王伯瑶
- 作品数：196 被引量：579H指数：13
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金会项目美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- 哺乳动物抗菌肽:结构与功能及其基因表达调节
- 本文就近几年来对哺乳动物(特别是人)免疫细胞抗菌肽研究的主要进展综述如下介绍了抗菌肽的分子结构改造及上皮细胞内源性抗菌肽基因的诱导表达及其信号转导.
- 王伯瑶吴琦黄宁
- 关键词：抗菌肽分子结构基因表达调节
- 文献传递
- 大鼠膀胱粘膜抗菌蛋白的分离被引量：1
- 1994年
- 以１％乙酸冲洗雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠膀胱粘膜获得膀胱粘膜酸溶性提取物，ＡＵ－ＰＡＧＥ分析表明，膀胱粘膜提取物含１０余条主蛋白带，但不含已知的杀菌物质溶菌酶和防御素样分子。利用琼脂糖弥散法和电泳凝胶琼脂糖弥散法杀菌试验发现，膀胱粘膜提取物有两条主蛋白带对致病性大肠杆茵ＭＬ－３５Ｐ耐药株有强杀菌活性，这两条杀菌蛋白带命名为ＲａｔＢＰ－１和ＲａｔＢＰ－２，分别占膀胱粘膜提取物蛋白质总量的５％和２％。本实验的结果首次提示，大鼠膀胱粘膜内存在的抗菌蛋白，可能是膀胱粘膜杀菌的分子基础。
- 吴琦徐罗玲王伯瑶陈学奎
- 关键词：膀胱防御机制抗菌蛋白粘膜
- 人淋巴结中HMGN2蛋白的分离纯化及其亚细胞分布研究被引量：2
- 2010年
- 从人淋巴结中分离与纯化HMGN2蛋白,探讨HMGN2分子抗菌作用及其在淋巴结中的亚细胞分布。我们采用高效液相色谱分离纯化,琼脂糖弥散法筛选纯化组分的抗菌活性,对活性组分进行质谱分析测定精确分子量,进行Western-blot检测同源性。结果成功从人淋巴结中分离纯化出的活性蛋白,对致病性大肠杆菌54080有抗菌活性,质谱精确分子质量测定、Western-blot分析证明此活性蛋白即为HMGN2分子,免疫组化实验结果显示在淋巴结组织细胞细胞浆和细胞核均有HMGN2蛋白分布。从人淋巴结组织成功分离纯化出纯度较高、具有生物活性的HMGN2蛋白,可能参与了体内的天然免疫防御作用。
- 李薇张平孔祥丽李燕陈思秀冯云吴琦王伯瑶
- 关键词：人淋巴结HMGN2分离纯化亚细胞定位
- 人β-防御素-2基因5′-端转录调控序列分析被引量：2
- 2002年
- 目的 :对在LPS、TNF α刺激下 ,人 β 防御素 2基因 5′ 端转录调控机制进行初步分析。 方法 :将HBD 2基因 5′ 端上游序列连接入无启动子的pEGFP 1质粒 ,构建了系列 5′端缺失的 pEGFP 1 /HBD 2报告质粒。pEGFP 1 /HBD 2质粒转染细胞后给予LPS、TNF α刺激 ,用RT PCR检测 pEGFP的mRNA浓度。 结果 :显示HBD 2基因上游 2 41段有较强的启动子活性 ;LPS、TNF α刺激后 ,即使上游序列缩短至 2 41位点时 ,报告基因 pEGFP的mRNA表达量仍明显增高。说明HBD 2基因上游 2 41区域含有LPS、TNF α刺激后激活的转录因子作用位点。计算机分析表明 2 3 2 / 2 2 2区域有一同源性极高的NF kB结合元件 ,提示NF kB结合元件可能调控HBD
- 汪宇辉王国兴黄宁吴琦王伯瑶
- 关键词：转录调控LPSTNF-Α抗菌肽
- 突变MyD88重组质粒的构建及其抑制绿脓杆菌诱导的A549细胞IL-8表达
- 构建突变MyD88真核表达质粒(MyD88 DN),转染人呼吸道上皮细胞株A549,探讨其对绿脓杆菌及其分泌产物刺激IL-8表达的影响.结果显示:突变MyD88成功构建入pcDNA3.1/zeo真核表达质粒,转染A549...
