目的研究环境持久性有机污染物邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)对调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)分化比例及其抑制功能的影响。方法构建生长期小鼠DEHP暴露模型,采用流式细胞术检测脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量;免疫磁珠分选法制备CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞,CCK法检测CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞增殖能力,混合淋巴细胞反应检测CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用。结果生长期小鼠经DEHP暴露处理后,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量逐渐减少,CD4+CD25+T细胞体外增殖能力及其抑制CD4+CD25-T细胞增殖的作用均逐渐降低。结论 DEHP能够从数量和功能两方面下调CD4+CD25+Treg细胞分化比例及其对效应性细胞的抑制功能。
目的:研究赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)在人结肠癌组织中的表达,及其对人结肠癌LoVo细胞株转移潜能的影响。方法:收集2007-06-01-2011-08-31南通大学附属医院52例结肠癌石蜡组织标本,免疫组化方法检测52例组织中LSD1的表达情况并分析其临床意义;瞬时转染LSD1特异性短发卡RNA(shRNA)干扰质粒下调LSD1的表达,通过细胞划痕实验、Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验观察下调LSD1的表达后LoVo细胞迁移及侵袭行为的变化。结果:LSD1在结肠癌组织中阳性表达率为67.3%(35/52),在癌旁组织中为37.5%(9/24),χ2=5.958,P=0.014。结合临床资料分析显示,LSD1的表达与分化程度(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.011)及Duke分期(P=0.024)有关,而与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、大体类型、浸润深度及有无远处转移无关。细胞划痕结果显示,转染组细胞迁移能力明显受抑制;Transwell迁移实验结果显示,Control组和转染LSD1-shRNA组穿过膜细胞数分别为220.25±6.75和40.875±1.813,转染LSD1-shRNA组穿过膜细胞数明显减少,z=3.787,P<0.001;Transwell侵袭实验结果显示,Control组和转染LSD1-shRNA组穿过膜细胞数分别为222.75±6.25和33.625±1.75,转染LSD1-shRNA组穿过膜细胞数明显减少,z=3.782,P<0.001。结论:LSD1表达与结肠癌的恶性程度及转移潜能密切相关,下调LSD1表达能抑制结肠癌LoVo细胞的转移潜能。
