戴红梅
- 作品数：43 被引量：86H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- Scytovirin在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：1
- 2008年
- 目的:获得Scytovirin(SVN)蛋白及其多克隆抗体。方法:按照NCBI上公布的SVN基因序列设计合成引物,合成SVN基因,构建pET32c-SVN原核表达重组质粒,经限制性酶切分析、DNA序列测定插入片段正确;将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达;用离子交换层析法及金属亲合层析法纯化蛋白,采用Tris-Tricine系统分析;以经过纯化的蛋白为抗原免疫白兔,制备SVN多克隆抗体。结果:对表达产物进行了分离纯化,SVN纯度达到91%;用纯化的样品制备了多克隆抗体,抗血清效价为1∶102400。结论:SVN在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并制备了其多克隆抗体,为进一步深入研究SVN提供了材料。
- 冯欣刘刚戴红梅汤国营游松
- 关键词：可溶性表达多克隆抗体
- 重组人表皮生长因子的中试工艺研究
- 1994年
- 人表皮生长因子(hEGF)是最早发现最早应用于临床的多肽生长因子之一,由53个氨基酸组成,分子量约为6200Da。它具有多种生物学功能,能促进表皮和上皮细胞的增殖,刺激多种培养细胞的生长,增强蛋白质及DNA合成等。在临床上主要用于创烧伤救治。
- 朱厚础汤国营王勇波胥照平戴红梅孙澎马清钧
- 关键词：中试工艺烧伤救治人表皮生长因子多肽生长因子
- 人表皮生长因子发酵液的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳被引量：1
- 1995年
- 一般蛋白质样品的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)通常只用一种浓度的分离胶(单层分离胶)。我们发现,将这种方法用于未经处理的重组人表皮生长因子(rhEGF)发酵液的电泳时,效果不好。我们推测可能是由于发酵液成分复杂,蛋白分子大小不均。基于这种考虑,我们就分离胶浓度对电泳效果的影响进了一些探索。
- 戴红梅汤国营
- 关键词：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳人表皮生长因子发酵液分离胶蛋白电泳RHEGF
- N-末端乙酰化蛋白或多肽的制备方法及其专用工程菌
- 本发明公开了一种能产生N-末端乙酰化的蛋白质或多肽的方法及其专用工程菌。该重组工程菌，是将表达来自古细菌的乙酰化酶的表达盒整合到宿主菌染色体上，得到在染色体上表达古细菌乙酰化酶的重组菌；所述表达古细菌乙酰化酶的表达盒包括...
- 方宏清戴红梅孙旭任元涛司信喜李树龙陈惠鹏周长林
- 去除经反相分配色谱纯化的蛋白质样品中有机溶剂的方法
- 本发明公开了一种除去经反相色谱纯化的蛋白质样品中有机溶剂的方法，其目的是提供一种可有效除去经反相色谱纯化的蛋白质样品中有机溶剂的方法。本发明所提供的除去经反相色谱纯化的蛋白质样品中有机溶剂的方法，是将经反相色谱纯化的蛋白...
- 方宏清陈惠鹏李彦英戴红梅李玉玲
- 文献传递
- 一种工程菌及其在生产紫穗槐-4, 11-二烯中的应用
- 本发明公开了一种工程菌及其在生产紫穗槐-4，11-二烯中的应用。本发明提供了一种工程菌，是在大肠杆菌中导入如下基因得到的重组菌：紫穗槐-4，11-二烯合酶基因、HMG-CoA还原酶基因、HMG-CoA合酶基因、甲羟戊酸激...
- 方宏清吴涛孙旭戴红梅李树龙
- 通过一种新方法使T7基因Ⅰ置换araBAD基因簇被引量：2
- 2009年
- 目的:用T7RNA聚合酶基因T7基因Ⅰ置换大肠杆菌基因组中的araBAD基因簇。方法:通过分析大肠杆菌基因组中araBAD基因序列,设计两侧同源臂,构建高拷贝数的打靶质粒,并且在这个质粒上的打靶片段两侧各加上一个归巢内切酶位点;将辅助质粒和打靶质粒同时转化到宿主体内,在L-阿拉伯糖的诱导下表达归巢内切酶和Red重组酶,实现体内重组,使T7基因I置换araBAD基因簇。结果:在4株不同的大肠杆菌中用T7基因I置换了araBAD基因簇。结论:成功地将T7基因Ⅰ整合到araBAD基因位置,为构建PAra-PT7表达系统奠定了基础。
- 沈林方宏清戴红梅李树龙周长林陈惠鹏
- 关键词：大肠杆菌L-阿拉伯糖
- 人乙酰肝素酶的小分子多肽抑制剂
- 本发明公开了一种人乙酰肝素酶小分子多肽抑制剂的氨基酸序列及一组具有人乙酰肝素酶小亚基(8kD)结合活性的小肽，属于生物医学领域。抑制人乙酰肝素酶活性的小肽，其氨基酸序列从N末端到C末端为序列表SEQIDNO.1。在表达并...
- 刘刚程慧君陈惠鹏汤国营戴红梅
- 文献传递
- 基于PTS缺陷型大肠杆菌构建莽草酸生产菌被引量：6
- 2011年
- 对大肠杆菌芳香族氨基酸合成途径进行代谢流改造,以实现高效的生物制备莽草酸。以磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(PTS系统)敲除菌DH5α△ptsHIcrr(DHP)为基础,特异性敲除aroL、ydiB基因并转入受阿拉伯糖诱导表达的T7-RNA聚合酶基因,最终构建一系列产莽草酸宿主菌。再将aroE、aroB、tktA、glk、aroFfbr组成的系列基因串联起来置于质粒上,在T7启动子控制下表达,经摇瓶培养检测得知,不同重组菌产莽草酸能力与对照相比均有明显提高,其中DHPYA-T7/pAOC-TGEFB菌株产量最高,可达到392 mg/L。为进一步构建高表达莽草酸工程菌奠定基础。
- 邹永康周军智孙旭蔡亚非戴红梅李树龙周长林方宏清
- 关键词：莽草酸
- 胸腺肽α1-Spl DnaX内含肽融合蛋白的切割动力学研究
- 2011年
- 目的:研究胸腺肽α1(Tα1)与Spl DnaX内含肽融合蛋白AS的体外切割动力学。方法:构建Tα1和SplDnaX内含肽的融合表达载体pET-AS,转化大肠杆菌BL21(DE3),经乳糖诱导获得可溶性表达的融合蛋白AS,用镍亲和层析纯化该蛋白;综合评价温度、β-巯基乙醇(β-ME)浓度和诱导切割时间对Spl DnaX内含肽介导融合蛋白AS自切割释放Tα1的影响。结果:在大肠杆菌中诱导表达了融合蛋白AS,经镍柱纯化获得该蛋白;随着温度升高和β-ME浓度增加,诱导切割时间延长,Spl DnaX内含肽介导的切割率逐渐增大;最终采用300 mmol/Lβ-ME切割24 h,融合蛋白的硫解切割率大于90%。结论:通过对Spl DnaX内含肽的诱导切割条件进行摸索,确定了最适宜的切割条件,为利用该方法制备Tα1和其他小分子多肽提供了技术基础。
- 曹赛戴红梅李树龙谢迟方宏清
- 关键词：胸腺肽Α1融合蛋白
