李海波
- 作品数:14 被引量:39H指数:4
- 供职机构:南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金江苏省国际科技合作项目江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- M-CSF在青少年特发性脊柱侧凸患者成骨细胞中的表达及意义被引量:3
- 2009年
- 目的从成骨细胞(osteoblast,OB)水平探讨巨噬细胞集落因子(macrophage colony stimulating factor,MCSF)与青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者骨量降低的关系。方法AIS患者27例,其中男25例,女2例;年龄12~18岁,平均14.9岁;Cobb角40°~94°,平均57.3°。将所有AIS患者分为两组:A组14例,为骨量正常患者;B组13例,为骨量减低患者。正常对照组8例(定为C组),年龄12~18岁,平均15.3岁。3组均采用双能X线吸收测量仪(dual-energy X-ray absorptiometry,DEXA)测量骨密度(bone mineral density,BMD),测量部位包括非优势侧股骨近端及腰椎。所有受试者术中取适量髂前上嵴的松质骨,运用植块法培养成骨细胞。培养至P3代后行表型鉴定,用RT-PCR检测AIS组和正常对照组中M-CSF mRNA的表达水平。结果B组中M-CSFmRNA的表达量均较A组(P<0.05)和C组高(P<0.05),A组与C组M-CSFmRNA的表达量无显著统计学差异(P>0.05)。结论M-CSF在OB水平mRNA表达强度的异常可能与AIS骨量降低的分子机制相关。
- 孙超邱勇殷刚刘臻束昊王信华刘文军李海波
- 关键词:M-CSF青少年特发性脊柱侧凸成骨细胞
- 青少年特发性脊柱侧凸患者骨髓间充质干细胞褪黑素受体表达的研究被引量:1
- 2008年
- 目的:比较体外培养的青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者组和正常对照组骨髓间充质干细胞(BMSCs)褪黑素受体表达的差异性,并探讨其意义。方法:分别从患者髂前上棘处穿刺抽取10ml骨髓,肝素抗凝。采用密度梯度离心法分离BMSCs,体外培养并传至P3代,进行表型鉴定。抽提细胞的总RNA,采用RT-PCR方法检测2组褪黑素受体MT1、MT2 mRNA的表达水平。结果:分离的单个核细胞经培养至P3代,使用流式细胞仪进行细胞表型鉴定,体外培养细胞的表型与BMSCs的表面标志相符。AIS组MT1、MT2 mRNA的表达水平与正常对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:AIS患者BMSCs褪黑素受体MT1、MT2的表达无异常。在干细胞水平,褪黑素受体与AIS的发病可能没有明显的相关性。
- 李海波邱勇孙光权黄爱兵王渭君邱旭升
- 关键词:褪黑素受体骨髓间充质干细胞青少年特发性脊柱侧凸
- 青少年特发性脊柱侧凸患者骨髓间充质干细胞褪黑素信号通路初步研究被引量:1
- 2010年
- 目的研究青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)褪黑素信号通路是否存在异常。方法24例12~18岁志愿者,AIS患者15例,正常对照组9例。分别从患者髂前上棘处穿刺抽取10ml骨髓,肝素抗凝。采用密度梯度离心法分离BMSCs,体外培养并传至P3代,进行表型鉴定。取P3代BMSCs,先采用福斯可林刺激BMSCs内环磷酸腺苷(cAMP)升高,然后用不同浓度褪黑素刺激细胞,检测细胞内cAMP的水平。结果分离的单个核细胞经培养至P3代,使用流式细胞仪进行细胞表型鉴定,体外培养细胞的表型与BMSCs的表面标志相符。AIS组和正常对照组BMSCs的cAMP的基础水平都很低,在给予福斯可林刺激以后,cAMP的水平明显升高,此后再给予生理剂量的褪黑素刺激后,两组cAMP水平的抑制程度差异无统计学意义(P〉0.05);给予药理剂量的褪黑素刺激后,两组cAMP水平的抑制程度差异同样无统计学意义(P〉0.05)。结论AIS患者BMSCs褪黑素信号通路可能不存在异常。
- 王斌李海波邱勇邱旭升朱锋孙光权王渭君
- 关键词:褪黑激素信号转导间充质干细胞骨髓青少年特发性脊柱侧凸
- 人髂骨生长板软骨细胞的体外培养及鉴定被引量:6
- 2008年
