Nox1基因的表达调控
- 目的探讨急性肺损伤(ALI)发病机制中炎症介导肺泡上皮细胞氧化损伤时氧化相关基因Nox1的转录调控机制,阐明以TNF-α为代表的细胞因子与Nox1基因、活性氧(ROS)的相互关系以及转录因子SP1参与Nox1表达调控作用...
- 徐采云李理袁伟锋黄文杰
- 转录因子SP1参与TNF-α介导的肺泡上皮细胞Nox1基因的表达调控
- 为探讨急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)发病机制中炎症介导肺泡上皮细胞氧化损伤时氧化相关基因烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NADPH oxidase...
- 徐采云李理黄文杰
- 关键词：急性呼吸窘迫综合征发病机制转录因子SP1肺泡上皮细胞
- 文献传递
- Nox1基因启动子表达载体的构建被引量：2
- 2013年
- 目的克隆烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(Nox)上游启动子序列,为研究Nox1基因的转录调控奠定基础。方法以人基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得1415bp(-1415～0)、1276bp(-1415～-140)、997bp(-1415～-419)、839bp(-1415～-577)、470bp(-1415～-946)大小的Nox1启动子片段,将其定向克隆入pGL3-Basic荧光素酶表达载体,构建荧光素酶报告基因载体,进行真核细胞转染后鉴定目的片段启动子活性。结果在A549细胞中,各Nox1启动子片段均有活性;-140～-419bp和-577～-946bp区域可能存在Nox1启动子核心区域。结论成功克隆了在肺泡上皮样细胞中具有活性的Nox1启动子序列,为进一步研究Nox1基因的转录调控机制奠定了基础。
- 徐采云李理袁伟锋黄文杰
- 关键词：启动子转录调控
- 不同浓度肿瘤坏死因子-α对肺腺癌A549细胞的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察不同浓度肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肺腺癌A549细胞产生的保护、促炎、促细胞凋亡效应。方法分别以0、1、10、25、50 ng/mL的TNF-α诱导肺腺癌A549细胞6 h。采用MTT比色法观察细胞存活率;应用活性氧(ROS)荧光探针DCFH-DA检测ROS强度;RT-PCR法检测Nrf-2、NF-κB基因的表达;DAPI细胞核荧光染色法处理细胞,荧光显微镜下观察细胞凋亡。结果 0、1、10、25、50 ng/mL TNF-α对肺腺癌A549细胞存活率无影响(P均>0.05);100 ng/mL TNF-α诱导后,与对照组比较,细胞存活率降低(P<0.05)。随着TNF-α浓度增加,肺腺癌A549细胞产生ROS的量随之增加(P均<0.05),Nrf-2 mRNA表达减少(P均<0.05),NF-κB mRNA表达增加(P均<0.05),细胞凋亡率有上升趋势。结论不同浓度TNF-α诱导肺腺癌A549细胞可产生保护、促炎、促细胞凋亡等不同细胞效应,且随TNF-α浓度增加,细胞损伤加重;其机制可能与ROS产生的量有关。
- 徐采云李理袁伟锋黄文杰
- 关键词：肺肿瘤肿瘤坏死因子活性氧细胞保护
