潘宗富
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所更多>>
- 发文基金：浙江省重点科技创新团队项目浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于光镜表型的促神经元亚型分化药物初筛法被引量：2
- 2012年
- 目的:建立基于光镜表型的促胚胎干(embryonic stem,ES)细胞神经元亚型分化药物筛选法,供早期发现促神经再生药初筛用。方法:采用悬滴培养4-/4+法,形成拟胚体,继而贴壁培养向神经细胞分化,光镜确认表型呈神经元样的基础上进一步评价各类亚型。以10-7mol/L异补骨脂甲素(Isobavachin,IBA)和10-6mol/L淫羊藿苷(Icariin,ICA)为例,分化终点以光镜下轴突为胞体三倍长以上者为神经元样细胞,继续以免疫荧光成像法确认神经元(β-tubulinⅢ阳染),并进一步以特异性抗体(ChAT、GABA)阳染共定位鉴别相应神经元亚型。结果:基于光镜表型评价,在分化终点即可剔除轴突分化不全的细胞,取代了以往免疫荧光成像所需的人力、物力与时间;并避免进一步ELISA或流式细胞术评价的假阳性。光镜显示IBA处理者大部分显示神经元样表型,而ICA处理的细胞却不然,免疫荧光成像结果与此相一致。因此,仅对IBA处理的神经元做亚型鉴定,显示胆碱能神经元以及γ-氨基丁酸能神经元亚型。结论:基于光镜表型的促神经元分化初筛法在化合物促神经元亚型分化上具有简便易行、节约物力与时间,避免假阳性的独到之处;经该法初筛后供后续研究,可见IBA具有促胆碱能和γ-氨基丁酸能神经元分化活性。
- 高益宁王丹音潘宗富梅宇钦王志强朱丹雁楼宜嘉
- 关键词：淫羊藿苷Γ-氨基丁酸能神经元
- Junctophilin-3.-4介导钙瞬变对轴突生长作用研究
- Junctophilin(JP)家族蛋白,是一类存在于可兴奋细胞中的新型膜结合蛋白,可联接细胞膜和内质网膜,形成膜连接复合物,支持Ca2+在细胞膜和内质网膜之间的穿梭,从而为钙离子的动态平衡提供必要的物质基础.JP家族蛋...
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