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日本对虾(Penaeus japonicus)病原需钠弧菌(Vibrio natriegens)表型与分子特征及LAMP检测方法的建立被引量：3: 2012年; 采用常规表观生物学特性及16S rRNA、gyrB及rpoA基因同源性检索与系统发育学分析等方法,对分离自江苏连云港某育苗场的大批死亡日本对虾蚤状幼体的优势生长菌进行了综合鉴定。结果表明,其形态和生理生化特征与弧菌属的需钠弧菌相近;16S rRNA、gyrB及rpoA基因同源性检索也均与需钠弧菌相似性最高,分别为98%、89%和95%,且三种基因的NJ系统发育树也均与需钠弧菌聚为一个分支;分离菌的致病性试验表明其半数致死量LD50为1.8×106CFU/ml。综合分离菌的致病性、形态与生理生化特征及基因同源性与系统发育分析结果,认为引起日本对虾蚤状幼体大批死亡的病原为需钠弧菌。基于gyrB基因序列设计1套LAMP特异性引物,建立了需钠弧菌的快速特异性检测方法,可用于由需钠弧菌引起的水产动物疾病的诊断及分子流行病学的调查研究。; 陈丽白雪松张晓君毕可然秦蕾阎斌伦; 关键词：日本对虾 RRNA GYRB LAMP

1株假交替单胞菌的分离与鉴定被引量：2: 2013年; 2012年5月江苏连云港某育苗场日本对虾(Penaeus japonicus)蚤状幼体发生群体死亡,自幼体中分离到优势菌株XS-1。对菌株XS-1进行了形态特征、理化特性等表观生物学特性检验,并进行了16S rRNA基因的同源性检索与系统发育学分析。结果表明菌株XS-1具有假交替单胞菌属的特征,在系统发育树中与Pseudoalteromonas lipolytica聚为一个分支,自举值达100%。毒力试验表明,该菌对日本对虾蚤状幼体和仔虾的半数致死量(LD50)分别为1.3×106CFU/mL和2.0×106CFU/mL。综合菌株XS-1的形态特征、理化特性及16S rRNA基因的同源性检索与系统发育学分析,鉴定XS-1为P.lipolytica,且对日本对虾蚤状幼体及仔虾均具有毒力。药敏试验表明,该菌对阿奇霉素、环丙氟哌酸、头孢曲松、复方新诺明等11种药物敏感(S),对卡那霉素、苯唑青霉素、新生霉素耐药。; 白雪松张晓君毕可然樊星阎斌伦秦国民; 关键词：PSEUDOALTEROMONAS RRNA

基于toxR基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原副溶血弧菌方法的建立被引量：8: 2012年; 基于副溶血弧菌toxR基因保守序列设计1对特异性引物,建立了SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测副溶血弧菌的方法。常规PCR检测,副溶血弧菌扩增出大小为368bp的目的片段,其他4种病原细菌均为阴性;SYBRGreenⅠ实时定量PCR扩增曲线反映了PCR的指数增长阶段和平台阶段;在Tm为85℃,扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体;所制作的标准曲线在2.7×108～2.7×102拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.998,能对副溶血弧菌进行准确的定量分析;该方法检测时间从核酸抽提到结果分析仅需4～5h,较传统方法敏感、操作简单,耗时短,是副溶血弧菌引起的水产动物疾病的快速诊断及食品中针对副溶血弧菌安全检测的有效手段。; 张晓君梁利国阎斌伦毕可然秦国民; 关键词：副溶血弧菌 SYBR REAL-TIME

泥鳅低碳养殖模式: 2012年; 泥鳅因味美．肉嫩．蛋白质含量高，富含钙、磷、铁等微量元素，被誉为“水中人参”。野生泥鳅数量远不能满足消费需求．为此．泥鳅养殖业迅速兴起。目前泥鳅养殖已成为江苏、浙江、江西和河北等地水产养殖中的一个亮点。; 罗刚徐国想毕可然; 关键词：泥鳅养殖养殖模式低碳蛋白质含量养殖业

