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杨洁: 作品数：19 被引量：8H指数：2; 供职机构：云南农业大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金云南省重大科技计划项目国家公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗方法的建立: 猪瘟是危害养猪业的重要传染病,猪瘟主要依靠猪瘟兔化弱毒疫苗预防,目前各厂家不同批次弱毒苗的质量效果,主要通过注射疫苗后,检测免疫抗体来验证,耗时费事.本研究设计合成了两对引物(一对质粒标准品引物和一对荧光定量PCR引物)...; 范斌马志亮刘岳杨洁柴俊刘旭川张以芳; 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果荧光定量检测; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达载体的构建与鉴定: 2015年; 本试验旨在构建能表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的重组质粒。用疑似患猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病猪的脾脏、肺脏病料提取RNA,根据PRRSVORF5基因设计1对引物,进行RT-PCR扩增,将ORF5目的基因克隆到pMD19-T载体中,得到pMD19-ORF5重组菌。根据测序结果和表达载体特点,设计1对带有NcoⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物,扩增目的片段(dORF5),将其分别与pProEXHTb载体、pNZ8149载体连接,得到HTb-dORF5/DE3和pNZ8149-dORF5/NZ3900重组菌,分别用IPTG和Nisin诱导,再进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果显示,HTb-dORF5/DE3重组菌在1.5mmol/L IPTG诱导时表达量最高,通过SDSPAGE和Western blotting分析,在约22ku处有特异性条带,且具有反应原性;pNZ8149-dORF5/NZ3900重组菌在20ng/mL Nisin诱导时表达量最高,通过SDS-PAGE和Western blotting分析,在约19ku处有特异性条带,间接免疫荧光试验有特异性绿色荧光。本研究成功构建重组质粒HTb-dORF5和pNZ8149-dORF5并获得表达,这为进一步研制预防PRRS疫苗奠定坚实基础。; 周玉照马志亮孙亭亭杨洁张小苗柴俊张娜娜张以芳; 关键词：ORF5基因大肠杆菌乳酸乳球菌

保山猪不同杂交组合生产性能的比较研究: 引言保山猪原产于云南省保山市,是云南优良的地方猪种之一,具有肉质细嫩、香味浓郁、产仔多、母性好、适应性强、耐粗饲、抗病力强等优良特性,是发展优质猪肉生产的优良种质资源。本试验以保山猪为母本,引进杜洛克、巴克夏作父本进行杂...; 杨洁龚绍荣赵加鼎祝应良赵桂英; 文献传递

荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗方法的建立: 猪瘟是危害养猪业的重要传染病,猪瘟主要依靠猪瘟兔化弱毒疫苗预防,目前各厂家不同批次弱毒苗的质量效果,主要通过注射疫苗后,检测免疫抗体来验证,耗时费事.; 范斌马志亮刘岳杨洁柴俊刘旭川张以芳

猪流行性腹泻病毒COE基因重组乳酸菌的构建及免疫原性分析: 本研究以乳酸乳球菌乳链菌肽表达(Nisin controlled expression,NICE)系统为抗原递呈载体,以PEDV COE基因片段为靶基因,构建了表达PEDV COE基因的重组乳酸乳球菌,并对其免疫原性进行...; 杨洁张以芳; 关键词：PEDV 乳酸乳球菌口服疫苗; 文献传递

利用云南气候特点提高马铃薯早期选择效率: 本试验利用云南冬季温暖、夏季雨热同季的气候特点,对马铃薯实生种子进行冬季温室营养袋育苗,雨季无性世代大田种植试验。结果表明：冬季温室营养袋生产实生小薯,可有效利用空间和时间,缩短育种年限;雨季进行田间种植淘汰不抗晚疫病的...; 杨洁张雅琼郭华春; 关键词：马铃薯选择育种营养袋育苗; 文献传递

牛干扰素-γ基因的克隆、序列分析及表达研究被引量：1: 2014年; 为了使干扰素-γ(interferonγ,IFN-γ)在牛结核等疾病的诊断和防制方面取得更有效的应用,试验采用RT-PCR法从云南本地黄牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增牛IFN-γ(BoIFN-γ)基因,测序并进行序列分析;然后亚克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。序列分析结果表明,克隆的IFN-γ基因与GenBank中荷斯坦牛IFN-γ序列同源性达99.60%。表达产物经SDS-PAGE分析,在大小约23ku处可见目的蛋白表达条带,与预期结果一致;用ELISA检测,表达的蛋白具有明显的生物学活性,在菌体中的含量为244ng/mL。本试验结果为牛IFN-γ蛋白的进一步研究和应用奠定了基础。; 杨洁张书光李长青刘世高柴俊刘旭川史宪伟张以芳; 关键词：原核表达生物学活性

勐腊县野猪杂交后代养殖发展及对策被引量：1: 2015年; 野猪杂交后代养殖是近年来发展起来的新型养殖业,本文介绍勐腊县野猪杂交后代养殖概况及发展中存在的问题及对策。; 孙逸平岩砍伦李云辉赵桂英杨洁; 关键词：野猪杂交后代养殖

荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗方法的建立: 猪瘟是危害养猪业的重要传染病,猪瘟主要依靠猪瘟兔化弱毒疫苗预防,目前各厂家不同批次弱毒苗的质量效果,主要通过注射疫苗后,检测免疫抗体来验证,耗时费事。本研究设计合成了两对引物(一对质粒标准品引物和一对荧光定量PCR引物)...; 范斌马志亮刘岳杨洁柴俊刘旭川张以芳; 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR; 文献传递