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滇黄芩再生植株中黄酮类化合物的组织化学定位及黄芩苷的含量测定被引量：1: 2010年; 应用植物组织化学定位方法,研究了组织培养滇黄芩再生植株中黄酮类化合物的积累分布状态;并且通过HPLC对滇黄芩再生植株中黄芩苷的含量进行测定。结果表明,滇黄芩再生植株黄酮类化合物主要存在于营养器官的表皮和皮层,以及茎、叶腺毛中。同时,测定再生植株中黄芩苷的含量表明,地下部分(根)含量为0.12%;地上部分(茎、叶)含量为0.43%。; 岑举人步怀宇孔祥鹤王英娟贾敬芬; 关键词：滇黄芩再生植株组织化学黄芩苷

中药滇黄芩的一种器官发生方法: 本发明提供了一种利用植物组织培养技术培养滇黄芩，获得稳定遗传稳定再生植株的方法。该方法将茎切成段接种于愈伤诱导培养基MSP1上诱导愈伤组织，生长旺盛的愈伤组织转移到分化培养基MSP2诱导芽的分化，将组培芽苗接种于生根培养...; 步怀宇岑举人王英娟赵宇玮贾敬芬

一种用于转化莱茵衣藻的AANAT基因植物双元表达载体及其构建方法: 本发明公开了一种含有莱茵衣藻褪黑素合酶<I>AANAT</I>基因的植物双元表达载体。其将莱茵衣藻褪黑素合酶<I>AANAT</I>基因、博莱霉素抗性基因Ble和植物双元表达载体pRI101‑AN重组得到表达载体pRI1...; 王英娟张雨靖高文英杨泽熵吕亚维

玉米Ubi-1启动子在可育转基因玉米植株中的表达活性被引量：8: 2002年; 本工作将玉米泛素基因-1启动子(Ubi-1)与大肠杆菌β-葡糖苷酸酶基因(gus,uidA)的编码区融合,通过基因枪粒子轰击方法转化来自玉米未成熟胚盾片组织的Ⅰ-型愈伤组织,经PFF选择获得可育的玉米转基因植株,并采用组织化学方法分析了Ubi-1启动子驱动的gus基因在不同组织、细胞中的表达活性,发现gus基因在除花药壁以外的其它所试组织中均可以有效表达。Ubi:GUS在花粉、卵细胞和T_1代转基因植株未成熟胚中的表达显示该启动子在植株发育的早期阶段即具有活性。对T_0代转基因植株的花粉进行GUS组织化学染色,gus基因呈1:1分离,显示外源基因在转基因植株中以孟德尔方式遗传。同时发现,使用玉米本身的启动子Ubi-1可以降低外源基因在转基因玉米中的拷贝数,进而避免基因沉默现象的发生。目前已得到第二代转基因种子。; 徐子勤贾敬芬郝建国王英娟冯淑珍; 关键词：GUS基因花药壁植株发育组织化学染色

重组贻贝黏蛋白Mgfp-5的表达及功能评价被引量：4: 2017年; 贻贝(Mytilus)中富含各种黏附蛋白,其中贻贝足丝蛋白5(Mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)是贻贝与外界基质进行黏附的主要蛋白分子之一。贻贝黏蛋白天然提取时产量低、易凝固且纯化困难,通过化学合成和基因工程等方法重组贻贝黏蛋白解决该问题。本研究在E.coli BL21(DE3)中表达了贻贝蛋白Mgfp-5,亲和层析纯化到Mgfp-5蛋白的含量为12.25%,纯度为96.92%;酪氨酸酶修饰Mgfp-5后,其DOPA(多巴,3,4-二羟基苯丙氨酸)含量为9.60 pmol/g,是修饰前的9.32倍,生物黏性增强到1 116 n N,是Cell-Tak TM黏性的1.60倍;3.0μg/cm2的Mgfp-5蛋白的毒性级别为1级;Mgfp-5浓度≤20μg/m L时对红细胞无溶血现象,具有生物安全性。本研究可为重组Mgfp-5蛋白研究奠定基础,同时为来源于Mgfp-5黏蛋白的临床生物黏合剂的研制提供参考。; 吕亚维王睿劼张雨靖高文英杨泽滳王英娟; 关键词：DOPA 黏附性

