方六荣
- 作品数：225 被引量：750H指数：16
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一株猪δ冠状病毒强毒株及其在疫苗制备中的应用
- 本发明属于动物病毒学与动物传染病学技术领域，具体涉及一株猪δ冠状病毒强毒株和该毒株在疫苗制备中的应用。本发明从临床发生腹泻仔猪的小肠内容物中分离到一株PDCoV，命名为猪δ冠状病毒DHeB1株，将其保藏于中国典型培养物保...
- 方六荣肖少波方谱县周艳荣马俊卢佑新彭旋张誉瀚
- 重组猪伪狂犬病毒－猪繁殖与呼吸综合征病毒－猪圆环病毒基因工程毒株及应用
- 本发明属于动物病毒基因工程技术领域，具体涉及重组猪伪狂犬病毒－猪繁殖与呼吸综合征病毒－猪圆环病毒基因工程毒株构建、疫苗制备及应用。获得一株重组猪伪狂犬病毒－猪繁殖与呼吸综合征病毒－猪圆环病毒基因工程毒株E001，缺失了伪...
- 肖少波徐凤琴方六荣江云波陈焕春
- 文献传递
- 一种猪δ冠状病毒感染性克隆质粒的构建方法
- 本发明公开了一种猪δ冠状病毒感染性克隆质粒的构建方法，属于动物传染病防治和生物技术领域。本发明基于BAC系统和同源重组一步克隆法拯救PDCoV CHN‑HN‑2014株重组病毒的反向遗传系统，将毒株的5个基因片段一步克隆...
- 方六荣方谱县肖少波夏思进任杰张健淞张慧畅
- 文献传递
- 地高辛标记DNA探针检测伪狂犬病的研究被引量：7
- 1997年
- 利用伪狂犬病病毒特异性扩增产物制成地高辛标记的探针，对闽Ａ株，鄂Ａ株，Ｂａｒｔｎａ株，英国株及临床病料进行检测，其结果与ＰＣＲ检测结果相符，准确率为１００％，灵敏度达到２ｐｇＤＮＡ，试验认为该探针具有灵敏、特异。
- 李学伍陈焕春周复春周复春吴斌
- 关键词：地高辛DNA伪狂犬病
- 一种禽流感病毒H5亚型乳胶凝集检测试剂盒及应用
- 本发明公开了一种用于快速检测H5亚型禽流感病毒的乳胶凝集试剂盒。利用水溶性碳化二亚胺将抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体偶联到羧化聚苯乙烯胶乳颗粒的表面，建立了H5亚型禽流感病毒乳胶凝集检测方法，再辅以其它配套试剂...
- 金梅林陈剑锋但汉并吴斌方六荣陈焕春
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M蛋白共表达的自杀性DNA疫苗的构建及其免疫应答被引量：26
- 2006年
- 目的探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自杀性DNA疫苗的免疫效果。方法将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游,获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。结果Westernblot检测证实ORF5和ORF6基因获得正确表达,并且所表达的GP5和M蛋白可以形成异源二聚体。将pSFV-56免疫Balb/c小鼠,首免后4周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周的中和抗体最高可达1﹕32,同时还可检测到较高的特异性细胞免疫应答。进一步将pSFV-56免疫断奶仔猪,二免后4周即可产生1:8～1:16的中和抗体,直到二免后6周仍维持这种高水平的中和抗体,而且也可检测到较高的特异性细胞免疫应答。结论上述研究结果表明pSFV-56具有良好的免疫原性和诱发免疫动物产生较高免疫应答的能力。
- 江云波方六荣肖少波张辉陈焕春
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- PRRSV感染原代和传代PAM的比较转录组学分析被引量：1
- 2021年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是严重危害世界养猪业的重要病原。PRRSV对原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)和传代猪肺泡巨噬细胞系(immortalized porcine alveolar macrophage,IPAM)均易感,但在感染早期,PRRSV在IPAM中的感染率显著高于PAM。为了揭示这2种细胞在PRRSV感染后的应答差异,本研究运用Illumina高通量测序技术对PRRSV感染的IPAM和PAM进行转录组测序,结果表明,PRRSV感染PAM和IPAM后能够诱导相似的免疫应答,但PAM的免疫应答反应更强;与代谢相关的基因在PRRSV感染的IPAM中差异更显著。进一步分析发现,PRRSV感染IPAM后下调细胞周期相关基因的表达水平,导致细胞周期停滞在G0/M期,从而促进PRRSV增殖;IPAM抗原递呈相关基因的缺失或低丰度表达可能是IPAM中免疫应答水平较低的原因;Nod-like receptor(NLR)、Toll-like receptor(TLR)、Target of rapamycin(TOR)、adenosine 5'monophosphate-activated protein kinase(AMPK)和phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B(PI3K-Akt)等信号通路在PRRSV感染的PAM和IPAM中激活状态不同,可能导致了PRRSV在这2种细胞中的增殖差异。本研究结果为深入了解PRRSV感染原代和传代PAM后的应答差异补充了有用的数据。
- 周艳荣郝婉君卫莹李洋柯文婷肖少波方六荣
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒PAM
- 双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗载体的改造及其体外表达特性被引量：2
- 2006年
- PCR扩增西门利克森林病毒(SFV)亚基因组启动子26S序列及人工合成Linker,将其插入基于SFV复制子的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA1的多克隆位点,获得含2个26S启动子并能同时驱动双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA2。为了验证pSCA2的表达能力,PCR扩增绿色荧光蛋白基因EGFP和红色荧光蛋白基因DsRed2,分别插入pSCA2的2个26s启动子下游,获得EGFP和DsRed2双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗pSCA2-EGFP/RFP。将pSCA2-EGFP/RFP转染BHK-21细胞,转染后24h,可同时观察到被转染细胞发绿色荧光和红色荧光,证实EGFP和DsRed2均获得表达。
- 谢京国方六荣肖少波姚林潘永飞陈焕春
- 关键词：双基因共表达
- 某猪场伪狂犬病的诊断和免疫预防被引量：1
- 1999年
- 何启盖赵自力吴斌方六荣
- 关键词：猪场伪狂犬病病毒免疫预防
- 增强型绿荧光蛋白突变体在大肠杆菌中的表达与纯化
- 为了充分利用突变体EGFP/mut4,本研究在大肠杆菌中高效表达了几丁质结合域(CBD)-内含肽(intein)-EGFP/mut4融合蛋白,并利用内含肽的自我剪切活性获得了高纯度的EGFP/mut4蛋白.
- 牛传双肖少波方六荣陈焕春
- 关键词：绿色荧光蛋白突变体大肠杆菌
- 文献传递