- 冯艳王芳陈襄文冯云黄宁王伯瑶吴琦
- 关键词：白细胞介素-8呼吸道炎症
- 文献传递
- LL-37抗菌肽重组及其治疗实验性内毒素血症的研究被引量：3
- 2005年
- 目的重组抗菌肽LL-37并探讨其治疗内毒素血症的疗效。方法提取人肺腺上皮SPC-A-1细胞总RNA,RT-PCR扩增出LL-37肽cDNA,构建pGEX-1λT-LL-37重组质粒并转染大肠杆菌JM 109,培养转染细菌并诱导表达融合蛋白,裂解细菌,亲和层析出融合蛋白,裂解融合蛋白生成LL-37肽,高压液相色谱法提纯LL-37;建立BALB/C小鼠内毒素血症模型并观察LL-37的疗效。结果重组肽核苷序列5′-端比天然序列多4个密码子,N-端多4个氨基酸残基。小、大剂量LL-37治疗组(Ⅰ组、Ⅱ组)及内毒素血症组(Ⅲ组)6h存活率分别为62.5%、87.5%、0;Ⅰ、Ⅱ组平均存活时间和最长存活时间均长于Ⅲ组;Ⅰ、Ⅱ组24h后小鼠存活率有差异,量效关系明显。结论重组抗菌肽LL-37可用于内毒素血症的治疗。
- 冯新富黄玉兰张忠民石承先陈晓理王伯瑶
- 关键词：内毒素血症
- 炎症信号受体TLR-4基因的克隆及真核表达
- 2004年
- 为探讨TLR 4基因在真核细胞的表达情况 ,用RT PCR技术从人脐静脉血管内皮细胞总RNA扩增TLR 4全密码子cDNA序列。限制性内切酶HindⅢ和BamHⅠ双酶切真核表达质粒pcDNA3和TLR 4cDNA片段 ,构建重组质粒pcDNA3 TLR4。用Dosper阳离子转染试剂包裹质粒 ,转染人胚肾 2 93细胞 (HEK 2 93细胞 )。用免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术分析TLR 4基因表达。结果 :从人脐静脉血管内皮细胞扩增出 2 72 6bp的TLR 4cDNA片段。经PCR、酶切及序列测定分析证实质粒 pcDNA3内插入了TLR 4cDNA片段 ,免疫荧光细胞化学染色和流式细胞术分析均检测到TLR 4基因在人胚肾 2 93细胞表达。本研究显示重组真核表达质粒 pcDNA3 TLR4在HEK 2 93细胞表达TLR 4蛋白 。
- 梁峰胡大一王伯瑶陈槐卿
- 关键词：TLR-4基因克隆真核表达炎症性疾病
- 双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素-2 mRNA的表达被引量：5
- 2003年
- 目的 检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞β-防御素 - 2 (h BD- 2 )基因的激活作用及其活性组分。方法 应用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法和 Northern杂交检测 HT- 2 9细胞 h BD- 2 m RNA的表达 ;采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取等方法分离双歧杆菌胞壁蛋白质成分。结果 RT- PCR和 Northern杂交分析显示 ,在正常培养条件下 HT- 2 9细胞无可见的 h BD- 2 m RNA表达信号 ,但在双歧杆菌菌体、细胞壁和胞壁蛋白刺激下均检测出显著的 h BD- 2 m RNA表达。结论 双歧杆菌能诱导人肠腺上皮细胞 h BD- 2基因的表达 。
- 王国兴冯云汪宇辉黄宁吴琦王伯瑶
- 关键词：Β-防御素-2基因表达
- HMGN2分离制备及其趋化性研究
- 2006年
- 目的:建立分离天然HMGN2的方法并研究其抗菌性与对中性粒细胞的趋化活性。方法:5%高氯酸对子宫纤维囊腺瘤组织进行萃取,萃取物通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)直接进行分离,Tricine-SDS-PAGE,AU-PAGE和Western-Blot对蛋白分子进行鉴定,采用Transwell实验检测HMGN2对中性粒细胞的趋化性。结果:分离出高纯度的HMGN2,HMGN2对大肠杆菌有杀菌活性但HMGN2在体外不能趋化中性粒细胞运动。结论:建立简单、直接分离高纯度的天然HMGN2的方法,有助于对其进一步研究,我们发现HMGN2对大肠杆菌有杀菌活性但它不能通过趋化中性粒细胞发挥作用。
- 李恒周新娥史恺路会侠黄宁王伯瑶
- 关键词：抗菌活性趋化性高氯酸
- 天然免疫系统非克隆识别机制的进展被引量：7
- 1999年
- 本文综述了高等动物存在两大相互依存、相互作用的完整的抗感染防御系统,即天然免疫的非克隆识别机制和以克隆选择为基础的获得性免疫。天然免疫的非克隆识别机制诱导抗原提呈细胞表达共刺激因子,触发获得性免疫反应,并通过释放细胞因子引导获得性免疫系统发生特异的免疫效应反应。在天然免疫反应中,通过胚胎细胞编码的受体识别病原体几种特有的保守分子,诱导天然免疫细胞表达抗菌肽、共刺激因子和效应细胞因子。认识天然免疫识别的分子机制,在疫苗设计和发展免疫治疗新举措上,意义重大。
- 王伯瑶吴琦黄宁
- 关键词：天然免疫共刺激作用
