熊建华
- 作品数：9 被引量：129H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划创新研究群体科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 红莲优6号杂交水稻与亲本三系不同发育时期幼苗叶片基因表达差异分析被引量：4
- 2003年
- 运用 DDRT- PCR对红莲型杂交稻组合红莲优 6号及其亲本、保持系 (粤泰 A、粤泰 B、9311)的一叶期、三叶期叶片基因表达状况进行分析。结果表明 :杂种与亲本之间在同一发育时期基因表达既有质量上又有数量上的差异 ,但差异表达基因所占比例较小 ;而对于同一材料 ,一叶期、三叶期的叶片 c DNA扩增带型相似 ,没有发现基因质上的差异表达 ,说明一叶期与三叶期幼苗叶片基因表达差异很小。实验也证明 DDRT- PCR技术结合银染方法是一种简单快速分析差异表达基因的有效方法。
- 张义平陈学峰熊建华朱英国
- 关键词：红莲优6号杂种优势幼苗
- 运用银染mRNA差异显示方法分析杂交水稻红莲优6号基因表达差异被引量：12
- 2003年
- 运用非同位素银染mRNA差异显示方法 ,分析红莲型杂交水稻组合基因表达差异。以杂交水稻及其亲本三系 (YTA、YTB、93 1 1 )三叶一心期叶片RNA为模板采用锚定引物 5′dT1 2MN 3′和随机引物组合 ,进行反转录差异显示PCR。经 5 .6%测序胶电泳分离后用银染方法显示差异DNA条带 ,在直观下 ,从凝胶中回收差异条带并进行再扩增 ,2 %琼脂糖电泳得到了DNA的单一带型。
- 张义平陈学峰熊建华
- 关键词：杂交水稻基因表达
- 水稻冷胁迫诱导的甲基化差异片段CIDM7的分离和分析被引量：51
- 2005年
- 采用基于AFLP的甲基化敏感扩增多态性的方法对5℃冷处理48h的水稻9311叶片DNA胞嘧啶甲基化模式进行了初步研究,发现冷处理48h后9311基因组中一些CCGG位点发生了重新甲基化或去甲基化,并获得一些与水稻cDNA高度同源的甲基化差异片段,其中CIDM7(coldinducingdifferentialmethylation)片段在冷胁迫后去甲基化。Northern杂交证明CIDM7在冷胁迫后增强表达。通过在日本晴全长cDNA数据库中的同源搜索获得其全长cDNA序列,该cDNA序列全长1422bp,编码425个氨基酸,经氨基酸序列分析为一个具有Fbox结构的假定蛋白。CIDM7为单拷贝,定位于日本晴10号染色体12.56～12.57Mb。
- 华扬陈学峰熊建华张义平朱英国
- 关键词：水稻AFLP冷胁迫
- 水稻杂种与亲本间差异表达cDNA片段S600的分离克隆被引量：4
- 2005年
- 采用cDNA-AFLP技术分离克隆了水稻杂种与亲本间差异表达基因片段S600。Northern杂交结果表明:在分蘖期和始穗期,S600在杂种和父本中表达丰度均较高,而在母本中表达丰度相对较低。S600在分蘖期和始穗期表达量不同,暗示了该基因的表达还受到发育时期的调节。同源搜索结果表明S600片段是水稻SBPase的部分编码序列。为了获得完整编码序列,以S600序列检索粳稻日本晴cDNA数据库,获得了两个高度同源(99%)且功能未知的全长cDNA克隆(AK062089和AK065773)。序列分析表明它们均包含一个相同的1179bp的开放阅读框,编码392个氨基酸组成的水稻SBPase前体,其中包含有与底物结合、氧化还原调节有关的保守氨基酸残基。检索发现该基因在水稻日本晴基因组中只有单个座位。
- 陈学峰熊建华张义平华扬李阳生朱英国
- 关键词：水稻杂种
- 实时PCR定量分析干旱胁迫下水稻糖原合成酶激酶基因表达差异被引量：18
- 2006年
