王亚婷
- 作品数：58 被引量：112H指数：5
- 供职机构：上海市浦东新区浦南医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金上海市浦东新区科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 电穿孔转染法提高基因表达效率的电场强度优化探索被引量：1
- 2015年
- 目的采用监测荧光报告基因表达的策略,探索应用电穿孔法进行稳定转染的适合悬浮淋巴细胞的电场强度。基因转染技术广泛应用于基因表达调控,基因功能,信号转导和药物筛选研究,已经成为当前生命科学的基本操作之一。外源性DNA导入哺乳动物或人细胞有两种类型:瞬时转染和稳定转染。天生趋于悬浮的细胞非常难转染,多种方法都效率低下。而电穿孔法理论上可用于各种细胞,尤其对于悬浮细胞十分有效。本文就悬浮生长的T淋巴细胞的电穿孔法转染条件之一(电场强度)进行优化探讨。方法用荧光报告基因质粒转入急性白血病T淋巴细胞系,根据报告荧光活性单位值和蛋白浓度判断不同电场强度(250,270,290V/cm)对悬浮细胞的最佳电穿孔转染条件。结果随电压升高,原始荧光报告基因表达加强,270和290V无明显差异,存活细胞数量依次降低。相对荧光单位,表明相同细胞数量存活时,转染效率按照250,270,290V顺序依次升高。中等强度的270V电压,既保证了足够多的转染体存活,又可得到满意的高表达基因荧光信号。结论根据荧光蛋白表达和蛋白吸光度判断,950μF电容和0.4cm的放电杯中转染淋巴细胞,电场强度270 V/cm的效率最佳。
- 寇筱囡王亚婷郭芳娄晔郭其林刘胜全汪晶冰吴晓棠唐晓红
- 关键词：电场强度电穿孔稳定转染
- 一种可调控式吸氧雾化三通装置
- 本实用新型提供一种可调控式吸氧雾化三通装置，包括第一端、第二端和第三端，第一端置于第二端与第三端连接处中心位置，第一端与第二端及第三端连接处呈“T”字形设置，第二端与第三端成“U”字形设置，第一端开口方向与第二端开口方向...
- 赵云峰周晓莉丁薇刘明张诚实冯契靓张青崔栋慧汪勇翁雨好徐娟秀王亚婷
- 文献传递
- 快速分离和鉴别转基因单克隆细胞的改良方法
- 2016年
- 目的探索快速有效的从稳定转染后的悬浮多克隆细胞中分离、纯化并鉴定出单克隆的技术改良法。方法电穿孔法稳定转染后的T淋巴细胞系先在分离培养基中扩增成多克隆,用有限稀释法分离出单个细胞,一部分用丝裂霉素C处理的饲养细胞培养扩增单克隆,一部分进行无饲养细胞扩增,用未转染的T淋巴细胞系的新鲜培养上清换液,对比两法的单克隆得率。检测单克隆的靶基因整合则先用荧光素酶报告实验再结合引物PCR扩增法,筛选出表达标记蛋白并整合有完整特异基因片段的单克隆。结果两种方法在分离培养基中存活增殖的活细胞克隆数量比例分别为5.27%和4.55%,无显著差异,通过荧光素酶报告基因实验确定完整整合外源基因的靶克隆比率(0.80%和0.57%)也无显著差异。单克隆的报告荧光素酶表达强度显著高于多克隆和对照,比较直观快速。结论无饲养细胞法避免了饲养细胞复燃污染单克隆细胞,简化了步骤提高了效率,能保证单个细胞在选择培养基中成功扩增出单克隆。荧光素酶报告基因实验能快速、有效检测出外源整合基因的表达。
- 王亚婷李新娜张丽娜郭芳杜鹃赵溶冰张正银周晓娜汪晶冰李剑华刘敏方宏罡
- 关键词：饲养细胞单克隆培养上清丝裂霉素C
- 长效β2激动剂合用激素与单用激素对支气管哮喘患者诱导痰白细胞介素10和嗜酸粒细胞数和肺功能的影响
- 用长效β2受体激动剂和糖皮质激素(简称激素)复合制剂(舒利迭)吸入与单独使用激素(辅舒酮) 吸入治疗急性发作期支气管哮喘(简称哮喘)患者,观察其诱导痰中白细胞介素10(IL-10)、嗜酸粒细胞和肺功能的变化。选用本院门诊...
- 李丽王亚婷蒋轶文赵莹孔灵菲
- 文献传递
- 两种ENA抗体检测法的对比分析
- 2003年
- 王亚婷李玲崔秀明荣峻梅苏艳丽王树祥
- 关键词：免疫印迹自身免疫性疾病
- 中国HIV-1 B’/C亚型感染者对自身病毒中和作用与疾病进展关系的研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨中国HIV-1 B’/C亚型感染者对自身病毒中和作用与疾病进展的关系。方法:将24例HIV-1 B’/C感染者自身原代病毒与同期和6个月自身血浆作用后,感染正常PBMC,培养7天测定p24抗原浓度,以正常人血浆加病毒悬液为对照。以抑制50%对照孔p24浓度的血浆最高稀释倍数的倒数计算中和抗体滴度,中和抗体滴度≥8倍为具有中和作用。结果:在同期血浆中和自身病毒试验中,3例缓慢进展者(SP)均具有中和作用,HIV组仅4例(4/21)具有中和作用,SP组中和抗体滴度明显高于HIV组。在6个月血浆中和自身病毒试验中,SP组中和抗体滴度明显增加,HIV组12例具有中和作用,SP组中和抗体滴度明显高于HIV组。中和抗体滴度与病毒载量呈明显的负相关。结论:疾病缓慢进展的HIV-1 B’/C亚型感染者对自身病毒中和作用明显高于HIV组,提示中和抗体在延缓疾病进程中发挥重要作用。
- 包名家耿文清崔华露张晓丽徐东兵年华赵敏王亚婷姜拥军王亚男韩晓旭张旻张子宁尚红
- 关键词：HIV-1中和抗体疾病进展
- 长效β_2激动剂合用激素与单用激素对支气管哮喘患者诱导痰白细胞介素10和嗜酸粒细胞数导的影响
- 李丽王亚婷蒋轶文赵莹孔灵菲
- 血栓弹力图杯放置架
- 1.本外观设计产品的名称：血栓弹力图杯放置架。;2.本外观设计产品的用途：用于放置和夹持血栓弹力图杯。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状。;4.最能表明设计要点的图片或照片：立体图1。
- 秦纪华王亚婷赵菊华刘泰辰邓添艺秦皓凯赵江
- 93例原发闭经患者的染色体核型及临床分析被引量：4
- 2015年
- 原发闭经[1]是指年龄超过13周岁,第二性征未发育;或年龄超过15周岁,第二性征已发育,月经还未来潮,是妇产科较常见的疾病。其发病机理复杂多样,其中由于染色体异常而引起的原发闭经是常见的原因之一。所以,对患者进行染色体核型分析有助于疾病的诊断和治疗。为此,我们对2008年1月至2013年12月来我院妇产科就诊93例原发闭经患者进行了染色体核型分析。现报告如下。
- 汪晶冰马洪星王亚婷吴晓棠曹秀华
- 关键词：原发闭经染色体核型分析性别决定染色体结构异常性反转综合征
- ELISA法结合MEIA法检测HBsAg阳性结果复查策略的临床应用
- 2009年
- 王亚婷唐晓红于英蛟李剑华高颖马丽
- 关键词：酶联免疫吸附测定免疫酶技术
