林菊生
- 作品数：225 被引量：700H指数：14
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- RNAi研究新进展
- RNAi是一种双链RNA分子在mRNA水平关闭相应序列基因的表达或使其沉默的过程,即序列特异性的转录后基因沉默.本文从RNAi的发现、作用机制、生理功能和技术应用及其作用特点几方面进行了研究探讨.指出随今后癌细胞在RNA...
- 林菊生黄锦
- 关键词：RNAI基因工程
- 文献传递
- 分泌性内皮抑制素真核质粒治疗小鼠肝癌的初步研究被引量：3
- 2003年
- 目的 构建并表达分泌性内皮抑制素真核表达质粒,以此对肝癌进行基因治疗。方法 人工合成Ig κ信号肽序列,和内皮抑制素编码序列一起克隆入pcDNA3.1质粒。重组质粒转染上清液作用于ECV304内皮细胞,MTT法检测内皮细胞的增殖。局部注射重组质粒治疗接种在小鼠腿部肌肉内的H_(22)肝癌瘤株,疗程结束后解剖称取瘤重。结果 构建的内皮抑制素真核表达质粒转染上清液可以抑制内皮细胞的增殖抑制率为29.2％。经质粒裸DNA注射治疗后,治疗组瘤重[(1.34±0.96)g]比空载体组[(2.70±0.82)g]和生理盐水组[(3.73±1.41)g]明显减小(P<0.05)。结论 分泌性内皮抑制素真核表达质粒用于H_(22)肝癌的基因治疗有一定效果。
- 黎培员林菊生冯作化张慧周鹤俊章金艳
- 关键词：小鼠肝癌基因治疗MTT法
- 锤头状核酶对肝癌突变基因p53的抑制作用被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨p53核酶对肝癌细胞突变型抑癌基因p53的抑制作用。方法 应用计算机设计并合成针对突变型p53(249位密码子AGG→AGT)的锤头状核酶RZ,构建其体外转录和真核表达载体,检测核酶对突变型p53(mtp53)的体外切割作用,并在Lipofect AMINE^(TM)2000的介导下转染肝癌细胞MHCC97,应用逆转录聚合酶联反应(RT—PCR)检测核酶对肝癌细胞突变型p53的抑制作用。结果 测序证实核酶基因被正确克隆入体外转录载体pBSKU6和真核载体pEGFPC1中。体外切割效率为42％,而野生型p53(wtp53)没有被切割。在LipofectAMINETM2000的介导下成功转染肝癌细胞MHCC97,RT—PCR检测证实突变型p53的mRNA水平明显下降,细胞内的切割效率为69％。结论 p53核酶可成功抑制肝癌细胞中突变型p53的表达,为肝癌的基因治疗提供了一个新的选择。
- 孔心涓林菊生宋宇虎沈霞金由辛
- 关键词：锤头状核酶肝癌P53基因基因治疗
- 新型抗HBV化合物:-βL-D4A对DNA聚合酶δ的作用及其机制
- 2008年
- 目的对DNA聚合酶δ进行纯化和鉴定,通过检测β-L-D4A对DNA聚合酶δ的作用,观察β-L-D4A的毒副作用。方法运用多次离子交换层析的方法提取、纯化人Hela细胞的DNA聚合酶δ;检测β-L-D4A对DNA聚合酶δ的酶动力学作用。结果提纯并鉴定了DNA聚合酶δ,收得率是15%,比活力是1 911 ukat/mg。β-L-D4A为抑制剂时,Km是2.45μmol/L,IC50是150.1μmol/L,K i是132.7μmol/L,均提示β-L-D4A对DNA聚合酶δ的抑制作用远小于拉米夫定。结论β-L-D4A是DNA聚合酶δ的竞争性抑制剂,它对该酶的毒副作用远小于拉米夫定,可望成为更高效低毒的抗HBV类药物。
- 李岩林菊生张颖慧王晓燕何星星
- 关键词：核苷类DNA聚合酶Δ酶动力学毒副作用
- HBV RNA上La protein结合位点的缺失对自身稳定性的影响
- 目的研究乙型肝炎病毒(HBV)DNA上的突变所造成HBV RNA上La protein结合位点的缺失对HBV RNA 在宿丰细胞内稳定性的影响,评价HBV DNA上这个位点对HBV生命周期的重要性,从而寻找新的抗HBV靶...
