王志英 作品数:179 被引量:736 H指数:13 供职机构: 东北林业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 国家林业公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 自动化与计算机技术 更多>>
转基因白桦对舞毒蛾的抗性研究 被引量:10 2007年 白桦(Betula platyphylla)是我国北方的乡土树种,主要分布在东北、华北、西北。由于白桦材质优良、材色洁白、表面光滑,是人造板材的优质原材料,在林业生产上具有重要经济价值。但在白桦天然次生林和人工林培育中常常遭受各种害虫的危害,降低了其材积生长和木材质量,影响木材的利用率,给林业经济造成巨大损失。以往对白桦害虫的控制措施多采用化学防治手段,不仅造成环境污染、杀伤天敌、破坏生物多样性和生态平衡,同时导致害虫产生抗药性和防治效果下降。利用基因工程的方法,将杀虫基因导入白桦,使其获得持久、稳定的抗虫性能,是害虫生物防治的新途径之一(Katia et al.,1993;张锐等,2001;程业明等,2001;金风,2004)。本文以作者转化的抗虫基因白桦为材料(王志英等,2005),对舞毒蛾幼虫生长发育的影响和抗虫性进行了测定,目的是为抗虫白桦苗木定向培育奠定科学基础。 王志英 薛珍 范海娟 詹亚光关键词:白桦 杀虫基因 蜕皮 白桦的遗传转化及转基因植株的抗虫性 被引量:36 2003年 应用农杆菌介导法首次向白桦 (Betula platy phyllaSuk .)基因组中导入抗虫基因 [蜘蛛杀虫肽与苏云金杆菌杀虫毒蛋白基因 (Bt基因 )C肽序列的嵌合基因 ]。转化结果表明 :共培养 2d的脱菌及防止腐烂的效果和转化率均高 ,液体共培养及液体除菌优于固体共培养及固体除菌 ;最佳外植体为大叶片 ;侵染 2个月之后产生抗性愈伤组织 ,转化率达到 2 2 %。卡那霉素抗性植株中 ,GUS阳性率为 4 3%。进行杀虫肽和nptⅡ基因的PCR(聚合酶链式反应 )均检测出目的带。转化植株目的基因的PCRSouthern(DNA印记杂交 )杂交呈阳性 ,证明获得了转基因植株。 詹亚光 王玉成 王志英 杨传平 刘志华 李彩华关键词:白桦 分子生物学检测 抗虫性 向小黑杨转化蜘蛛杀虫毒素基因(英文) 被引量:10 2006年 近年来,危害小黑杨Populussimonii×P.nigra的害虫发生严重,给林业生产造成很大损失。为了提高小黑杨的抗虫能力,避免使用杀虫剂带来的污染,用农杆菌介导法将澳大利亚漏斗蛛Atraxrobustus的毒蛋白基因和苏云金芽孢杆菌CryⅠA(b)基因C末端的融合基因BGT转化入小黑杨。PCR和Southern印记分析转基因植株,结果表明,BGT杀虫基因已经整合在小黑杨基因组上。活性实验表明,取食转基因杨树6天和9天后,舞毒蛾Lymantriadispar2龄幼虫的校正死亡率分别是37.0%和92.6%。方差分析表明取食转基因和对照杨树的舞毒蛾幼虫体重差异显著。这些结果显示转基因杨树上的舞毒蛾的发育速率受到影响。 林同 王志英 刘宽余 景天忠 张传溪关键词:小黑杨 基因转化 害虫防治 舞毒蛾 复凝聚法制备苏云金杆菌微胶囊 被引量:1 2014年 [目的]探讨复凝聚法制备以明胶和阿拉伯胶为壁材的苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)微胶囊的工艺。[方法]通过单因素试验,研究了明胶浓度、阿拉伯胶浓度、芯壁比、pH、反应温度和转速对微胶囊包埋效率的影响,再通过正交优化试验确定最佳制备条件。