- 通过实时荧光定量PCR进行相对定量分析,得到水稻IR64糖原合成酶激酶(glycogen synthase kinase,GSK)基因在不同生育期、不同组织干旱胁迫处理前后的表达差异。叶片中GSK基因为组成型表达,各生育期干旱胁迫时诱导合成增加,尤其从分蘖期到抽穗期表达更为显著,说明这段生长期叶片对水分缺乏最敏感;苗期根系处理后GSK表达明显下降,叶片处理前后GSK表达无明显变化。由此可见,GSK基因的表达在不同的发育时期、不同的组织中呈现差异。
- 魏敏熊建华李阳生傅彬英
- 关键词：水稻干旱胁迫实时PCR
- 水稻杂种超亲表达26S蛋白酶体亚基基因OsHL1的克隆和分析被引量：7
- 2004年
- 运用DDRT PCR分离获得水稻杂种一代超亲表达的cDNA片段。以此序列在日本晴cDNA全长数据库进行同源搜索 ,检索到一个功能未知的全长cDNA ,有 16 90bp,命名为OsHL1,进一步分析发现它位于 3号染色体上R2 393和MRG4 5 4 8之间。序列分析表明 ,该基因与日本晴编码 2 6Sproteasomeregulatoryparticlenon ATPasesubunit5基因片段的序列同源性为97%。其中包含一个完整的开放阅读框 (ORF) ,编码 4 4 3个氨基酸 ,氨基酸序列同源性分析发现高度保守区。RT PCR显示OsHL1基因的表达受到ABA和MeJA处理下调。推测杂种的表现可能与 2 6S蛋白酶体亚基参与的信号调控相关。
- 张义平陈学峰熊建华华扬李阳生
- 关键词：水稻杂种优势基因克隆
- 水稻景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因的克隆及表达分析
- 通过cDNA-AFLP从水稻9311(Oryza sativa L,indica)中分离到了杂种与亲本间差异表达的基因片段S600,测序结果显示S600为水稻景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶部分编码序列。该酶对于控制Calv...
- 陈学峰熊建华李阳生朱英国
- 文献传递
- 红莲型杂交水稻红莲优6号及其亲本苗期与分蘖期根系基因表达差异分析被引量：14
- 2004年
- 运用mRNA差异显示技术 (DDRT PCR)对红莲型杂交稻组合红莲优 6号及其亲本 (粤泰A、扬稻 6号 )、保持系(粤泰B)苗期、分蘖期根系的基因表达状况进行了分析。结果显示 ,不同发育时期之间差异表达基因远少于同一时期之间杂种与亲本差异表达基因 ,苗期和分蘖期差异表达基因数量相近 ,但同一差异表达类型基因的数量有较大变化 ,分蘖期杂种表达单亲基因增多 ;互补表达基因可能对红莲优 6号杂种优势的形成起重要作用。MF1差异片段已通过Northern杂交验证 ;MF1片段克隆测序结果在GeneBank中进行同源序列查对 ,发现是新的cDNA序列。
- 熊建华陈学峰张义平朱英国李阳生
- 关键词：杂交水稻红莲优6号亲本苗期分蘖期杂种优势
- 应用Gateway技术构建水稻OsDAD1基因的RNA干涉载体被引量：20
- 2007年
- 近年来,RNA干涉广泛应用于植物基因功能研究。Gateway技术是通过采用多重载体高效构建目标基因及任何DNA片段克隆和表达载体的研究平台,该技术以λ噬菌体的位点特异性重组体系为基础,两端具有重组位点的DNA片段或目标基因可以非常容易地被重组克隆到含同源重组位点的载体上。这种以重组为基础的克隆体系目前已被广泛应用于分子生物学中来分析基因的功能。本文应用Gateway技术体系替代传统载体构建方法,构建了水稻基因OsDAD1的RNA干涉载体,从而证明了Gateway技术的可行性。
- 徐化学熊建华傅彬英
- 关键词：RNA干涉
