郑瑞娟
- 作品数：65 被引量：172H指数：9
- 供职机构：上海市肺科医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学政治法律更多>>
- 焦磷酸测序技术快速检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性
- 目的建立焦磷酸测序技术快速检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性方法。方法应用生物素标记的引物扩增耐氧氟沙星gyrA基因片段,用焦磷酸测序仪检测92株结核分枝杆菌临床分离株gyrA基因氧氟沙星耐药决定区的突变情况,与H37Rv序...
- 周燕郑瑞娟秦莲花王洁陆俊梅乐军胡忠义
- 文献传递
- SELEX技术筛选结核分枝杆菌MPT64蛋白DNA适配子方法学研究被引量：2
- 2008年
- 目的利用指数富集配体系统进化（SELEX）技术筛选能与结核分枝杆菌MPT64蛋白特异结合的寡核苷酸适配子。方法体外合成长度为78个核苷酸的随机ssDNA文库，利用sELEX技术筛选，以MPT64蛋白为靶物质进行12轮筛选，利用生物素-亲和素显色系统检测寡核苷酸与蛋白的结合性。结果SELEX技术筛选MPT64蛋白适配子的技术体系：PCR扩增的最佳退火温度为65℃；文库优化时，最佳Mg^2＋的浓度为1．5mmol／L；不对称PCR法制备ssDNA时，Mg^2＋的浓度为0．75mmol／L；以酶联板为介质筛选时，在10轮后筛选达到饱和，且随着筛选轮数的增加，PCR扩增产物的电泳条带逐渐单一、致密，亲和性检测显示第10轮获得的适配子库，比初始的文库亲和性吸光度（A）值增加了9．18倍。将适配子库克隆，随机挑取10个单克隆子，利用混合夹心法检测其与MPT64的亲和性，亲和性范围分布在0．572—1．606之间。结论已初步筛选到与MPT64蛋白高亲和性结合的DNA适配子。
- 秦莲花郑瑞娟杨华冯永红王洁胡忠义
- 关键词：结核分枝杆菌SELEX亲和性
- 16SrDNA结合显色法芯片技术鉴定分枝杆菌的方法学研究被引量：3
- 2008年
- 目的建立16SrDNA结合显色法芯片技术(玻璃芯片转尼龙膜显色法)鉴定分枝杆菌的方法。方法利用GenBank中细菌16SrDNA保守区序列,设计两对分枝杆菌属特异性通用引物,采用双重PCR法同时扩增16SrDNA的2个不同片段;根据已知16种分枝杆菌的16SrDNA序列,设计合成对应的特异性寡核苷酸探针。先用通用引物PCR扩增所有标准菌株DNA,PCR产物分别与16种分枝杆菌探针的玻璃芯片杂交,通过尼龙膜显色进行分析。结果应用显色法芯片技术分析16种分枝杆菌标准菌株和5种非分枝杆菌菌株,对其双重PCR、杂交、洗涤条件进行优化。确定双重PCR最佳退火温度为52℃,在该温度下除5株非分枝杆菌外均产生2条DNA片段,大小分别为272～280bp和183～192bp;杂交温度32℃、2×SSC洗涤5min、0.2×SSC洗涤1min,16种分枝杆菌的杂交效果最好,特异性达100%。结论用显色芯片法检测16SrDNA,可准确鉴别16种分枝杆菌。
- 赵源景奉香刘志辉王洁郑瑞娟陆俊梅赵辉尹俊胡忠义
- 关键词：分枝杆菌
- 一种检测结核易感性的检测标靶、引物及试剂
- 本发明提供了一种用于检测结核易感性的检测标靶、引物以及试剂和试剂盒，通过所述引物进行检测人体外周血基因组DNA中EBI3基因、NOTCH4基因、BTLA基因多态性，并以上述SNP位点为标靶设计引物，测定样品基因型，通过测...