利用光学显微镜、扫描电子显微镜和粒径测微仪对苏云金杆菌微胶囊形态及粒径分布进行表征。[结果]复凝聚法制备苏云金杆菌微胶囊最佳工艺条件为明胶浓度1.0%,阿拉伯胶浓度1.0%,芯壁比1∶1,复凝聚反应pH 3.6,温度40℃,搅拌速度550 r/min。在此条件下的包埋率达82.32%,粒径分布均匀且平均粒径在28.29μm左右流动性好的球型固体微胶囊。[结论]该微胶囊符合实际应用需求,为杀虫剂的研制提供了理论依据。 李姗 王志英关键词:苏云金杆菌 明胶 阿拉伯胶 复凝聚法 微胶囊 转LdOA1基因果蝇品系GSTs基因表达及对溴氰菊酯胁迫响应 被引量:1 2016年 舞毒蛾是重要林业食叶害虫,揭示其G蛋白偶联受体介导G蛋白对GSTs的调控,这对于挖掘分子靶标开发新型杀虫剂具有重要意义。本文构建转LdOA1基因果蝇载体,获得表达LdOA1基因果蝇品系,分析了转基因果蝇GSTs基因表达量及对溴氰菊酯胁迫的响应,为明确昆虫OA1基因功能提供理论依据。通过传统的酶切-连接方法构建重组载体pUAST-att B-LdOA1,采用转基因技术构建表达LdOA1基因的纯合果蝇品系;利用PCR技术验证转基因果蝇品系;并运用实时荧光定量RT-PCR技术测定转基因果蝇GSTs Delta家族基因表达量及低浓度溴氰菊酯胁迫对GSTs基因表达量的影响。PCR扩增条带显示转LdOA1基因果蝇品系均能检测到453 bp目的基因条带。与非转基因果蝇相比,转LdOA1基因果蝇品系中GSTs Delta家族基因(除GSTd4和GSTd7)均上调表达,为非转基因组1.01-3.27倍。低浓度溴氰菊酯胁迫6 h,非转基因果蝇GSTd6和GSTd10基因被显著诱导激活,而其他GSTs基因被显著抑制,抑制率为6.48%-95.84%;胁迫12-72 h,GSTs基因(除GSTd1和GSTd10外)均被显著抑制。低浓度溴氰菊酯胁迫转基因果蝇GSTs表达量变化趋势与非转基因果蝇基本一致,但转基因果蝇品系GSTs表达量显著高于非转基因果蝇品系(除12-48 h GSTd1和GSTd10),且胁迫6 h表达量最大。这些结果表明LdOA1基因可能介导G蛋白信号通路调控下游GSTs Delta亚家族基因表达响应溴氰菊酯胁迫。 孙丽丽 刘鹏 王志英 梁斌 曹传旺关键词:舞毒蛾 GSTS 樟子松挥发性有机物释放动态及其抑菌作用 被引量:10 2014年 利用SUMMA采样罐收集樟子松(Pinus sylvestnis var.mongolica Litv.)挥发物,通过预浓缩仪与气质联用系统对樟子松挥发物进行分析。研究结果表明:春、夏、秋三季樟子松挥发物的主要成分有萜类、烷烃、烯烃类、醇类、呋喃类、醛类、酮类和含氮化合物7大类物质,其中萜类、烃类物质占主体,且随季节变化显著。(+)-2-蒈烯(占挥发物总量36.84%)、(+)-莰烯(占挥发物总量22.28%)是构成春季挥发物的主要成分,夏季则以2-氯-1-丙烯(占挥发物总量34.31%)为主,秋季以(E)-2,7-二甲基-3-辛烯-5-炔(占挥发物总量59.19%)、桧烯(占挥发物总量11.35%)、莰烯(占挥发物总量9.05%)、β-蒎烯(占挥发物总量6.88%)、β-月桂烯(占挥发物总量4.01%)为主。樟子松的挥发物对空气中的细菌具有抑制作用,以夏季抑菌作用最强。 郭阿君 王志英 邹丽关键词:樟子松 挥发物 抑菌作用 转基因小黑杨对舞毒蛾的抗性测定 被引量:2 2006年 对转Bt-C肽+蜘蛛杀虫肽基因小黑杨的抗虫性做了系统的测定,取食转基因杨树舞毒蛾幼虫与对照相比,其发育速率为54.6%~72.8%、校正死亡率为72.8%~96.9%、体重降低率为11.2%~62.4%.