曾怡
- 作品数:4 被引量:21H指数:2
- 供职机构:贵阳医学院贵州省医学分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省科技攻关计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 沉默胃泌素基因抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭被引量:13
- 2014年
- 胃癌细胞分泌的胃泌素与胃癌的发生、发展密切相关.为了探讨胃泌素对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,本文构建靶向胃泌素基因的siRNA表达载体,转染胃癌细胞AGS,成功获得沉默胃泌素基因的稳转胃癌细胞株AGS/Gas-siRNA.用MTT实验、软琼脂集落形成实验、细胞伤愈实验、Transwell实验及ELISA检测沉默胃泌素基因后细胞的增殖、迁移、侵袭及转移相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量.结果显示:与空载体转染的对照细胞比较,沉默胃泌素基因的细胞,其增殖率和克隆形成率显著降低,迁移和侵袭到Transwell下室的细胞数分别降低了31.6%和34%.培养上清液中MMP-2和VEGF含量也低于对照细胞.结果提示,沉默胃泌素基因的胃癌细胞,通过降低MMP-2和VEGF分泌,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭,这可能是胃泌素促进胃癌侵袭转移的机制之一.
- 曾怡周建奖谢渊赵艳
- 关键词:胃泌素胃癌迁移RNA干扰
- 过表达胃泌素促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭被引量:8
- 2013年
- 胃癌患者转移淋巴结中胃泌素基因的表达量是原发胃癌组织的42倍,推测胃泌素可能与胃癌转移密切相关.本文通过构建含胃泌素基因的真核表达载体,成功获得过表达胃泌素的稳转胃癌细胞株AGS和SGC-7901,并用MTT、细胞伤愈实验、Transwell小室实验及ELISA检测过表达胃泌素对细胞迁移、侵袭及转移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)分泌能力的影响.结果显示,过表达胃泌素稳转细胞的相对增殖率、迁移入细胞致伤区的相对距离比对照组高,迁移和侵袭到Transwell下室面的细胞,以及培养液中每mg蛋白质的MMP-2浓度也高于对照组的细胞.结果提示,胃泌素通过促进胃癌细胞分泌MMP-2来增强细胞的迁移和侵袭能力.该研究对揭示胃癌转移的分子机制具有重要意义.
- 刘骏周建奖谢渊赵艳曾怡
- 关键词:胃癌胃泌素迁移
- 胃泌素/胆囊收缩素受体环对胃癌细胞增殖迁移的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探索胃泌素/胆囊收缩素受体环对胃癌细胞增殖迁移的影响。方法用免疫细胞化学方法检测人胃癌细胞SGC-7901、AGS和胃黏膜上皮细胞GES-1细胞中胆囊收缩素-B(CCKB)受体的表达。分别培养这3种细胞,用不同终浓度胃泌素(10、100 nmol/L)处理细胞,以未加胃泌素的细胞为对照,用细胞划痕实验和四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞的增殖迁移能力。结果胃癌细胞SGC-7901、AGS中CCKB受体表达强阳性,而GES-1细胞中CCKB受体表达弱阳性;不同浓度胃泌素处理细胞后,SGC-7901、AGS细胞的增殖迁移能力明显增强,而GES-1细胞无明显改变;对照组、10 nmol/L胃泌素处理组及100 nmol/L胃泌素处理组中SGC-7901细胞的相对增殖率分别为100%、191.13%、212.65%,AGS细胞的相对增殖率分别为100%、189.27%、209.19%,各组间差异均有统计学意义(P均<0.01);而GES-1细胞的相对增殖率分别为100%、113.01%、116.12%,各组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 CCKB受体表达水平的高低对胃泌素/CCKB受体环促进胃癌细胞的增殖和迁移起重要作用。
- 曾怡谢渊赵艳周建奖
- 关键词:胃肿瘤胃泌素胆囊收缩素受体细胞增殖
- 胃泌素对人胃癌细胞裸鼠移植瘤生长与转移潜能影响研究被引量:2
- 2015年
- 目的探讨胃泌素在胃癌细胞生长、侵袭和转移中的作用。方法构建过表达胃泌素的细胞模型,用裸鼠成瘤实验检测体内肿瘤形成;细胞伤愈和Transwell小室实验检测体外细胞侵袭和转移;蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases,MMP-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及分泌。结果过表达胃泌素的胃癌细胞,裸鼠体内成瘤率为100%(6/6),高于对照细胞50%(3/6)。接种后25d,移植瘤的体积和体质量分别为(0.980 9±0.626 0)cm3和(0.445 6±0.280 1)g,均高于对照细胞的(0.222 1±0.352 6)cm3和(0.128 0±0.201 4)g,P值分别为0.018和0.048。Transwell小室实验结果显示,过表达胃泌素和对照的SGC-7901细胞的迁移细胞数为(24±4)和(10±5)个/400倍视野,q=4.24,P<0.05;AGS细胞为(86±5)和(24±4)个/400倍视野,q=4.93,P<0.05。SGC-7901细胞的侵袭细胞数为(58±5)和(16±5)个/400倍视野,q=4.65,P<0.05;AGS细胞为(112±5)和(68±3)个/400倍视野,q=5.24,P<0.05。蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR和ELISA结果显示,与对照细胞比较,过表达胃泌素的SGC-7901细胞中MMP-2和VEGF蛋白相对表达量分别增加166%和190%,AGS细胞中分别增加50%和68%;SGC-7901细胞中MMP-2和VEGF mRNA的相对表达量分别上调20.82倍和98.61倍,AGS细胞中分别上调32.58倍和26.71倍;培养液中MMP-2和VEGF的含量也增加,差异均有统计学意义,P值均<0.05。加入丙谷胺后,胃泌素的促进作用被抑制。结论胃泌素能促进胃癌细胞体内外肿瘤生长、侵袭和转移,有可能成为阻断胃癌侵袭转移的新靶点。
- 曾怡姜琼周建奖谢渊赵艳
- 关键词:胃泌素肿瘤浸润