郑耀虎
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金国家自然科学基金创新研究群体项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 在活体小鼠中筛选lZP3基因RNAi有效靶位点的研究被引量：4
- 2006年
- ZP3作为精子结合的靶对象在卵母细胞受精中起着关键作用,也因此而成为研究哺乳动物受精机理的焦点。本研究参照新疆草原兔尾鼠卵透明带3(zonapellucida3geneofLaguruslagurus,lZP3)的mRNA,选择了针对lZP3mRNA的3个区域合成寡聚核苷酸连接到干扰载体pGenesil-1上,构建了3个针对lZP3mRNA的重组干扰载体,和pCDNA3-lZP3表达载体采用脂质体法共转染Hela细胞以及通过尾静脉大容量快速注射法(Hydrodynamics-basedtransfectionmethod,HD法)共注射小鼠,半定量RT-PCR和real-timePCR检测Hela细胞和小鼠肝脏中lZP3mRNA的表达情况,以筛选干扰lZP3mRNA的有效靶位点。结果表明,通过HD法共注射干扰载体和表达载体后,外源基因mRNA在小鼠肝脏中的表达和共转染Hela细胞后在Hela细胞中的表达情况是一致的,有2个干扰载体可以有效干扰lZP3mRNA的表达。研究还说明,利用HD法以小鼠作为实验材料筛选RNA干扰的有效靶位点是一条切实可行的方法。
- 庄淑珍李菁菁郑耀虎张富春
- 关键词：RNA干扰靶位点共转染
- 水动力转染鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达
- 2007年
- 采用水动力转染技术将含有家鸡PPARγ基因的真核表达质粒、表达该基因siRNA的干扰质粒注射到小鼠体内,并利用RT-PCR方法检测PPARγ基因在小鼠脏器中的表达情况,以建立检测重组质粒瞬时表达和筛选siRNA序列的有效方法。结果表明:注射重组质粒pcDNA3/PPARγ后家鸡PPARγ基因在小鼠的肝脏中高效表达;同时注射重组质粒pcDNA3/PPARγ和表达该基因siRNA序列的干扰质粒pGenesil-1/PPARγshRNA1后,家鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达明显地受到抑制。与传统的真核细胞转染技术相比,水动力转染技术具有快速、简单、方便、高效、安全、成本低等优点,可作为外源重组DNA表达的检测和siRNA的筛选等一种有效的方法。
- 王启贵王娉庄淑珍郑耀虎李辉张富春
- 关键词：小鼠PPARΓ基因
- 新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)毕赤酵母高密度发酵条件的研究被引量：1
- 2004年
- 新疆家蚕抗菌肽具有明显的抑菌活性 ,利用基因工程技术生产新疆家蚕抗菌肽有助于实现工业化生产 .本研究探索通过巴斯德毕赤酵母工程菌 SMD1 1 68高密度发酵生产新疆家蚕抗菌肽 ( Cecropin-XJ)的条件 ,包括培养基中碳源、氮源、初始 p H值、磷酸盐等因素对毕赤酵母工程菌生长和抗菌肽分泌的影响 .通过多因素正交实验确定了生产新疆家蚕抗菌肽高密度发酵培养的最适培养条件 ,条件优化后毕赤酵母工程菌发酵后密度OD6 0 0 可达 48.92± 0 .5 9,较优化前提高了 3倍 。
- 鲍勇刚朱馨蕾刘进马纪郑耀虎张海波张富春
- 关键词：家蚕抗菌肽毕赤酵母高密度发酵
- 花花柴Na^+/H^+反向运输载体的表达和抗血清制备被引量：3
- 2007年
- 文章建立了检测耐盐植物功能基因抗体制备和蛋白表达的方法。
- 郑耀虎张霞张富春曾幼玲
- 关键词：花花柴原核表达抗血清
- siRNA干扰lZP3 mRNA表达的研究
- 2007年
- 【目的】为探索新疆草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明带3(lZP3)在精卵结合中的机理,有效的控制草原兔尾鼠的生育;【方法】将RNA干扰载体pGenesil-ZP31和真核表达质粒p-ACLC一起通过尾静脉大容量快速注射法(Hydrodynamics-based transfectionmethod,HD法)共注射小鼠。【结果】半定量RT-PCR和real-timePCR结果表明,2种质粒共注射时,pGenesil-ZP31的干涉作用至少发生在注射后的8h到10d之间;顺序性注射实验中,注射pGenesil-ZP31后间隔8h和1d再注射p-ACLC时,pGenesil-ZP31能在一定程度上干涉lZP3mRNA的表达,间隔3d以后lZP3mRNA的表达几乎不受影响,未出现干涉现象。而注射p-ACLC后间隔1h、2h、4h和8h再注射pGenesil-ZP31,lZP3mRNA的表达也受到了抑制,间隔24h时抑制现象则消失;【结论】以载体为基础的体内RNAi过程具有时间依赖性,为在卵母细胞水平进一步研究siRNA对lZP3的干涉机制提供借鉴。
- 庄淑珍郭继娜郑耀虎李菁菁张富春
- 关键词：草原兔尾鼠RNA干扰载体卵透明带3
- 盐生植物花花柴和盐爪爪液泡膜Na～+//H～+反向运输载体的基因表达和抗体制备
- 新疆盐渍土面积广阔,盐渍土壤孕育的盐生植物对于维持新疆盐渍土-荒漠-绿洲复合生态系统平衡,促进区域经济发展起着重要的作用。花花柴/(Karelinia caspica/)和盐爪爪/(Kalidium foliatum/)...
- 郑耀虎
- 关键词：花花柴盐爪爪
- 文献传递