证明抗虫基因已成功转入杨树中,并且表现出显著的抗虫性. 熊忠平 孟繁君 王志英 王威关键词:小黑杨 转基因 抗虫性 3种农药对红裸须摇蚊体内蛋白质质量分数和AChE活性的影响 被引量:13 2011年 为评价农药对水生生物的毒理效应,测定了氧化乐果、毒死蜱和三氟氯氰菊酯对红裸须摇蚊(Propsi-locerus akamusi)4龄幼虫的毒力、蛋白质质量分数和AChE活性的影响。结果表明,氧化乐果、毒死蜱和三氟氯氰菊酯24 h LC50分别为9.055、1.087、0.040μg.L-1,表现出高杀虫活性。这3种药剂的高质量浓度(2、4μg.L-1)处理3 h组,红裸须摇蚊体内蛋白质质量分数均低于对照,而0.125μg.L-1处理24、48 h其体内蛋白质质量分数均高于对照。红裸须摇蚊幼虫体内AChE对3种农药处理表现不同的时间—剂量效应。氧化乐果处理随着质量浓度和时间的增加,红裸须摇蚊幼虫体内的AChE活性抑制逐渐减少;而0.125μg.L-1毒死蜱对其体内AChE活性表现为诱导增加,其余处理随着时间的增加对AChE活性抑制逐渐减少;三氟氯氰菊酯处理3 h,其体内AChE活性随着处理质量浓度的增加而增大,但24、48 h处理组AChE均表现为抑制减少。因此,红裸须摇蚊AChE可作为监测有机磷和菊酯类农药污染的生物指示物。 葛士林 曹传旺 王志英关键词:摇蚊 农药污染 生物指示物 深绿木霉发酵液对山新杨防御酶活性的影响 被引量:6 2014年 [目的]探究深绿木霉发酵液对山新杨5种重要植物防御酶活性的影响,为木霉菌代谢产物在木本植物上的应用奠定基础。[方法]测定不同稀释倍数深绿木霉发酵液对山新杨组培移栽苗的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、苯丙氨酸解氨酶以及多酚氧化酶活性的影响。[结果]深绿木霉发酵液处理后山新杨叶片组织中防御酶活性明显高于对照组,且不同稀释倍数发酵液之间存在较大差异,其中以50倍和100倍稀释液处理效果最佳。[结论]为今后利用深绿木霉代谢物质防治杨树病害提供了理论依据。 孙健 王志英 刘志华 遇文婧 刁桂萍关键词:深绿木霉 发酵液 防御酶 深绿木霉1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶基因的克隆及表达 被引量:2 2016年 以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,应用聚合酶链式反应(PCR)技术克隆获得1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶ACCD基因的c DNA全长。结果表明:此基因的c DNA编码区序列全长1 083 bp,编码区可编码360个氨基酸。经Blast P相似性分析,其属于Try-synth-beta-Ⅱ家族,与里氏木霉(T.reesei)氨基酸序列XP-006967764的同源性最高,达到91%。在5种不同诱导条件下,ACCD基因的表达量均有明显变化。在C、N饥饿培养基中分别培养8 h与16 h时,ACCD基因表达量达到最大值,为未诱导时的22.7倍与22.4倍;在山新杨叶粉与茎粉的诱导下,ACCD的表达量分别在培养的24 h与2 h达到最大,为未诱导的22.6倍与27.3倍。 刁桂萍 李松阳 王志英关键词:深绿木霉 脱氨酶