- 戈宝学郑瑞娟唐神结刘海鹏陈家霞
- 文献传递
- 结核分枝杆菌MPT64蛋白适配子的筛选与鉴定被引量：10
- 2008年
- 目的利用指数富集配体系统进化（SELEX）技术筛选能与结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64特异性结合的寡核苷酸适配子，寻找早期诊断结核病的方法。方法体外合成随机单链DNA（ssDNA）文库，以MPT64蛋白为靶物质，采取SELEX技术进行12轮筛选，将适配子库克隆、测序后，用DNAMAN软件对其结构进行分析，经生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定亲和力，并利用捕获适配子与检测适配子组成的“三明治”夹心法对获得的适配子进行初步验证。将13个非结核分枝杆菌菌株和BCG菌株作为阴性组计为0，将结核分枝杆菌和牛结核分枝杆菌组作为阳性组计为1，采用MedCalc软件分析受试者操作特征曲线，确定最佳阳性判定值，并构建散点图。结果经12轮筛选后，随机挑选15个适配子与MPT64蛋白的亲和性进行分析，吸光度值为0．492—1．243，73．3％的适配子的吸光度值在1．0以上；二级结构分析显示，适配子与MPT64蛋白亲和性的基础主要是大口袋茎环结构，口袋与环之间的茎桥含有不同数量的GC碱基对；“三明治”夹心法对阴性组[非结核分枝杆菌标准菌株及卡介苗（BCG）株]和阳性组（结核分枝杆菌实验室H37Rv株及临床株、牛结核分枝杆菌标准株）共47个菌株培养上清的检测结果显示，在临界（cut-off）值为0．61时，H37Rv、牛结核分枝杆菌组为阳性，BCG株为阴性；阴性组标本的阴性检出率为85．7％，阳性组标本的阳性检出率为87．9％，表现出一定的检测价值。结论已初步筛选到与MPT64蛋白具有高亲和性的DNA适配子。
- 秦莲花马占忠郑瑞娟刘忠华陆俊梅胡忠义
- GPR160调控分枝杆菌入侵宿主巨噬细胞的机制研究（英文）
- 结核分枝杆菌可入侵宿主巨噬细胞,调控机体免疫应答,从而逃避宿主免疫监视和药物攻击。G蛋白耦联受体(GPCRs)广泛地参与细胞的各类生理和病理活动的调控,但其在结核分枝杆菌入侵宿主细胞中的功能尚不明确。本室前期研究发现在B...
- 杨华刘海鹏陈建霞黄晓辰郑瑞娟刘忠华戈宝学
- 关键词：BCG入侵巨噬细胞
- 文献传递
- 人类宿主易感基因多态性与结核病和耐药结核病发生的相关性研究进展被引量：10
- 2010年
- 耐药和耐多药结核病（MDR—TB）的流行是目前结核病疫情居高不下的重要原因，根据我国2007--2008年开展的全国结核病耐药性基线调查结果估算，我国每年新发MDR-TB患者12万例，占全球每年新发总数（51万）的24．0％，位居全球第2位。导致MDR．TB发生的高危因素有糖尿病、营养不良、人免疫缺陷病毒（HIV）感染和免疫抑制治疗等宿主因素，不合理用药方案、错误用药剂量和不规则用药等医疗因素，
- 沙巍唐神结肖和平郑瑞娟刘一典
- 关键词：耐药结核病宿主因素易感基因多态性人免疫缺陷病毒耐多药结核病免疫抑制治疗
- 加强结核病耐药性检测新技术研究迫在眉睫被引量：2
- 2011年
- 据WHO最新完成的《耐多药结核病和广泛耐药结核病：2010年全球监测与反应报告》估计，2008年全球范围内耐多药结核病患者有44万例，其中有1／3已死亡。超过50个国家存在广泛耐多药结核病患者，中国在全球27个耐多药结核高负担国家[即估计每年发生至少4000例耐多药结核病和（或）至少10％新登记的耐多药结核病患者的国家]中排行第2，仅次于印度。
- 郑瑞娟胡忠义
- 关键词：耐药结核病耐药性检测耐多药结核病结核病患者WHO新登记
- 结核分枝杆菌CFP10和MPT48及TB8．4融合蛋白的表达与临床应用被引量：3
- 2012年
- 目的构建结核分枝杆菌CFP10、MPT48和TB8．4融合蛋白，评价其用于结核病血清学检测的价值。方法选取2008年上海市肺科医院肺结核患者150例，非结核肺部疾病患者70例，健康体检者103名，采集血清标本共323份。构建结核分枝杆菌CFP10、MPT48和TB8．4融合表达载体。融合蛋白经免疫印迹分析后，采用酶联免疫吸附试验检测血清标本，运用Medcalc11．5对结果进行统计学分析。结果成功构建重组质粒pET21a—cfp10—mpt48-tb8．4，获得95％以上纯度的融合蛋白。免疫印迹法发现融合蛋白与血清抗体发生免疫反应。融合蛋白检测血清抗体敏感度56．7％（85／150），特异度90．8％（157／173），其中非结核病患者特异度为85．7％（60／70），健康体检者特异度为94．2％（97／103）。结论CFP10-MPT48-TB8．4融合蛋白所具有的免疫反应性，有可能成为结核病血清学诊断的候选抗原。
- 刘忠华杨华秦莲花金瑞良崔振玲郑瑞娟毕爱笑胡忠义
- 关键词：分枝杆菌结核细菌蛋白质类重组融合蛋白质类
- GPR160调控分枝杆菌入侵宿主巨噬细胞的机制研究
- 结核分枝杆菌可入侵宿主巨噬细胞,调控机体免疫应答,从而逃避宿主免疫监视和药物攻击.G蛋白耦联受体(GPCRs)广泛地参与细胞的各类生理和病理活动的调控,但其在结核分枝杆菌入侵宿主细胞中的功能尚不明确.本室前期研究发现在B...
- 杨华刘海鹏陈建霞黄晓辰郑瑞娟刘忠华戈宝学
- 关键词：BCG入侵巨噬细胞
