袁立
- 作品数:5 被引量:11H指数:2
- 供职机构:厦门大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 鸡胚胎干细胞分离方法和培养体系的优化被引量:9
- 2011年
- 背景:胚胎干细胞是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系。而鸡胚胎干细胞则是从X期鸡胚的胚盘分离而来。目的:优化鸡胚胎干细胞分离方法和离体培养体系。方法:采用滤纸纸环-发环的方法从X期鸡胚分离胚盘细胞,并采用STO细胞作为饲养层和大鼠肝细胞(BRL)条件培养基(CM)+细胞因子作为离体培养体系对分离的胚盘细胞进行培养。结果与结论:滤纸纸环-发环法获得的完整胚盘率为75%~85%,克隆形成率约为50%。BRL-CM+饲养层培养体系,鸡胚胎干细胞可传至7代,而BRL-CM+饲养层+细胞因子培养体系,鸡胚胎干细胞可传至25代。分离到的鸡胚胎干细胞,经碱性磷酸酶染色、SSEA-1染色鉴定,表明鸡胚胎干细胞处于未分化状态。提示,实验不仅优化了鸡胚胎的分离方法,获得完整且杂质少的胚盘,而且进一步优化了鸡胚胎干细胞体外培养体系。
- 张曼玉陈志胜计慧琴陈胜峰刘本杰邓衔柏王丙云袁立江青艳
- 关键词:胚胎干细胞细胞因子
- 厦门大学教育部双语示范课程《细胞生物学》的建设与发展回顾被引量:2
- 2014年
- 双语教学目前在国内各高校的教学中占据越来越重要的地位。双语教学要求使用英文原版教材,从师资配置到教学及考核方法都提出了更高的要求。本文对厦门大学教育部双语示范课程《细胞生物学》的建设与发展过程进行了总结,并对教学过程中存在的问题进行了探讨。
- 叶军袁立
- 关键词:细胞生物学双语教学
- 神经轴突导向分子在肿瘤血管新生中的作用及其机理
- 袁立
- 该项目的研究目标是通过筛选在肿瘤组织中高表达的神经轴突导向因子,用慢病毒介导的RNA干扰质粒建立稳定的基因沉默细胞系,在此基础上研究神经轴突导向因子对于肿瘤血管新生和转移的影响。通过对28株11种肿瘤细胞的检测,项目最终...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤细胞转移肿瘤血管新生
- 鸡Vezf1基因RCAS干扰载体构建及鉴定
- 2015年
- 为研究Vezf1基因在鸡胚早期发育过程中的作用,构建了针对鸡Vezf1基因的RCAS病毒RNA干扰载体,分别在鸡胚细胞和胚胎水平对Vezf1基因实施沉默,通过Real-time PCR和原位杂交法检测目的基因m RNA表达水平。结果表明,基于RCAS病毒的干扰载体可以在鸡胚成纤维细胞和活体鸡胚中成功沉默Vezf1基因的表达。此研究为利用鸡胚模型深入了解Vezf1基因在早期发育过程中的作用提供了素材。
- 张超葛君袁明婧叶军袁立
- 关键词:RNAI鸡胚
- 鸡Rad51蛋白的体外表达与纯化及其抗血清的制备
- 2011年
- 目的:Rad51蛋白在双链断裂的DNA修复的同源重组中发挥重要作用。因而其过量表达在细胞内的基因操作中被用于在提高基因同源重组的效率。当前在鸡中还未有针对该蛋白的特异性抗体。为此我们对鸡的Rad51进行了体外表达与纯化,并制备了cRad51抗体,为该蛋白质在鸡细胞中的功能研究及探讨其用于鸡细胞中提高同源重组的研究提供有效工具。方法:对鸡Rad51基因进行全长克隆并构建原核表达载体pET-28a(+),用IPTG诱导该蛋白在Rosseta菌株中表达,纯化后注射BALB/c小鼠获得抗体。结果:成功制备鸡Rad51特异多克隆抗体,ELISA显示该抗体血清效价达51 200,该抗体血清可以用于Western等的蛋白检测技术。结论:针对鸡基因产物制备抗体的技术方法有效可行;首次成功获得鸡Rad51蛋白及多克隆抗体,为与该蛋白相关的研究提供了有效工具。
- 刘宽灿王恒孟艳敏叶军袁立
- 关键词:蛋白表达抗体制备