杜玲
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- SIK2 shRNA重组腺病毒载体构建及其在3T3-L1脂肪细胞的表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建特异性小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的shRNA腺病毒载体,干扰脂肪细胞中SIK2的表达。方法设计3对靶向SIK2的shRNA,插入穿梭质粒pENTR/U6载体,转染3T3-L1脂肪细胞,通过Real-timePCR方法筛选最佳沉默SIK2效果的穿梭质粒,经腺病毒同源重组后,重组小鼠SIK2shRNA腺病毒载体经脂质体转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2-shRNA,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3-L1脂肪细胞,通过Real-time PCR及免疫印迹法检测鼠SIK2在3T3-L1脂肪细胞中的表达水平。结果纯化后的Ad-shRNA-SIK2重组腺病毒载体可特异下调成熟3T3-L1脂肪细胞SIK2 mRNA和SIK2蛋白的表达。结论干扰3T3-L1脂肪细胞SIK2表达的短发夹RNA重组腺病毒载体构建成功。
- 杜静杜玲宴耀明周薇陆红邹德学
- 关键词：腺病毒载体短发夹RNA3T3-L1脂肪细胞
- 胸腹主动脉夹层手术脊髓损伤标记物临床研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨脑脊液生化指标监测对胸腹主动脉夹层术后脊髓缺血损害判断的临床意义。方法将50例胸腹主动脉夹层手术患者根据术后是否发生脊髓缺血损害并发症分成损伤组(SCI组,n=5)和无损伤组(NSCI组,n=45)。术前、术后分7个时点对脑脊液取样,对胶质纤维酸蛋白(GFAP)、S100β蛋白以及神经丝蛋白亚单位(NFL)等3个生化指标进行测定。比较分析上述3个生化指标在2组之间的变化。将无脊髓损伤患者据术式分为血管置换手术组(AR组,n=9)和腔内隔绝术组(EVGE组,n=36),同样比较分析上述3个生化指标在2组之间的差异。结果 SCI组术后6 h各项生化指标开始升高,48-72 h各项指标明显高于NSCI组(P<0.01)。术后6 h以后GFAP、S100β蛋白测定数值在2组之间数值无重叠。腔内隔绝术后各项指标无明显升高,血管置换术后6 h起GFAP、S100β开始升高,术后24 h达到峰值,较术前相比差异有统计学意义(P<0.05),同时高于腔内隔绝术后对应时点。血管置换术后(第24h4、8 h)时点NFL高于腔内隔绝术后对应时点(P<0.05)。结论脑脊液生化指标持续监测可以预判迟发性脊髓损害。GFAP、S100β蛋白比NFL诊断脊髓损伤有更高的预测价值。
- 杨超周钧杜玲彭锐李芸
- 关键词：S100Β蛋白
