蔡在龙
- 作品数：88 被引量：356H指数：10
- 供职机构：生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 小鼠肝脏部分耐热蛋白的初步研究被引量：1
- 2004年
- 目的:研究小鼠肝脏中具有耐热特性的蛋白质,尤其是与肝功能、肝脏再生有密切关系的耐热蛋白。方法:将小鼠肝脏蛋白在65℃处理30 min,去除热变性蛋白,剩余耐热蛋白进行二维电泳,经过考马斯亮蓝染色,得到小鼠肝脏耐热蛋白二维电泳图谱,共约50个蛋白斑点。其中选取5个相对分子质量在10 000-50 000、分离效果较好的斑点进行MALDI-TOF-MS肽质量指纹谱分析及生物信息学处理。结果:这5个蛋白分别为:谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)、蛋白酶体亚单位(AF060087)、尼克酰胺乙酰乙酸水解酶(nicotinate-nucleotide pyrophosphorylase)、延胡索酰乙酰乙酸水解酶(fumary-lacetoacetate hydrolase)和regucalcin。结论:初步证明肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶、尼克酰胺乙酰乙酸水解酶、延胡索酰乙酰乙酸水解酶和regucalcin具有较强的耐热特性。
- 张振峰高红亮蔡在龙毛积芳焦炳华
- 关键词：耐热性蛋白二维电泳肽质量指纹谱
- 适体的临床应用被引量：2
- 2003年
- 适体 (aptamer)因其与靶分子结合的高亲合力及强特异性 ,而具有广泛的应用价值。近年来对适体功能的研究多集中在分子和细胞水平 ,要将适体应用于临床治疗必须进一步对适体在动物体内及人体内的活性功能进行研究。
- 游兴姬毛积芳蔡在龙
- 关键词：适体靶分子RNA单链DNA
- Citrostatin的构建与活性分析被引量：1
- 2006年
- 目的:本研究拟通过人工化学合成技术将2个不同机制发挥抗癌作用的小肽结合起来,产生一个融合肽Citrostatin,并研究其生物学活性,以期获得具有双重抗肿瘤功能的抗肿瘤肽。方法:化学合成Citrostatin并经HPLC分离纯化,通过内皮细胞杀伤实验、细胞毒活性分析、体外管状结构生成抑制实验,以及鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验分析Citrostatin的生物学活性。结果:Citrostatin可明显抑制内皮细胞ECV304的增殖(ED50为6.2μg/ml),有效杀伤肿瘤细胞1990及NCI-H640细胞(ED50分别为50μg/ml、16μg/ml),并明显抑制体外管状结构生成及鸡胚绒毛尿囊膜血管的生成。结论:本研究成功构建并合成了抗肿瘤融合48肽Citrostatin,研究表明该融合肽同时具有抑制肿瘤组织新生血管形成和直接杀伤肿瘤的双重活性。
- 马丽杨生生杨志峰陈欢蔡在龙
- 关键词：融合肽抗肿瘤药血管生成抑制
- pheB/xylE基因分别编码的二种邻苯二酚2、3-双加氧酶在大肠杆菌中的亚克隆与高表达