坦布苏病毒囊膜蛋白诱导的小鼠免疫应答: 2017年; 为了研究坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的免疫原性,利用大肠杆菌表达系统高效表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并对其诱导小鼠免疫应答进行了研究。结果表明,E蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫组小鼠血清中抗体效价均可达1∶51 200以上;同时,E蛋白可显著诱导血清中细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达,免疫组小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量均极显著高于对照组(P<0.01),IFN-γ含量则显著高于对照组(P<0.05);此外,与对照组相比,E蛋白还可极显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,上述结果表明,E蛋白免疫后,小鼠机体可产生显著的体液免疫和细胞免疫反应。攻毒保护性试验结果显示,攻毒后,经荧光定量RT-PCR检测,E蛋白免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏、卵巢、肾脏中坦布苏病毒载量均显著低于对照组,表明免疫E蛋白可有效抑制坦布苏病毒在小鼠各个组织中的增殖。结果表明,大肠杆菌表达的坦布苏病毒E蛋白可作为坦布苏病毒亚单位疫苗的候选抗原,为进一步预防和控制坦布苏病毒病奠定理论基础。; 赵冬敏黄欣梅韩凯凯刘宇卓杨婧刘青涛毕可然李银; 关键词：囊膜蛋白免疫应答亚单位疫苗

用于哈氏弧菌的环介导恒温扩增快速检测试剂盒及方法: 一种用于哈氏弧菌的环介导恒温扩增快速检测试剂盒，其组成为：反应液A，1支，其组成为：10×Lampbuffer，dNTP，硫酸镁水溶液，甜菜碱水溶液，引物vh-F3、vh-B3、vh-FIP、vh-BIP，BstDNA酶...; 徐加涛张晓君陈丽毕可然闫斌伦秦国民; 文献传递

三疣梭子蟹病原副溶血弧菌的分离与鉴定被引量：22: 2010年; 从养殖病死三疣梭子蟹肝胰脏及心脏血淋巴液中分离到大量优势生长的细菌,人工感染试验证明分离菌对三疣梭子蟹有较强的致病性;对分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶及溶血素活性等表型生物学性状及16S rRNA和gyrB两种基因的分子鉴定。菌株(JGX080708-1)所扩增的16S rRNA基因序列长度为1453bp(GenBank登录号:FJ824663),所扩增的gyrB基因序列长度为1191bp(GenBank登录号:GQ372985);两种基因序列在NCBI通过blast检索,结果均与弧菌属细菌的基因序列自然聚类;根据分离菌的表型及分子特征,判定分离菌为弧菌属(Vibrio Pacini1954)的副溶血弧菌[Vibrio parahaemolyticus(Fujino et al1951)Sakazaki Nakamura and Takizawa1963]。分离菌的药敏试验结果显示,对供试49种抗菌药物中的安曲南等42种药物高度敏感,对林可霉素敏感,对青霉素G等6种药物耐药。; 阎斌伦秦国民暴增海张晓君毕可然秦蕾; 关键词：三疣梭子蟹副溶血弧菌 16SRRNA基因

从核rDNA与16S rDNA序列探讨隙蛛亚科Coelotinae的分类地位: 本研究基于核rDNA与16S rDNA部分序列探讨了隙蛛亚科的分类地位,并对蜘蛛类16S rDNA3′端二级结构进行了研究。 1 核基因与线粒体基因在蜘蛛类系统发生中的应用 ...; 毕可然; 关键词：隙蛛亚科分子系统学; 文献传递

抗泥鳅病原霍乱弧菌的卵黄抗体灭活疫苗的制备方法: 本发明是一种抗泥鳅病原霍乱弧菌的卵黄抗体灭活疫苗的制备方法，先将泥鳅病原霍乱弧菌NQ1菌株灭活、离心得灭活菌体；然后制得黄芪浸出液；再由白油、硬脂酸铝、司班80制得油相，灭活菌体与黄芪浸出液混合制得疫苗水相；最后将油相和...; 张晓君陈丽毕可然秦国民; 文献传递

三疣梭子蟹病原需钠弧菌双重PCR快速检测试剂盒与方法: 本发明公开了一种三疣梭子蟹病原需钠弧菌双重PCR快速检测试剂盒，该试剂盒包括阴性对照、需钠弧菌（<I>Vibrio natriegens</I>）XA1菌株DNA作阳性对照、含Mg<Sup>2+</Sup>、dNTP和D...; 毕可然; 文献传递

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毕可然

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