目的:探讨miR-483-5p对人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因P3启动子驱动的m RNA(P3 m RNA)表达的影响及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法:(1)采用real-time PCR检测人肝癌细胞株Huh7、Hep3B、Bel-7402、Hep G2和SMMC-7721,人正常肝细胞株HL-7702,83例人肝细胞癌组织和配对的癌旁组织,22例正常肝组织中miR-483-5p和P3 m RNA的表达水平,并应用Pearson相关分析评估P3 m RNA与miR-483-5p表达水平之间的关系。(2)将IGF2基因P3 m RNA的5’端非翻译区(5’UTR)克隆入p GL3启动子载体,构建P3 m RNA 5’UTR野生型(p GL3-P3-5’UTR-WT)及P3 m RNA 5’UTR突变型(p GL3-P3-5’UTR-MUT)重组萤光素酶报告质粒,将其分别与miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及scrambled control共转染He La、293T及Huh7细胞,采用双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性。(3)分别将miR-483-5p mimic、miR-483-5p inhibitor及scrambled control转染Huh7及Hep3B肝癌细胞,应用real-time PCR检测这2种肝癌细胞P3 m RNA表达水平的变化。(4)应用real-time PCR检测肝癌细胞Huh7及Hep3B的细胞核和细胞质中miR-483-5p的表达水平;应用核连缀实验(nuclear run-on assay)分析miR-483-5p对P3 m RNA转录的影响;应用RNA稳定性实验分析miR-483-5p对P3 m RNA稳定性影响。(5)应用体外细胞功能实验研究miR-483-5p对Huh7肝癌细胞生长、凋亡、迁移与侵袭能力的影响。结果:(1)5种肝癌细胞株miR-483-5p及P3 m RNA表达水平均明显高于正常肝细胞株HL-7702(P<0.01),肝细胞癌组织中miR-483-5p及P3 m RNA表达水平均明显高于配对的癌旁组织及正常肝组织(P<0.01);线性相关分析显示,在5种肝癌细胞株及肝细胞癌组织中,P3 m RNA表达水平均与miR-483-5p水平呈正相关。(2)萤光素酶实验显示,miR-483-5p与P3m RNA 5’UTR的同源位点互补结合可促进P3 m RNA的表达。(3)瞬时转染实验显示,过表达miR-483-5p呈剂量依赖性促进Hep3B和Huh7肝癌细胞P3 m RNA表达水平的增高。(4)miR-483-5p表达�
目的评价血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）治疗肝硬化门静脉高压症（PHT）的疗效。方法检索PubMed、EMBASE、Web of Seience、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库（维普）、万方数字化期刊全文数据库等关于血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂降低肝硬化门静脉压力的随机对照试验，使用RevMan5．（）版软件对入选试验进行Meta分析。结果共9个随机对照试验包含327例病人符合人选标准，其中5个为ARB与安慰剂或空白对照对比的对照试验，另4个为ARB与普萘洛尔对比的对照试验。Meta分析结果显示：①ARB降低肝静脉压力梯度的幅度明显大于安慰剂或空白对照（WMD=1．88mmHg，95％CI：0．99～2．77mmHg，P〈（）．0001），而与普萘洛尔相比无统计学差异（WMD=0．92mmHg，95％CI：-0．41～2．26nLTIHg，P=0．17）。②ARB降低平均动脉压幅度明显大于安慰剂或空白对照（WMD=8．94mmHg，95％CI：7．24410．63mmHg，P〈0．006I）1），而与普萘洛尔相比差异无统计学意义（WMD=0．4lmmHg，95％CI：-4．46～5．28mmHg，P=0．87）；ARB与空白对照相似，对心率无明显影响（P〉（）．05），但普萘洛尔与ARB相比则可显著降低病人心率（WMD=-21．25，95％CI：-25．83～（-16．68），P（0．00001）。⑧ARB对病人血清胆红素及肌酐的影响与安慰剂或空白对照相比差异无统计学意义（P〉0．05）；ARB组其他不良反应发生率（P：0．03）高于安慰剂，而与普萘洛尔组相比差异无统计学意义（P=0．72）。结论ARB可有效降低肝硬化PHT病人的门静脉压力。其疗效及对血压的影响与普萘洛尔相似，对心率及肝肾功能无明显影响，不良反应相对较少，可能成为肝硬化PTH治疗的一种新选择。