- 蔡在龙
- 胃肠道间质瘤中原癌基因c-kit突变及其蛋白表达被引量：23
- 2002年
- 目的 探讨c kit基因蛋白表达及基因突变在胃肠道间质瘤 (GIST)发病中的作用及其与临床病理、预后的关系。方法 采用免疫组化和聚合酶链反应单链构象多态性技术 (PCR SSCP)方法 ,检测 82例GIST中c kit蛋白的表达及c kit基因exon 11突变的情况。结果 全组c kit蛋白的阳性率为 97.6 % (80 / 82 ) ,c kit基因突变率为 4 1.5 % (34/ 82 )。良性GISTc kit蛋白表达率为 95 .0 %(19/ 2 0 ) ,c kit基因突变为阴性 ;恶性GISTc kit蛋白表达率为 98.4 % (6 1/ 6 2 ) ,c kit基因突变率为5 4 .8% (34/ 6 2 )。与基因突变阴性病例相比 ,突变阳性组的GIST容易出现邻近组织的侵袭、转移或者复发。结论 c kit蛋白是GIST的重要诊断指标 ;c kit基因突变在GIST发生发展中可能发挥重要作用 。
- 马大烈刘晓红蔡在龙谢强
- 关键词：胃肠道间质瘤蛋白表达C-KIT基因基因突变聚合酶链反应
- 941方对衰老大鼠肝线粒体酶活性的影响被引量：3
- 2001年
- 目的 :通过检测衰老大鼠肝组织细胞线粒体呼吸链氧化功能 ,探讨大鼠衰老时肝组织细胞线粒体呼吸链氧化功能的变化规律及 94 1方延缓衰老的作用机制。方法 :分别从 4月龄 (青年组 )、 2 4月龄 (老龄组 )和 94 1方组大鼠的肝组织分离出线粒体 ,并用双缩脲法测定单位组织的线粒体蛋白 ,用Clark氧电极极谱法分别测定线粒体呼吸链 3个氧化酶活性 :NADH氧化酶(NADHOX)、琥珀酸氧化酶 (SUCOX)和细胞色素氧化酶 (CYTOX)。用差光谱法 (联二亚硫酸钠还原减正铁氢化钾氧化的消光值 )获得细胞色素a、b、c和c1含量 (Cyta、Cytb、Cytc和Cytc1)。结果 :与青年组大鼠比较 ,老年组大鼠的肝组织细胞线粒体含量有一定下降 ,而 3个氧化酶活性却显著增加 ,同时细胞色素含量尤其是Cytb和Cytc显著升高。 94 1方组大鼠肝组织细胞线粒体上述指标皆显著高于青年组和老年组。结论 :衰老大鼠肝组织线粒体酶活性与青年组有显著不同 ,表明衰老过程中肝细胞通过某种反馈机制使残存完好的线粒体氧化功能代偿性增强 ;94 1方使这种作用进一步增强。目的 :通过检测衰老大鼠肝组织细胞线粒体呼吸链氧化功能 ,探讨大鼠衰老时肝组织细胞线粒体呼吸链氧化功能的变化规律及 94 1方延缓衰老的作用机制。方法 :分别从 4月龄 (青年组 )、 2 4月龄 (?
- 俞超芹缪明永凌昌全蔡在龙王学敏毛积芳赵伟康
- 关键词：延缓衰老衰老
- 抗菌肽融合蛋白基因、其重组载体、其转化体及其表达产物
- 本发明属于基因工程药物领域，具体涉及抗菌肽citropin 1.18融合蛋白基因、含有该基因的重组载体合转化体以及该基因的表达产物、体外酰胺化及其用途。本发明所公开的一种抗菌肽citropin 1.18融合蛋白，含有与抗...