- 林园园林菊生王晓燕谢娜周秀敏宋宇虎
- 关键词：突变
- 文献传递
- 乙型重型肝炎并发症对重型肝炎预后影响的荟萃分析被引量：12
- 2010年
- 目的荟萃分析乙型重型肝炎并发症对病人预后的影响,并探讨并发症成为乙型重型肝炎诊断标准的可能。方法检索截止到2009年11月国内公开发表的乙型重型肝炎相关的论文,提取文献中含有预后和并发症数据,包括肝性脑病、肝肾综合征、感染、上消化道出血和腹水,将上述效应量进行异质性检验,荟萃分析其合并后的效应量。结果共检索到2229篇文献通过遴选,最终有8项研究纳入荟萃分析,共包含1771例乙型重型肝炎病例。荟萃分析生存组(好转组)和死亡组中肝性脑病、肝肾综合征、感染、上消化道出血和腹水,均存在明显差异(P<0.05)。相对危险度依次肝性脑病、肝肾综合征、上消化道出血、感染和腹水。在荟萃分析中肝性脑病、感染和腹水在8项研究中具有同质性。上消化道出血和肝肾综合征有一定异质性。结论荟萃分析发现肝性脑病、肝肾综合征、感染、上消化道出血和腹水在死亡组和生存组之间有明显差异,肝性脑病、感染和腹水同质增加病人死亡率,考虑作为临床乙型重型肝炎预后判断指标。但由于各并发症发病率未超过半数,故各并发症不能作为乙型重型肝炎诊断标准。
- 姚津剑于伟玲常莹林圆圆林菊生
- 关键词：乙型重型肝炎并发症预后
- 乙肝病毒体外感染的血清模型和细胞模型及其建立方法
- 本发明公开一种乙肝病毒体外感染的血清模型和细胞模型及其建立方法，该血清模型由去除病毒的乙肝大三阳血清和HepG2.2.15病毒颗粒混合而成，其中，所述去除病毒的乙肝大三阳血清的拷贝数为HBV-DNA>10<Sup>...
- 廖家智孙淑珍林菊生何星星黎培员
- 文献传递
- RNA干扰在肝癌中的应用
- 2004年
- 近年来,RNA干扰(RNAi)技术已成为癌症基因治疗中令人关注的研究热点,以其高效、特异、应用广泛的特点,展示了诱人的临床应用前景.
RNAi是内源性或外源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默机制.RNAi技术有3个重要的特点,首先它具有高效性.从刚开始的21～23 nt的小干扰RNA(siRNA)分子,到后来研究应用的27～29nt的小发夹RNA(shRNA)分子,RNAi都具有高效抑制作用,抑制率均在90%以上.其二,RNAi有严格的序列特异性.针对变异基因设计的siRNA或shRNA分子抑制异常基因,而正常基因不受影响.其三,siRNA具有高度的稳定性.它是3′端悬挂TT碱基的双链RNA,化学性质很稳定,不需要修饰.如果加入一个6 nt环(1oop)的shRNA,则更进一步增加其稳定性和高效性.
- 黄锦林菊生
- 关键词：肝癌RNA干扰癌症基因
- 核酸对肝纤维化大鼠肝组织中M1型胆碱能受体表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨核酸在CCl4诱导的肝纤维化模型中对肝脏中M1型乙酰胆碱受体的影响及其抗肝纤维化的可能机制。方法应用四氯化碳(CCl4)诱导大鼠慢性肝纤维化模型。将55只Wistar大鼠分为4组:正常对照(N)组10只?肝复乐胶囊对照(G)组15只?核酸(Z)组15只及模型(M)组15只。采用光镜观察肝组织病理学改变;运用免疫组织SP法?逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot方法检测各组肝组织M1型胆碱能受体(M1-AChR)不同水平的表达情况。结果核酸组、肝复乐胶囊对照组病理改变较模型组明显改善;免疫组织化学?RT-PCR?Western-blot三种不同层次水平的表达结果均表明核酸组和肝复乐胶囊对照组M1-AChR的表达较模型组显著降低(P<0.05)。结论核酸可降低肝纤维化肝组织中M1型乙酰胆碱受体的含量,可能主要通过调节肝纤维化大鼠肝脏中的M1型乙酰胆碱受体的含量而达到抗肝纤维化的作用。
- 程勇卫虞涤霞唐望先段瑞娴刘红艳林菊生杨玉珍
- 关键词：核酸肝纤维化
- 靶向XIAP的shRNA抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导其凋亡的实验研究
- 目的探讨以 XIAP 为靶向的 shRNA 对肝癌细胞株 HepG2生长及凋亡的影响。方法构建针对 XIAP 基因的 shRNA 真核表达载体,通过脂质体介导的方法将重组质粒转染到 HepG2细胞中。采用 RT-PCR ...
- 吴小力张琼姚津剑林菊生
- 文献传递