一种诱导毛脉蓼产生毛状根的方法: 本发明公开了一种诱导毛脉蓼产生毛状根的方法，其以毛脉蓼叶片为外植体，通过发根农杆菌株W.T15834对其诱导形成毛状根，培养得到大量毛脉蓼毛状根。本发明利用离体培养建立无菌快繁体系的基础上，利用发根农杆菌转化毛脉蓼，可以...; 王英娟步怀宇

转mgfp-5基因烟草的愈伤诱导及培养被引量：2: 2017年; 海洋软体动物贻贝(Mytilidae)足丝腺分泌的贻贝粘蛋白(mussel adhesive protein,MAP)即贻贝足丝蛋白(mussel foot protein,Mfp),不仅有水中高粘性及耐腐蚀性,而且无毒、无免疫原性,生物相容性好,其中Mfp-5粘性最强。现用的贻贝粘蛋白主要是天然获取,但是其含量低易固化难获得,基因工程重组贻贝粘蛋白的研究刚刚开始。前期我们在烟草中表达了地中海贻贝蛋白(mytilus galloprovincialis foot protein type 5,Mgfp-5)基因,得到转mgfp-5基因烟草种子。本实验将转基因T1代种子无菌苗进行愈伤组织诱导,在附加不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA的MS培养基上,诱导率≥90.0%,其中2,4-D 1.0 mg/L、6-BA 0.5 mg/L、NAA 0.1 mg/L时诱导率为100%;愈伤组织固/液培养过程中均以"S"型曲线生长,固体培养时12~27 d鲜质量增长率为3.73%,液体培养时间缩短6 d,在6~15 d时间内鲜质量会增加8.56~8.63倍;固/液培养的继代愈伤组织,PCR、RT-PCR及Western blotting分别检测到预期大小的电泳条带,显示了外源mgfp-5基因及Mgfp-5蛋白稳定表达。稳定表达Mgfp-5蛋白的愈伤组织,可以为获得重组蛋白Mgfp-5的原材料提供新途径,为研究植物表达贻贝粘蛋白提供参考。; 王英娟王睿劼吕亚维张雨靖杨泽熵; 关键词：转基因烟草

裂叶荆芥的组织培养和快速繁殖: 2007年; 1植物名称裂叶荆芥[Schizonepeta tenufolia（Benth．）Briq．]，又称假苏、四棱杆蒿。2材料类别种子无菌萌发苗的叶和茎段。3培养条件种子萌发培养基：（1）MS；不定芽诱导和分化培养基：; 王英娟赵宇玮贾敬芬; 关键词：快速繁殖分化培养基种子萌发不定芽诱导植物名称无菌萌发

高效液相色谱测定小蔓长春花中长春胺的方法优化被引量：1: 2010年; 采用不同比例的甲醇-1%二乙胺（pH 7.5）、甲醇-1%碳酸铵、乙腈-1%二乙胺（pH 7.5）、乙腈-1%碳酸铵为流动相,在比对保留时间的基础上加以光谱确认,并对小蔓长春花提取液中长春胺保留时间及其分离情况进行研究,以选择测定长春胺的最佳流动相体系。结果显示：在甲醇-碳酸铵、乙腈-碳酸铵、乙腈-二乙胺体系中,长春胺峰很难完全分离,其光谱扫描结果与标准品不一致;而在甲醇-二乙胺体积比为65∶35时,长春胺峰可实现基线分离,其光谱扫描结果与标准品一致,且长春胺在0.05-0.5 g/L范围内与峰面积线性关系良好（R2=0.997）,平均加样回收率为100.71%（n=5）,RSD=2.23%。研究表明,甲醇-1%二乙胺（体积比为65∶35,pH 7.5）为测定小蔓长春花中长春胺含量的最佳流动相体系,可用于小蔓长春花药材的质量监控。; 侯恩太李多伟王英娟倪士峰陈千良; 关键词：长春胺反相高效液相色谱流动相

AtNHX1基因对菊苣的转化和耐盐性研究被引量：17: 2009年; 用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得42株卡那霉素(Kan)抗性再生植株。经过PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验,结果显示,相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度NaCl胁迫后,植株叶片K+和Na+含量测定结果显示,转基因植株叶片比野生型积累更多的Na+和K+,维持较高的K+/Na+;叶片相对电导率测定结果表明,转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高菊苣耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。; 赵宇玮王英娟步怀宇郝建国贾敬芬; 关键词：ATNHX1 菊苣农杆菌耐盐性

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