- 马丽蔡在龙雷呈祥杨生生储智勇张术
- 文献传递
- 慢性哮喘肺组织组蛋白去乙酰化酶活性降低对气道平滑肌细胞表型转变的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨慢性哮喘病理生理过程中肺组织组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性变化趋势及其对气道平滑肌细胞表型及生物学性状的影响。方法构建慢性哮喘小鼠模型,检测肺组织HDAC活性。以HDAC抑制剂曲古霉素A(TSA)刺激体外培养的大鼠气管平滑肌及人原代支气管平滑肌细胞,采用蛋白质印迹、MTT、Transwell及三维凝胶收缩等方法检测抑制HDAC活性对气道平滑肌细胞表型转变的影响及其相应的细胞增殖、迁移、收缩能力的变化。结果慢性哮喘组小鼠肺组织HDAC活性为(0.371±0.054)μmol/(L·μg),较正常对照组的(0.603±0.034)μmol/(L·μg)显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。TSA(0.5μmol/L)作用后12～24h,体外培养的大鼠气管平滑肌环及人支气管平滑肌细胞的α-sm-actin、SM22-α表达明显增加,作用后24h及48h支气管平滑肌细胞数目分别为(1.719±0.044)×104及(1.808±0.009)×104个,明显低于空白对照组的(1.911±0.048)×104及(2.537±0.01)×104个(P<0.05)。血小板源性生长因子(PDGF)诱导的支气管平滑肌细胞迁移数也在TSA作用后显著降低(88±7.632vs52±7.5,P<0.05)。此外,TSA作用24h后的三维凝胶收缩率[(9.885±7.084)%]较空白对照组[(44.844±3.808)%]及PDGF组[(41.315±7.943)%]明显降低(P<0.05)。结论慢性哮喘小鼠肺部HDAC的活性下降,可能与气道平滑肌细胞向"收缩型"转变有关,但HDAC活性下降并不增加细胞的收缩能力。
- 胥武剑宁允叶洪伟峻邵艳蔡在龙李强
- 关键词：哮喘平滑肌细胞组蛋白脱乙酰基酶类曲古霉素A
- 一种利用实时定量PCR扩增单核甘酸多态性（SNP）位点的检测异基因移植后嵌合率的新方法
- ＜正＞目的:建立一种SNP-PCR定量检测异基因移植后供受嵌合率（DC）的新方法,探讨其可行性、准确性及优越性。方法:利用18个SNP位点筛选移植前每一对供受者,实时定量PCR（RQ-PCR）对筛选出的差异位点行嵌合率定
- 邵宇王健民龚胜兰蔡在龙章卫平宋献民
- 文献传递
- 葛根素对子宫内膜RL95-2细胞P450芳香化酶表达的调控作用(英文)被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨葛根素对子宫内膜RL95-2细胞P450芳香化酶(aromatase P450,P450arom)表达的影响及其对RL95-2细胞P450arom基因表达的调控作用。方法:将梯度稀释的葛根素在不同时间点加入RL95-2细胞中,分别采用实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测药物对RL95-2细胞P450arom mRNA表达水平的影响。以人类基因组DNA为模板扩增人P450arom组织特异性启动子2(PⅡ)转录起始位点上游序列。PCR产物定向克隆到报告基因载体pGL3-Basic中,构建人P450aromPⅡ系列报告基因质粒,并经限制性内切酶消化鉴定和基因测序证实。瞬时转染系列重组质粒至RL95-2细胞,加入葛根素刺激,分析相关转录因子,利用RT-PCR及Western blotting方法检测相关转录因子在葛根素作用下mRNA及蛋白表达的变化。结果:与溶剂对照组比较,低浓度葛根素会抑制P450arom mRNA表达(P<0.01),抑制作用在6、12 h较显著(P<0.01)。经酶切鉴定、基因测序、转录因子分析及启动子活性测定,成功构建了人P450aromPⅡ系列重组质粒(-1 017,-763,-543,-234^+8 bp)。瞬时转染系列质粒至细胞中,于12 h后加入葛根素(10-7mol/L)刺激,又12 h后检测荧光蛋白水平。结果表明,-763^-543 bp间的活性被抑制(P<0.05),通过转录因子分析找到了-410/-401 bp的AP-1(c-jun/c-fos)。利用RT-PCR、Western blotting及荧光素酶活性检测发现葛根素(10-7mol/L)对AP-1(c-jun/c-fos)的抑制作用平行于对P450arom的作用。结论:低浓度葛根素对子宫内膜RL95-2细胞P450芳香化酶基因表达的抑制作用很可能是受上游调控转录因子AP-1(c-jun/c-fos)的影响。
- 李燕巍蔡在龙沈慰杨生生俞超芹
- 关键词：葛根素芳香化酶P450子宫内膜异位症