- [目的]探讨人髂骨生长板软骨细胞体外培养的可行性并观察其生物学特征。[方法]对手术中获得的10例青少年特发性脊柱侧凸患者髂骨生长板软骨行体外分离、培养,观察细胞形态,MTT法测定细胞增殖,Ⅱ型胶原免疫组化染色,采用逆转录聚合酶链反应检测各代细胞Ⅱ型胶原mRNA的表达水平。[结果](1)体外培养的软骨细胞随着传代次数的增加,细胞形态由原代的多角形逐渐变为长梭形;(2)MTT比色法检测显示,第2代髂软骨细胞的生长曲线近似倒"S"形,在第4~8d细胞呈对数生长,在9~10d达平台期,至第11d开始出现生长抑制。(3)第2代细胞Ⅱ型胶原免疫组化呈强阳性。(4)Ⅱ型胶原mRNA表达水平从第2代后随着传代次数的增加逐渐下降。[结论]采用联合酶序贯消化法将软骨细胞悬液和软骨块共同体外培养髂软骨细胞简单、有效,P2代细胞很好的保持了软骨细胞的特性,可以作为种子细胞来源。
- 黄爱兵邱勇孙光权李海波殷刚曹兴兵钱邦平朱泽章朱峰
- 关键词:软骨细胞生物学特性脊柱侧凸
- 青少年特发性脊柱侧凸患者成骨细胞中核因子κB受体活化子配体和骨保护蛋白的表达被引量:4
- 2009年
- 目的:从成骨细胞(osteoblast,0B)水平探讨核网子κB受体活化子配体(receptor activator of NFκB ligand.RANKL)、骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)与青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者骨量降低的关系。方法:AIS患者(AIS组)20例,男5例,女15例,年龄11-19岁,平均14.75岁,Cobb角40°-96°,平均59.65°;同年龄非脊柱畸形患者(对照组)8例,男6例,女2例,年龄10-19岁,平均15.25岁。两组均采用双能x线吸收测量仪(dual-energy X-ray absorptiometry,DEXA)测量骨密度(bone mineral density,BMD),测量部位包括非优势侧股骨近端及腰椎。所有受试者术中取适量髂前上嵴的松质骨,运用植块法培养成骨细胞。培养过程巾观察细胞形态学变化,并用碱性磷酸酶染色法、钙结节染色法和RT-PCR检测骨钙素表达,并进行表型鉴定。取P2代细胞应用RT-PCR和Western blotting检测RANKL和OPG的mRNA及蛋白表达情况。结果:植块法培养可以获得较多的原代细胞。碱性磷酸酶染色、钙结节染色及RT-PCR检测骨钙素表达证实所培养的细胞表现成骨细胞特性。AIS组腰椎(L2-L4)及股骨近端的BMD值明显低于对照组;RANKL的核酸及蛋白水平的表达量均较对照组岛(P〈0.01);OPG的核酸及蛋白水平的表达量与对照组比较无统计学筹异(P〉0.05);RANKL/OPG比值明显高于对照组(P〈0.01)。结论:成骨细胞中RANKL及OPG在核酸及蛋白水平的表达异常可能与AIS患者骨量降低的分子机制相关。
- 殷刚邱勇黄爱兵刘臻李海波孙光权曹兴兵
- 关键词:青少年特发性脊柱侧凸成骨细胞骨保护蛋白
- 青少年特发性脊柱侧凸患者软骨细胞中褪黑素受体的表达量被引量:13
- 2009年
- 目的:观察青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者软骨细胞中褪黑素受体含量的变化,并探讨其与AIS病因学的关系。方法:随机选取2007年1月-2007年12月在我院手术治疗的22例AIS患者及8例非脊柱侧凸(肿瘤、外伤等)患者(对照组)。AIS组患者年龄10-16岁,平均12.7岁,平均Cobb角60.1°,其中10例在术中取髂软骨,12例取棘突软骨。对照组患者年龄10-15岁,平均12.9岁,其中7例在术中取髂软骨,1例取棘突软骨。对髂软骨和棘突软骨标本进行细胞培养至二代,取二代细胞用Ⅱ型胶原免疫组化染色方法进行软骨细胞表型鉴定,并抽提总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测软骨细胞中褪黑素受体两种亚型MTNR1A、MTNR1B的mRNA表达量。结果:两组患者软骨细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色均为阳性表达。AIS组软骨细胞中MTNR1A、MTNR1B mRNA的相对表达量分别为0.44±0.29和0.54±0.31.对照组分别为0.69±0.18和0.83±0.30,组间比较均有显著性差异(P〈0.05)。结论:AIS患者软骨细胞中MTNR1A、MTNR1B的mRNA表达均减少,这可能与AIS的发生、发展有关。
- 孙光权邱勇黄爱兵李海波邱旭升
- 关键词:青少年特发性脊柱侧凸褪黑素受体软骨细胞
- 转录因子Runx2在青少年特发性脊柱侧凸患者成骨细胞中的表达及其意义被引量:3
- 2009年
- 目的从成骨细胞(0B)水平探讨转录因子Runx2与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者骨量降低的关系。方法2008年3月至12月行后路手术的AIS患者28例为试验组,男性2例,女性26例;年龄12~18岁,平均14.9岁;Cobb角40°-94°,平均57.3°。试验组根据骨密度(BMD)情况又分为:A组(骨量正常组)15例,B组(骨量减低组)13例。正常对照组(C组)为住院治疗的非脊柱畸形的8例患者,男性6例,女性2例;年龄12—18岁,平均15.3岁。各组均采用双能X线吸收测量仪(DEXA)测量骨密度(BMD),测量部位包括非优势侧股骨近端及腰椎。所有受试者术中取适量髂前上嵴的松质骨,运用植块法培养OB。培养至P2代后行表型鉴定,用RT-PCR和Western blot法检测各组Runx2 mRNA及蛋白的表达水平并进行统计学分析。结果Runx2的mRNA及蛋白水平的表达,B组较A组和c组均降低,差异均有统计学意义(P〈0.05),A组与C组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论Runx2在OB水平mRNA及蛋白表达水平的异常可能与AIS骨量降低的分子机制相关。
- 孙超邱勇殷刚束昊刘臻王信华刘文军李海波
- 关键词:转录因子成骨细胞脊柱侧凸青少年
- 人软骨细胞中褪黑素受体mRNA的表达及意义被引量:2
- 2009年
- 目的检测人软骨细胞中褪黑素受体mRNA的表达,并探讨其意义。方法取8例手术切除的人髂软骨组织进行软骨细胞培养,并用Ⅱ型胶原免疫组化对培养的细胞进行软骨细胞鉴定。取二代软骨细胞抽提总RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测褪黑素受体mRNA的表达。结果人软骨细胞中总RNA以MT1和MT2两种受体引物进行的RT-PCR,产物电泳呈阳性条带;其基因片段长度与MT1和MT2受体引物之间的核酸长度相当。结论人软骨细胞中存在MT1、MT2两种褪黑素受体mRNA的表达,证明软骨细胞是褪黑素作用的靶细胞,褪黑素可能通过存在于软骨细胞中的MT1、MT2受体来调节骨骼的生长发育。
- 孙光权邱勇朱泽章黄爱兵李海波刘臻
- 关键词:褪黑素受体软骨细胞
- 青少年特发性脊柱侧凸患者出生时父母年龄与其侧凸类型及严重程度的关系
- 2009年
- 目的:探讨青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者出生时的父母年龄与AIS患者的侧凸类型、侧凸严重程度的关系。方法:选取来自华东地区初诊的AIS女性患者308例,年龄9.7-18.5岁,平均15.0岁。所有患者就诊时均记录患者性别、出生日期、初诊日期、侧凸节段、主弯Cobb角度数、分娩方式、胎位、是否早产及患者父母的出生日期。根据主弯Cobb角度数将所有患者分为3组,A组〈200;B组为200~39°;C组≥40。;根据侧凸类型将患者分为6组,单胸弯组(Ⅰ组),双胸弯组(Ⅱ组),胸腰双主弯组(Ⅲ组),胸腰弯组(Ⅳ组),腰弯组(Ⅴ组),三弯组(Ⅵ组)。结果:根据Cobb角分组后,A组(n=48)、B组(n=214)、C组(n=46)患者出生时的平均父亲年龄分别为27.5、26.7、27.0岁,平均母亲年龄分别为25.8、25.2、25.5岁,三组间均无统计学差异(P〉0.05)。根据患者侧凸类型分组后,Ⅰ组(n=72)、Ⅱ组(n=14)、Ⅲ组(n=127)、Ⅳ组(n=44)、Ⅴ组(n=30)、Ⅵ组(n=21)患者出生时的平均父亲年龄分别为27.0、26.6、26.5、27.7、27.0、27.0岁,各组平均母亲年龄分别为25.9、25.5、25.3、25.0、25.1、25-2岁,各组间无统计学差异(P〉0.05)。自然分娩组和剖腹产组平均Cobb角度数分别为29.7。和30.5。,胎位正常组和胎位异常组平均Cobb角度数分别为29.8°和29.9°,足月产组和早产组平均Cobb角度数分别为29.9°和29.5°,均无统计学差异(P〉0.05)。结论:AIS患者出生时的父母年龄与患者的侧凸类型及侧凸严重程度无显著相关性,提示AIS患者的侧凸类型及主弯Cobb角度数不受患者出生时的父母年龄的影响。
- 王玉邱勇王斌孙旭朱泽章朱锋钱邦平刘臻李海波
- 关键词:特发性脊柱侧凸青少年
- 青少年特发性脊柱侧凸患者身高增长速率高峰的预测被引量:1
- 2009年
- 青少年特发性脊柱侧凸(AIS)的病因学说很多,目前尚无明确定论。由于多数患者在青春发育期发病且随着生长发育而不断进展,生长发育和特发性脊柱侧凸(IS)的关系早已受到学者的关注。Porter认为IS可能是由于神经骨生长发育失衡引起。Guo等研究发现IS患者存在脊柱前柱相对过度生长,并认为这可能是导致侧凸的原因。朱锋等通过对AIS患者脊柱前后柱次发性生长骨骺的增殖和凋亡研究发现,AIS患者青春期脊柱前柱软骨细胞生长活性明显高于后柱,提示AIS患者脊柱前柱生长过快。目前一致认为,侧凸的进展与身高增长速率之问密切相关,在青春期快速生长阶段,侧凸进展也较为迅速;随着生长减缓或停滞,侧凸进展也变慢甚至停止。
- 李海波邱勇
- 关键词:青少年特发性脊柱侧凸脊柱侧凸患身高增长骨生长发育细胞生长活性青春发育期